1、ICS 67.040 X 04 GB 中华人民共和国国家标准GB/T 5009.204一2005食品中丙烯酷肢含量的测定方法气相色谱-质谱CGC-MS)法GC-MS method for determination of acrylamide in food 2005-09-03发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会2005-12-01实施GB/T 5009. 204-2005 前言本标准的附录A为资料性附录。本标准由安徽省产品质量监督检验所提出。本标准由全国食品工业标准化技术委员会归口。本标准起草单位:安徽省产品质量监督检验所、国家农业标准化与监测中心(安徽)。本
2、标准主要起草人:程静、卢业举、蒋俊树、沈清、赵成仕、安虹、夏春。I 1 范围食品中丙烯酷肢含量的测定方法气相色谱-质谱CGC-MS)法GB/T 5009. 204-2005 本标准规定了食品中丙烯酷胶含量的气相色谱-质谱(GC-MS)联机测定方法。本标准适用于食品中丙烯酷胶含量的测定。本标准方法检出限为7g/峙。2 原理丙烯酷胶(acrylamide)系极性小分子化合物。食品中丙烯酷胶经水、醇类等极性溶剂提取，离心过滤和过柱等净化处理，澳化衍生生成2，3-二澳丙烯酷胶(2，3-DBPA)，气相色谱-质谱联机分析，图谱参见附录A。主要特征定性离子碎片(m/z):152、150、108、106，其
3、相对丰度比:150: 152= 1, 108: 106= 1, 108 : 152=0.6 , 106 : 150=0. 6(各丰度比与标准品相比最大相差20%)。定量离子(m/z):150。定量方法:标准加入法。3 试荆除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为二次蒸锢超纯水。3.1 正己烧:重蒸锢。3.2 乙酸乙醋:色谱纯。3.3 丙烯酷胶标准品:纯度:;?99%。丙烯酌胶标准溶液:准确称取适量的丙烯酷肢标准样品(精确至o.1 mg)，用甲醇定容，制备成100g/mL标准储备溶液(储存条件:存放于一200C冰箱中)。根据实验需要再用水稀释成适合浓度的标准使用语液(储存条件:OOC40C避光放置
4、，不得超过3d，建议现配现用)。3.4 无水硫酸饷:6500C灼烧4h，干燥器中放置保存。3.5 饱和澳水:二三3%。3.6 氢澳酸:二三40%。3. 7 硫代硫酸饷洛液(0.2mol/L)。3.8 甲醇。3.9 澳化饵。4 仪器和设备4. 1气相色谱质谱仪。4.2 振荡器。4.3 冷冻离心机(5000 r/min 10 000 r/min)。4.4 固相提取装置(石墨化碳黑柱，规格为CarbotrapB. SPE柱，500mg/3 mL)。4.5 粉碎机(或均质机)。4.6 精密天平(精度:0.1mg)。GB/ T 5009. 204-2005 4. 7 聚四氟乙烯活塞分液漏斗。4. 8 具
5、塞三角瓶。4. 9 O. 45m有机系过滤膜。5 推荐使用仪器条件5. 1 色谱柱:DB-5ms或柱效相当的色谱柱，30m X O. 25 mmXO. 25m。5. 2 色谱柱温度(程序升温):650C保持1min，然后以每分钟升温150C直到280oC，保持15min o 5. 3 进样口温度:2600C。5. 4 离子游、温度:2300C。5. 5 接口温度:280oC。5.6 离子源:EI源，70eV。5. 7 测定方式:选择离子监5. 8 载气:氮气C99.9991进样方式:恒流，6. 1 提取准确称取已、I.6.2.1 水相。次用5mL甲醇和5mL、6. 3 衍生化取柱(柱使用前依于
6、衍生化。净化后的溶液中加澳化OOC 40C下放置15h(避醋层，加10g左右无水硫酸纳脱水。滤膜净化。6. 4 测定6. 4. 1 定性分析采用选择监测离子扫描方式CSIM)监测在8.4min附近有峰出现，选定的定性离子Cm/z):150、152、106、108都出现，且各碎片离子的相对丰度比为:150:152=1、106: 108=1、106:150=0.6、108 : 152=0.6，各丰度比与标准品相比最大相差20%，即可确定样品中含有丙烯酌胶。2 1)对于含油较多的食品样品，在提取前用适量正己;院预先提取一次以除去大部分油脂。2)可根据样品具体情况调整溶剂使用量，一般溶剂量为样品量的5
7、倍10倍。3)对难以过泼、的样品，进行冷冻离心，转速5000 r/min10 000 r/min，时间1min5 min，温度0C4C。GB/T 5009. 204-2005 6.4.2 定量分析以添加的丙烯酷胶量为横坐标，以定量离子Cm/z:150)的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线进行定量分析，其线性回归方程为:5=走Xc+b(其中S为峰面积，走为斜率，c为浓度，b为截距)。6. 5 结果计算求出当5=0时c的绝对值，即为试样测定液中丙烯眈胶的浓度。样品中丙烯酷股含量按式(1)计算:AU nu nu一节ixu一R-1 一v-m 一fLV-X . C 1 ) 式中:在20g/kg不得超过算术平果
8、的绝对差值3 GB/T 5009. 204一2005附录A(资料性附录)丙烯酷腰衍生化产物2，3-二澳丙烯酷肢(2，3-DBPA)的离子固和质谱固丙烯酷胶衍生化产物2，3-二澳丙烯酷股(2，3-DBPA)的离子图和质谱图见图A.l图A.4:4 7.5 (X10 000) 气i了一5.0 、2.5-11斗t_J% 100.0 75.0 50.0 25.0 0.0 5.0 55 451 ,. I 50 5.0币五108.00 4.0; 106.00 3.0 -i 1. 0 0.0 . . .ll. 10.0 15. 0 20.0 25.0 固A.1 2，3-二澳丙烯酷肢总离子圈150 106 13
9、1 I 122 _i 6!L 18207 . 23i t必12Bi 100 150 200 250 圄A.22，3-二滇丙烯酷肢质谱圄B 8.25 8.50 8.75 图A.32，3-二i臭丙烯酷肢选择离子图I/mm .321 300 m/z 9.00 I/mm GB/T 5009. 204-2005 % 125.0 _, 100.0 -j 150 75.0 -106 50.0寸25.0 -:l 0.0 105.0 110.0 115.0 120.0 125.0 130.0 135.0 140.0 145.0 150.0 m/z 固A.42，3-二滇丙烯酷肢选择离子质谱圄5 由CON-gN.gomH筒。华人民共和国家标准食品中丙烯酷肢含量的测定方法气相色i普-质i蕾(GC-MS)法GB/T 5009. 204一2005国白峰中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码，100045网址电话，6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销当坠印张O.75 字数10千字2006年8月第一次印刷1/16 2006年8月第一版开本880X1230 7c 如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533定价10.009峰书号，155066 1-27809 GB/T 5009.204-2005
