GB T 14926.3-1994 实验动物 假结核耶氏菌检验方法.pdf
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GB T 14926.3-1994 实验动物 假结核耶氏菌检验方法.pdf
1、GB/T 14926.394 1 主题内容和适用范围 本标准规定的假结核耶氏菌检验方法，适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔。 2 引用标准 GB 4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂 3 材料和试剂 3.1 磷酸盐-胆盐-鼠李糖蛋白胨增菌液（PBRP） 3.1.1 成分： 3.1.2 制法：除胆盐和山梨醇外，加热溶解，然后加入胆盐和山梨醇，115灭菌15min或分装后灭菌，备用。 3.2 磷酸盐缓冲液（PBS）：GB 4789.28中3.45。 3.3 DHL 琼脂：GB 4789.28中3.19。 3.4 麦康凯琼脂：GB 4789.28中3.22。 3.5 三糖铁琼脂（
2、TSI）：GB 4789.28中3.24。 3.6 氨基酸脱羧酶培养基：GB 4789.28中2.12。 3.7 糖发酵培养基：GB 4789.28中2.2。 3.8 半固体琼脂：GB 4789.28中3.24。 3.9 苯丙氨酸琼脂：GB 4789.28中2.11。 3.10 尿素琼脂：GB 4789.28中2.15。 3.11 假结核耶氏菌诊断血清。 4 检验程序 蛋白胨 10gNa2HPO48.23g氯化钠 5gNaH2PO41.2g山梨醇 1g胆盐 1.5g蒸馏水 1000gpH 7.6页码，1/3GB/T 14926.3942006-3-30file:/C:Inetpubwwwroo
3、tdatagbbBE92603K.htm 5 操作步骤 5.1 增菌和分离：粪便标本或其他病灶标本直接分离于DHL或麦康凯琼脂平板，同时用PBRS增菌，25温箱培养2448h然后同上分离。分离平板于25 温箱培养48h观察结果，或按弱碱处理进行检查。 假结核耶氏菌和小肠结肠炎耶氏菌生化鉴别 项 目 假结核耶氏菌 小肠结肠炎耶氏菌符 号 符 号 VP37 - 0 - 025 - 0 +- 76.0鸟氨酸 - 0 + 93.2蔗糖 - 0 + 94.1水扬素 （+） 1.4 d 22.0肌醇 - 0 -+ 0.9山梨醇 - 0 + 98.3鼠李糖 + 100 - 0页码，2/3GB/T 14926
4、.3942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92603K.htm5.2 挑选可疑菌落：从每块平板上挑选可疑菌落35个，接种在TSI上，25温箱培养48h。 在TSI上，斜面反应红色，底层分解葡萄糖酸，变为黄色。 5.3 初步鉴定：25培养动力阳性，37动力阴性，蔗糖阴性，鸟氨酸阴性，尿素阳性，可初步定为假结核耶氏菌。 5.4 血清学鉴定：假结核耶氏菌分为6个血清群。用、群均有亚群。 5.5 假结核耶氏菌和小肠结肠炎耶氏菌生化鉴别见表。 5.6 结果报告 综上结果，动力37阴性，25阳性，蔗糖阴性，鸟氨酸阴性，尿素阳性，并结合系统生化反应，发出确切报告。 山梨糖 - 0 + 95.1纤维二糖 - 0 + 92.4七叶灵 + 100 d 19.5密二糖 + 90 - 0苦杏仁苷 - 0 + 92.4脂肪酶（玉米油）- 0 +（+） 70.3注：，阳性；，多数阳性，少数阴性；，多数阴性，少数是性；（），阳性或迟缓阳性；d不定；表内数为阳性。页码，3/3GB/T 14926.3942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92603K.htm
