1、ICS 67.100.01 C 53 家_.佳GB/21703-2008 百L制时测占Determ隘的ionof benzoic and sor脑cacid i日milkand dairy pro往日cts(IDF 139: 1987 , Milk, dried milk, yogurt and other fermented milks一Determination of benzoic and sorbic acid contents , MOD) 2008-0今09发布2008-07-01实施国国家质量监督检验检菇总局发布家标准化管理委员人数码防伪GB/宜21703-2008自古自本标准修
2、改采用国际乳业联合会标准IDF139: 1987(牛乳、乳粉、酸乳及其他发酵乳中苯甲酸和山梨酸的测定)(英文版)。本标准根据IDF139: 1987重新起草，按照GB/T20001. 4-2001(标准编写规则第4部分:化学分析方法对原标准的结构进行了修改。本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位:农业部食品质量监督检验测试中心(上海)。本标准主要起草人:孟瑾、郑冠树、韩奕奕、陈美莲、张辉、吴榕、吴吴、韩惠雯。I GB/21703-2008 乳与乳制品中苯甲酸和山梨酸的测定1 范围2 规范性引用文件GB/T 6682
3、3 原理4 试剂和材也4. 1水:GB/4.2 甲醇(CH4.3 亚铁氧化量瓶中，定容到亥!1 000 mL容量瓶中，4.5 磷酸盐缓冲液:p于1000 mL容量瓶中，4.6 氢氧化纳溶液:0.1rr 容到刻度后混匀。4. 7 硫酸溶液:0.5mol/L，移取3冷却到室温后转移到1000 mL容量瓶，定谷4.8 甲醇水溶液:体积分数为50%。4.9 标准溶液的引用文件，其随后所有准达成协议的各方研究标准。o mL水(4.1)中，边搅拌边缓慢加入，4.9. 1 苯甲酸和山梨酸标准贮备溶液:每毫升含苯甲酸、山梨酸各500周。准确称取苯甲酸、山梨酸标准物质各50.0mg，分别置于100mL容量瓶中，
4、用甲醇(4.2)溶解，并稀释至刻度。摇匀后，冷藏于冰箱中，有效期60d。4.9.2 苯甲酸和山梨酸的混合标准工作液:每毫升含苯甲酸、山梨酸各10g。分别吸取苯甲酸和山梨酸的标准贮备溶液(4.9.1)各5mL，至250mL的容量瓶中，用甲醇水溶液(4.8)定容至刻度后混匀。冷藏于冰箱中，有效期5d。4. 10 滤膜:0.45mo1 G/T 21703-2008 5 仪器5. 1 高效液相色谱仪:配有紫外检测器。5.2 分析天平:感量0.0001 g。5.3 分析天平:感量0.01g。6 分析步骤6. 1 试样制备6. 1. 1 液态试样贮藏在冰箱中的乳与乳制品，应在试验前预先取出，并达室温，准确
5、称量20g样品于150mL锥形瓶中。6. 1. 2 国态试样准确称量3g样品于150mL锥形瓶中，加10mL水(4.1)，用玻璃棒搅拌至完全溶解。6.2 萃取和净化上述盛有试样(6.1)的锥形瓶中加入25mL氢氧化锅溶液(4.6) ，混合后置于超声波水浴或700C水浴中处理15mino冷却后，用适量甲醇(4.2)转移至100mL容量瓶中。用硫酸溶液(4.7)将pH调节3J 8，然后加入2mL亚铁氧化饵溶液(4.3)和2mL乙酸钵溶液(4.4)。剧烈振摇，静置15min，混合后冷却到室温，再用甲醇(4.2)定容，静置15min，上清液经过滤膜(4.10)过滤。收集滤液作为试样溶液，用于高效液相色
6、谱仪(5.1)测定。6.3 色谱参考条件6.3. 1 色谱柱:C18,250 mmX4. 6 mm，5m。6.3.2 流动相:甲醇(4.2)十磷酸盐缓冲溶液(4.5)(1十的。6.3.3 流速:1. 2 mL/mino 6.3.4 进样量:10L。6.3.5 柱温:室温。6.3.6 检测波长:227nmo 6.4 测定准确吸取各不少于2份的10L试样溶液(6.2)和苯甲酸和山梨酸的混合标准工作液(4.9.2)，以色谱峰面积定量。在上述色谱条件下，出峰顺序依次为苯甲酸、山梨酸，标准溶液的液相色谱图参见图A.1。7 结果计算试样中苯甲酸、山梨酸的含量，按式(1)进行计算:x = A X Cs XV
7、 一AoXm 式中:X一一试样中苯甲酸、山梨酸含量，单位为毫克每千克(mg/kg); A 试样溶液中苯甲酸、山梨酸的峰面积;Cs一一标准溶液的浓度，单位为微克每毫升(g/mL); V一试样定容的体积，单位为毫升(mL); As -标准溶液中苯甲酸、山梨酸的峰面积;m一一试样质量，单位为克(g)。测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留至小数点后2位。8 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。2 . ( 1 ) GB/T 21703-2008 附录A(资料性附录)苯甲酸、山梨酸典型色谱图高效液相色谱法测定苯甲酸、山梨酸的典型色谱图见图A.l。150 12
8、5 100 !二g 75 50 25 。-14 。篮瑞号豁卧旧情2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 盯lln图A.l苯甲酸、山梨酸典型色谱图OONigh户NH阁。华人民共和国家标准乳与乳制品中苯甲酸和山梨酸的测定GB/T 21703-2008 国中争导中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销争+印张0.5字数6千字2008年6月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2008年6月第一版告毛书号:155066 1-31751 如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533GB/丁21703-2008
