1、ICS 67050X 04 a亘中华人民共和国国家标准GBT 2338 12009食品中6一苄基腺嘌呤的测定-_】 Cj同 效液相色谱法Determination of 6-benzylaminopurine in foodsHighperformance liquid chromatography2009-04-08发布 200905-0 1实施丰瞀鹃紫瓣警襻瞥星发布中国国家标准化管理委员会仪1”削 置GBT 233812009本标准的附录A为资料性附录。本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出。本标准由全国食品工业标准化技术委员会食品通用检测技术分技术委员会归口。本标准主要起草单位：上海市
2、质量监督检验技术研究院、国家食品质量监督检验中心(上海)。本标准主要起草人：段文锋、林琳、熊薇、曹程明。1范围食品中6一苄基腺嘌呤的测定高效液相色谱法GBT 233812009本标准规定了用高效液相色谱法测定食品中6一苄基腺嘌呤(6一BA)含量的方法。本标准适用于果蔬类(豆芽、黄瓜、番茄、香菇、草莓、橙类)等植物性食品及其制品中6一苄基腺嘌呤的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其
3、最新版本适用于本标准。GBT 6682分析实验室用水规格和试验方法(GBT 6682-2008，ISO 3696：1987，MOD)3方法提要试样经甲醇提取、浓缩并净化后，用高效液相色谱检测，外标法定量。4试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GBT 6682规定的一级水。41甲醇：色谱纯。42冰乙酸。43 6-苄基腺嘌呤标准品：纯度99oH。44 C-s固相萃取柱：6 mL，500 mg，或相当者，使用前依次用5 mL甲醇、10 mL水活化。45乙酸铵溶液(o02molL)：称取154 g乙酸铵，用适量水溶解，加入10mL冰乙酸，加水定容至1 000 mL。46 6-苄基腺嘌呤标准
4、储备液：准确称取6一苄基腺嘌呤标准品0010 0 g于100mL的容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度。此溶液10 mL相当于010 mg 6-苄基腺嘌呤。47 6-苄基腺嘌呤标准工作液：取6一苄基腺嘌呤标准储备液10 mL，用甲醇稀释并定容至100 mL，此溶液10 mL相当于0001 0 mg 6-苄基腺嘌呤。48微孔滤膜：045zm，有机相。5仪器和设备51组织捣碎机。52离心机：转速不低于4 000 rmin。53超声波清洗仪。54旋转蒸发仪。55高效液相色谱(HPLC)仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。56固相萃取装置。57电子天平：感量01 mg。】GBT 2338120096样品
5、处理61样品提取称取经组织捣碎机捣碎的样品约10 g(精确到001 g)于50 mL离心管中，加入20 mL甲醇，超声提取15 min，以转速不低于4 000 rrain离心10 rain，上清液转入50 mL梨形瓶中，样品再次用20 mL甲醇超声提取15 min，离心合并上清液，用旋转蒸发仪(不超过60)浓缩至近干，去除甲醇，残液待净化。62样品净化将61残液以2 mLmin流速通过预先活化的固相萃取柱(44)，用少量水(约2 mL)洗涤梨形瓶，洗液过固相萃取柱，再用5 mL水洗涤固相萃取柱，去除杂质后用甲醇洗脱并定容至50 mL，混匀后经045 pm滤膜过滤，作为待测液供HPLC分析。7高
6、效液相色谱测定71 HPLC参考条件a)色谱柱：C18，250 mmX46 mm，5 pm或相当型号色谱柱；b)柱温：30；c)检测波长：267 nmd)流动相：甲醇：002 moL乙酸铵溶液(45)一】：】；e)流速：10 mLmin；f) 进样体积：100 pL。72测定分别取6苄基腺嘌呤标准工作液和待测液100 pL注入高效液相色谱仪进行测定，6一苄基腺嘌呤标准图谱参见图A1。73结果计算样品中6苄基腺嘌呤的含量(x)以毫克每千克(mgkg)表示，按式(1)计算： x一锱1000(1)式中：x样品中6一苄基腺嘌呤的含量，单位为毫克每千克(mgkg)；A：样品峰面积；c6一苄基腺嘌呤标准溶液浓度的数值，单位为毫克每毫升(mgmL)；y试样体积，单位为毫升(mL)；At标样峰面积；m样品质量，单位为克(g)。计算结果保留两位有效数字。8方法定量检出限本方法的定量检出限为：002 mgkg。9允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。2附录A(资料性附录)6一苄基腺嘌呤标样图谱GBT 233812009图A1 6一苄基腺嘌呤标样图谱(标样浓度I0 FgmL)J525l5OA2lO
