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    NY T 914-2004 饲料中氢化可的松的测定 高效液相色谱法.pdf

    • 资源ID:250856       资源大小:125.75KB        全文页数:6页
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    NY T 914-2004 饲料中氢化可的松的测定 高效液相色谱法.pdf

    1、ICS 65.120 B 46 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 914-2004 饲料中氢化可的松的测定高效液相色谱法Determination of Hydrocortisone in Feeds 一-High-performanceLiquid Dhromatography 2005一0个04发布200502-01实施中华人民共和国农业部发布NY /f 914-2004 前言本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准主要起草单位:农业部饲料质量监督检验测试中心(成都)、成都华西希望集团。本标准起草人:李云、林顺全、余林、冯娅。I NY /f

    2、 914-2004 饲料中氢化可的松的测定高效液相色谱法1 范围本标准规定了用高效液相色谱法(田LC)检测饲料中氢化可的松含量的方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预氓合饲料中氢化可的松地测定。本方法最低检测限为0.05mglkgo 2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GBf 6682 分析实验室用水规格和试验方法GBf 14699. 1 饲料采样方法3

    3、 方法原理用甲醇提取试样中的氢化可的松,以乙睛、水作为流动相,用高效液相色谱一一紫外检测法分离测定。4 试剂和溶液除特殊注明外,本法所用试剂均为分析纯,水符合GBf6682一级水的规定。4.1 乙睛色谱纯04.2 甲醇色谱纯。4.3 氢化可的松标准液4.3.1 氢化可的松标准贮备液准确称取氢化可的松标准品(纯度注98%)0.1000 g,置于100mL容量瓶中,用甲醇溶解,定容,其浓度为1000g/mL的储备液,置于4t冰箱中保存。4.3.2 氢化可的松标准工作液分别准确吸取一定量的标准贮备液(4.3.1),稀释10倍,用甲醇稀释、定容,配制成浓度为2.5g/mL、5.0周/mL、7.5周/m

    4、L、10.0周/mL、12.5周/mL、17.5周/mL的标准工作液。5 仪器和设备5.1 实验室常用仪器、设备。5.2 高效液相色谱仪配紫外检测器。5.3 电子天平感量0.0001g。5.4 离心机NY IT 914-2004 3000 r/mino 5.5 振荡器5.6 玻璃具塞三角瓶250mL。5.7 微量进样器5.8 微孔滤膜0.45mo 6 试样制备按GB/T14699. 1抽样,取有代表性的样品,四分法缩减取约200g,经粉碎,全部过40目孔筛,氓匀装入磨口瓶中备用。7 测定步骤7. 1 提取按不同的饲料产品,准确称取配合饲料、浓缩饲料2g-10 g,预混料。.5g-4 g(准确至

    5、0.0002g) 样品,置于250mL玻璃具塞三角瓶中,加入40mL甲醇,往复震葫30mn,静止10mn,过滤,再向饲料中分别加人30mL甲醇,重复提取2次。合并3次提取液,用甲醇定容至100mLo取10mL置离心管中,3000r/min离心5min,取上清液用0.45m微孔有机滤膜过滤作为试样制备液,供高效液相色谱分析。7.2 测定7.2.1 HPLC色谱条件色谱柱:C18柱,长240mm、内径4.6mm(i. d.),粒径5.0m或相当者。柱温:室温。流动相:乙睛十水=25 + 75( V + V)。流速:1 .0 mL/mino 波长:254nmo 进样体积:20Lo7.2.2 日PLC

    6、定量测定按仪器说明书操作,取适量试样制备液和相应浓度的标准工作液,作单点或多点校准,以色谱峰面积积分值定量。8 确证8.1 对检出氧化可的松的样品,应用重叠色谱分析来确证。8.2 重叠色谱法以试样提取液中加入适量的氢化可的松标准工作撤(4.3.2),加人的量应与提取液中的氢化可的松的量相当。依次注人样品的提取液、氢化可的松标准工作液(4.3.2)和添加了氢化可的松标准工作液(4.3.2)的样品提取液。如果添加氢化可的松标准工作液(4.3.2)的样品提取液样品所产生峰的半峰宽变化不大于10%,且峰高或峰面积发生了成比例的变化,则可确证原氢化可的松峰就是氢化可的松的。9 结果计算与表述9.1 计算

    7、公式2 NY/f 914-2004 试样中氢化可的松的含量按式(1)计算:ml X二. . . (1) l X n 式中:X一一试样中氧化可的松的含量,单位为毫克每千克(mglkg); mr一HPLC试样色谱峰对应的氢化可的松的质量,单位为微克(g);m一一试样质量,单位为克(g); 一稀释倍数。9.2 测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留至小数点后1位。10 重复性两个平行测定的相对偏差不大于10%。3 叮CON-叮5HFZ中华人民共和国农业行业标准饲料中氢化可的松的测定高效液相色谱法NY / T 914-2004 头中国农业出版社出版(;)巳京市朝阳区麦子店街l号楼)长争(邮政编码:100026 网址:) 中国农业出版社印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销长争夺* 字数5千字印张0.5开本880mmx 1230mm 1 /16 2005年4月北京第1次印刷印数:1 2 000册定价:6.00元版权专有僵权必究举报电话:(010) 65005894 2005年4月第1版书号:16109 519 NY厅914-2004


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