1、ICS 67.200.20 B 33 GB 中华人民主t./、和国国家标准粮油检验GB/T 24903-2010 花生中自黎芦醇的测定高效液相色谱法Inspection of grain and oils-Determination of resveratrol in peanut by high performance liquid chromatography 2010-06-30发布数码1I1伪中华人民共和国国家质量监督检验检茂总局中国国家标准化管理委员会2011-01-01实施发布本标准的附录A为资料性附录。本标准由国家粮食局提出。目。吕本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。本标准起草
2、单位:南京财经大学、江南大学。本标准主要起草人:汪海峰、袁建、杨晓蓉、张连富。GB/T 24903-2010 I 1 范围粮油检验花生中白黎芦醇的测定高效液相色谱法GB/T 24903-2010 本标准规定了高效液相色谱法测定花生中白黎芦醇含量的原理、试剂和材料、仪器和设备、操作步骤及结果计算。本标准适用于花生果、花生仁中自毒草芦醇含量的测定。样品中白寨芦醇的检出限为0.1mg/kgo 2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文
3、件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理试样中的白黎芦醇用乙醇-水潜液提取，提取液离心后，取主清攘，用配有紫外检测器的高效液相色谱仪进行测定，以外标法定量。4 试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中二级要求。4. 1 元水乙醇。4.2 甲薛:色谱纯。4.3 乙睛:色谱纯。4.4 冰醋酸。4.5 85%乙醇溶液:取850rnL乙醇(4.1)，加150mL水，氓匀。4.6 液相流动相:乙腊+水+冰醋酸=25+75十O.090取250mL乙腊(4.3) ，加入750mL水和0.9 mL
4、冰醋酸(4.4)混匀，通过0.2m的滤膜(5.6)并脱气。4. 7 白事芦醇标准品:纯度二三99%。4.8 白黎芦醇标准储备榕液:准确称取12.5 mg(精确至0.0001 g)白黎芦醇标准品(4.7)，用甲醇(4.2)榕解并定容至250mL，得到50mg/L白黎芦醇标准储备液，避光保存于4oC冰箱备用。4.9 白毒草芦醇标准工作溶液:准确移取1mL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL白寨芦醇标准储备液(4.肘，用甲醇(4.2)稀释并定容至50mL，得到一系列的标准工作榕液(质量浓度分别为1mg/L、2 mg/L、4mg/L、6mg/L、8mg/L、10mg/L)。5 仪器和设备5. 1
5、 高效液相色谱仪:带紫外检测器。5.2 粉碎机:高速万能粉碎机，转速24000 r/min，或相当的设备。5.3 台式离心机:不低于5000 r/min，或相当的设备。1 GB/T 24903-2010 5.4 微量进样器:10L。5.5 天平:感量0.01g、0.0001 g。5.6 滤膜:孔径0.2m，直径25mm的聚酬膜或相当者。6 操作步骤6. 1 试样制备花生果样品剥壳，花生仁样品直接取样。分取花生仁样品约100g，用粉碎机(5.2)粉碎2min3 min。6.2 提取称取粉碎试样约5g(精确至0.01g)于250mL具塞三角瓶中，加入60mL 85%乙醇溶液(4.日，置于80.C水
6、浴中提取45min，不时振摇，冷却后用滤纸过滤，以少量85%乙醇溶液(4.5)洗涤残渣，过滤，合并滤液，定容至100mLo移取1mL2 mL滤液，离心5min，离心速度不低于5000 r/min，离心后的上清液供进样测定。6.3 测定6.3.1 高效液相色谱参考条件色谱柱:C18柱，150mmX 3.9 mm(内径)，4m，或相当者。流动相:乙睛+水十冰醋酸(4.的。流速:0.7mL/min。紫外检测器:波长306nm. 柱温:室温。进样量:10Lo白毒草芦醇标准品及样品测定的色谱图参见附录A。6.3.2 定量用微量进样器(5.的分别吸取等体积的白黎芦醇标准工作潜液和样品离心后的上清液进样分析
7、，测定响应值(峰高或峰面积)，以标准工作液的浓度与相应的峰面积绘制标准曲线，以样液白黎芦醇的峰面积查标准曲线，求得相应的白寨芦醇的浓度(c，)。7 结果计算2 花生仁样品中白事芦醇的含量按式(1)计算:X, = c. X A xV -A. Xm 式中zX1一一样品中白寨芦醇的质量分数，单位为毫克每千克(mg/kg); V一一试样最终定容体积，单位为毫升(mL);A-一一样液中白毒草芦醇的峰面积数值;c.一一标准溶液中白葱芦醇的浓度，单位为毫克每升(mg/L); A. -标准溶液中白事芦醇的峰面积数值;m 称取试样的质量，单位为克(g)。测定结果以花生仁中白寨芦醇含量计，保留至小数点后1位数字。
8、在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。. ( 1 ) GB/T 24903-2010 附录(资料性附录)白葱芦醇色谱图A 白毒草芦醇的色谱图见图A.l和图A.20dy-Y.dT mV 30 20 10 40 。自l1n8 6 白薯芦醇标准品的色谱图4 2 圄A.1。肉。由.dymV 20 5 。15 10 mm 6 4 2 。样品溶液中自葱芦醇的色谱图固A.2OFON|肉。叮NH阁。华人民共国家标准粮油检验花生中白薯芦醇的现定高效液相色谱法GB/T 24903-2010 国和中9唾中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 印张0.5字数7千字2010年8月第一次印刷开本880X12301/16 2010年8月第一版当酝定价14.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066 1-40231 G8/T 24903-2010 打印H期:2010年8月25日F002
