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    GB T 13089-1991 饲料中恶唑烷硫酮的测定方法.pdf

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    GB T 13089-1991 饲料中恶唑烷硫酮的测定方法.pdf

    1、GB 1308991 本标准参照采用国际标准ISO 55041983含油种子及其去油后饼粕中异硫氰酸酯和唑烷硫酮的测定。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了饲料中唑烷硫酮的测定方法。 本标准适用于菜子饼粕和配合饲料中唑烷硫酮的测定。 2 原理 饲料中的硫葡萄糖苷被硫葡萄糖苷酶(芥子酶EC3.2.3.1)水解,再用乙醚萃取生成的唑烷硫酮,用紫外分光光度计测定。 3 试剂和溶液 除特殊规定外,本标准所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水或相应纯度的水。 3.1 乙醚:光谱纯或分析纯。 3.2 去泡剂:正辛醇(C6H17OH)。3.3 pH7.0缓冲液:取35.3mL0.1molL柠檬酸(C6H8O7H2

    2、O,HG 31108)溶液(21.01gL)于一个200mL容量瓶中,再用0.2molL磷酸氢二钠(GB 1263)溶液调节pH至7.0。 3.4 酶源:用白芥( Sinapis alba L.)种子(72h内发芽率必须大于85,保存期不得超过两年)制备。将白芥籽磨细,使80通过0.28mm孔径筛子,用正己烷或石油醚(沸程4060)提取其中脂肪,使残油不大于2,操作温度保持30以下,放通风橱于室温下使溶剂挥发。此酶源置具塞玻璃瓶中4下保存,可用6周。 4 仪器、设备 4.1 分析天平:感量0.000 1g。 4.2 样品筛:孔径0.28mm。 4.3 样品磨。 4.4 玻璃干燥器。 4.5 恒

    3、温干燥箱:1032。 4.6 三角烧瓶:25、100、250mL。 4.7 容量瓶:25、100mL。 4.8 烧杯:50mL。 4.9 分液漏斗:50mL。 页码,1/3GB 13089912006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbkK130890A.htm4.10 移液管:2mL。 4.11 振荡器:振荡频率100次min(往复)。 4.12 分光光度计:有10mm石英比色池,可在200300nm处测量吸光度。 5 试样制备 采集具有代表性的样品至少500g,四分法缩分至50g,再磨细,使其80能通过0.28mm筛。 6 测定步骤 6.1 称取试样(菜籽饼粕

    4、1.1g,配合饲料5.5g)于事先干燥称重(精确到0.001g)的烧杯中,放入恒温干燥箱(4.5),在1032下烘烤至少8h,取出置干燥器(4.4)中冷至室温,再称重,精确到0.001g。 6.2 试样的酶解 将干燥称重的试样全倒入一250mL三角烧瓶(4.6)中,加入70mL沸缓冲液(3. 3),并用少许冲洗烧杯,使冷却至30,然后加入0.5g酶源(3.4)和几滴去泡剂(3.2),于室温下振荡2h。立即将内容物定量转移至100mL容量瓶(4.7)中,用水洗涤三角烧瓶(4.6),并稀释至刻度,过滤至100mL三角烧瓶(4.6)中,滤液备用。 6.3 试样测定 取上述滤液(菜籽饼粕1.0mL,配

    5、合饲料2.0mL),至50mL分液漏斗(4.9)中,每次用10mL乙醚(3.1)提取两次,每次小心从上面取出上层乙醚。合并乙醚层于25mL容量瓶(4.7)中,用乙醚(3.1)定容至刻度。从200nm至280nm测定其吸光度值,用量大吸光度值减去280nm处的吸光度值得试样测定吸光度值 AE。 6.4 试样空白测定(菜籽饼粕此项免去, AB为零)按6.1、6.2、6.3同样操作,只加试样不加酶源(3.4),测得值为试样空白吸光度值AB。 6.5 酶源空白测定 按6.1、6.2、6.3同样操作,不加试样只加酶源(3.4),测得值为酶源空白吸光度值AC。 7 测定结果 7.1 计算公式 式中: X试

    6、样中唑烷硫酮的含量,以每克绝干样中唑烷硫酮的毫克数表示;页码,2/3GB 13089912006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbkK130890A.htm 若试样测定液经过稀释,计算时应予考虑。 7.2 结果表示 每个试样取2个平行样进行测定,以其算术平均值为结果。 结果表示到0.01mgg。 7.3 重复性 同一分析者对同一试样同时或快速连续地进行两次测定,所得结果之间的差值: 在唑烷硫酮含量小于或等于0.20mgg时,不得超过平均值的20; 在唑烷硫酮含量大于0.20mgg而小于0.50mgg时,不得超过平均值的15; 在唑烷硫酮含量等于或大于0.50mg/g 时,不得超过平均值的10。 AE试样测定吸光度值;AB试样空白吸光度值;AC酶源空白吸光度值;CP转换因素,吸光度为1时,每升溶液中唑烷硫酮的毫克数,其值为8.2;m 试样绝干质量,g。页码,3/3GB 13089912006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbkK130890A.htm


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