1、中华人民共和国国家标准车间空气中磷肢卫生标准Hygienic standard for phosphamidon in the air of workplace 本标准适用于生产和使用磷胶的各类企业。l 卫生要求丰间空气中磷胶最高允许浓度为O.02 mg/ m （皮）。2 监测检验方法本标准的监测检验方法采用酶化学法，见附录A。中华人民共和国卫生部198802 23批准280 UDC 661.92.013 .8628.512 GB 8 7 7 8 8 8 1988-12-01实施A. 1 原理GB 8 7 7 8 8 8 附录A酶化学法（补充件）磷胶对胆碱醋酶有抑制作用，而胆碱醋酶能促进乙酿胆
2、碱的水解，乙酷胆碱的量可用氯化铁比色法定量测定，由此换算成磷胶的含量。本法的检出F限为0.I吨mlA. 2 仪器. 多孔玻璃板吸收管。b. 恒温水浴箱，37土o.5 c 0 c.衫、表。d. 分光光度计。e. 个体采样器。A. 3试Jl!JA. 3. 1 吸收液蒸馆水。A. 3. 2 缓冲液（pH=7.2）：将16.72 g磷酸氢二锵（Na,HPO, l 2H,O ）及2.72 g磷酸二氢饵(KH,PO，）溶于IL水中。A. 3. 3 氯化乙酷胆碱溶液s称o.1000 g氯化乙酸胆碱，溶于100ml缓冲液（pH=7.2），保存于冰箱内。A. 3. 4 碱性委主胶溶液I脑用前将F列溶液（I）及（
3、2）等体积混合。溶液（1),13.9%盐酸泾胶溶液，保存于冰箱内。溶液（2),14%氢氧化纳溶液A. 3. 5 三氯乙酸溶液：IOg三氯乙酸溶于I00 ml I 2盐酸中。A.3.6 10%氯化铁溶液2将10g氯化铁（FeCI, 6H,O ）加f!JO. 84 ml盐酸及少量水中，微热使溶解，然后加水至I00 ml 0 A. 3. 7 标准溶液准确称取磷胶的纯品，溶于甲醇中，配成lml含100mg磷胶的贮备液，保存于冰箱中，l脑用时取适量贮备液用吸收液稀释配成Iml含2吨磷胶。A. 3. 8 胆碱酣酶溶液以健康马血清为酶原，用缓冲液稀释成酶活力为70%80%（见酶活力测定）保存于冰箱中。酶活力
4、测定：取3ml健康马血清置于25ml容量瓶中，用缓冲液稀释至刻度，以此马血清溶液按表Al配制酶活力标准管。各管分别加Iml水，置于37恒温水浴箱预热10min，然后向每管各加入I.0 ml氯化乙酌胆碱溶液（每隔30s加一管，准确地在37下反应30min,30min末，加入2ml碱性泾胶溶液（每隔30s加一管），按顺序从水浴中取出强烈振摇4min，然后向各管加入Iml三氯乙酸溶液，摇匀后，加入lml氯化铁溶液，振摇过滤，滤液在波长为520nm下测其吸光度，以水作参比液。用公式与l阳%）（式中B为零管的吸光度，X为各管的吸光酌，得到氯化乙酷胆碱在37被酶水解30min的水解百分数，取水解百分数为7
5、080%的马血清作标准，根据马血清含量（25ml中含纯马血清毫丹数配制胆碱酶酶溶液。281 GB 8 7 7 8 8 8 表Al酶活力标准管的配制管辛J主。（B)I 2 3 4 5 吨血清溶液，ml。o. 2 0 4 0 6 o. 8 . 0 缓冲液，ml I 0 o. 8 0 6 0 4 o. 2 。相甘I每25ml f号纯血I青。0 6 . 2 . 8 2. 4 3. 0 毫升数，mlA. 4 采样取盛有5ml吸收液的多孔玻璃板吸收管做采样管，以0.5 L/min的速度抽取10L空气。A. 5 分析步骤用吸收管中吸收液洗涤进气管内壁3次，然后倒入10ml具塞比色管中，取！.0 ml样品溶液
6、置于25 ml具塞比色管中，同时按表A2配制标准管。表A2磷胶标准管的配制管号。（C)2 3 4 5 6 7 B 标准溶液，ml。o. 05 0. I o. 2 o. 4 o. 6 0 8 . 0 。吸收液，ml . 0 o. 95 o. 9 0 8 0.6 0 4 0.2 。I 0 磷胶含量，地。O. I 。.2 0 4 0.8 . 2 . 6 2. 0 。B管加1ml缓冲液，样品管和标准管（包括B管）放在37恒温水浴箱中预热10min，然后各管（除B管外）加入1.0 ml阻碱醋酶溶液，每隔30s加一管，在恒温水浴箱中准确反应30min再向各管加入!. 0 ml氯化乙酷胆碱溶液（每隔.30s
7、加一管），反应30min后（不时摇动），每管加入2ml碱性瓷胶溶液（每隔30s加一管），按顺序从水浴中取出后强烈振摇4min，然后向各管中加入Iml三氯乙酸溶液，摇匀加入lml氯化铁溶液，振摇过滤，滤液在波长520nm下测其吸光度，并以水作空白参比液，将所得吸光度按下式计算出胆碱醋酶被磷胶抑制的百分数（或称百分抑制率f B-X 胆碱酶酶百分抑制率（%）ll-B=万）JOOx-c 一一一JOOB C (A I) 式中：B、C一对照管B和C管的吸光度$x 样品管的吸光度。用磷胶含量对相应的胆碱酶酶百分抑制率绘制标准曲线，计算出样品的百分抑制率，再由标准曲线查出磷胶含量式中X空气中磷胶的浓度，mg/
8、m1 C一一所取样品溶液中磷胶的含量，吨V。一一换算成标准状况下的采样体积，L。A. 6 注意事项X=5C v. . (A2) A. 6. 1 每一批马血清，须测定其活力，如血清在冰箱中保存时间超过个月，必须重新测酶活力。A.6.2 磷胶标准液只能当日稀释，当日使用，放置24h后就会有部分水解，使浓度降低s现场采得样282 GB 8 7 7 8 8 8 品，应避光保存，并须在24h内进行分析。附加说明z本标准由全国卫生标准技术委员会劳动卫生标准分委会提出。本标准由上海市卫生防疫站负责起草。本标准主要起草人陈因久、杨士兴、庄建国、王主家豪。本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。18:1
