1、7,江苏省市场监督管理局发 布中 国 标 准 出 版 社出 版草莓拟盘根腐病抗性鉴定评价技术规程Technical code of practice for resistance identification of Neopestalotiopsiscrown rot in strawberry2025-12-30 发布2026-01-30 实施CCS B 05DB32/T 53032025ICS 65.020.20DB32/T 53032025前言 1 范围 12 规范性引用文件 13 术语和定义 14 室内鉴定 15 田间鉴定 26 抗性结果 47 档案记录 4附录 A（资料性）草莓拟盘
2、根腐病病情调查记录表 5附录 B（资料性）草莓拟盘根腐病的田间症状及发病规律 6目 次DB32/T 53032025前言本文件按照 GB/T 1.12020标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由江苏省农业农村厅提出并组织实施。本文件由江苏省园艺标准化技术委员会归口。本文件起草单位：江苏省农业科学院。本文件主要起草人：吴娥娇、庞夫花、陈晓东、乔玉山、耿中元、关玲、袁华招、王庆莲、蔡伟建、许林林、梁佳惠、赵密珍、王静、夏瑾。DB32/T 53032025草莓拟盘根腐病抗性鉴定评价技术规程
3、1范围本文件规定了草莓拟盘根腐病抗性鉴定中的室内鉴定、田间鉴定、抗性结果、档案记录的技术要求。本文件适用于草莓种质资源拟盘根腐病抗性的鉴定与评价。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性的引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T 2931 草莓种质资源描述规范NY/T 4519 热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程 咖啡炭疽病3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1草莓拟盘根腐病strawberry Neopestalotiopsis crown rot由新拟盘
4、多毛孢属（Neopestalotiopsis spp.）病原真菌侵染所致，主要危害草莓根颈部、叶片及萼片等部位，受害植株矮化瘦弱、新叶失绿不对称、叶片现褐色或红褐色病斑等症状的病害。4室内鉴定4.1病原菌分离与纯化田间采集典型发病植株，记录采集地点、品种、时间及病害症状。采用常规组织分离法从发病植株的根颈部、叶片等病健交界处分离病原菌，对分离物进行单孢分离纯化和致病性测定，经形态学和分子鉴定，确认为草莓拟盘根腐病菌。4.2病原菌回接将纯化培养 7 d10 d 且经镜检后的病原菌制成浓度为 1106 个/mL 孢子悬浮液，回接到草莓离体叶片上，开展致病性测定与科赫氏法则验证，叶片和接种体的制备分
5、别按照 NY/T 2931 和 NY/T 4519 的规定进行。4.3病原菌保存纯化后的病原菌采用滤纸片干燥法于-40 低温冰箱中长期保存。4.4病原菌活化将保存的病原菌接种至 PDA 培养基中，26 恒温避光培养 7 d，待菌落长至培养皿面积的 80%时，1DB32/T 53032025用无菌打孔器在菌落边缘制取直径 5 mm 的菌饼，将菌饼（菌丝面朝下）接种于 PDA 培养基中央，培养，备用。4.5离体叶片接种取大小、叶龄（约 2 周）一致的新鲜健康草莓叶片，置于含 1%琼脂培养基的培养皿，每皿放 2 片（叶背朝上），用昆虫针在叶背刺一直径约 0.5 mm 的孔。从活化 7 d 的菌落边缘
6、取直径 5 mm 菌饼，倒置接种于伤孔处，每处理 3 皿（共 6 片叶），以无菌 PDA 菌饼为对照。于温度 26、相对湿度 95%、光 16 h/暗 8 h 条件下培养 48 h 后将叶片翻为正面，用刻度尺采用十字交叉法测量病斑与叶片面积。4.6抗性水平分析基于病斑面积占叶片面积的百分比，将离体叶片拟盘根腐病抗性水平划分为 6 个等级，如图 1 和表1 所示。表 1 离体叶片拟盘根腐病抗性评价抗性等级免疫（I）高抗（HR）抗病（R）中抗（MR）感病（S）高感（HS）病斑面积占叶片面积%叶片无病斑0病斑面积占叶片面积10%10%病斑面积占叶片面积25%25%病斑面积占叶片面积50%50%75%
7、图 1 草莓拟盘根腐病离体叶片抗性评价5田间鉴定5.1病情调查5.1.1调查时间从草莓定植 2 周后开始至结果后期结束，每 2 周调查一次。5.1.2调查地选择选择当地曾有该病发生的典型田块 1 个3 个，定为系统调查点。自首次发现该病发生后，至结果后期结束，可进行 2 次3 次调查，每个调查田块所在区域至少调查 20 个小区（面积10 m，草莓植株30 株以上）。2DB32/T 530320255.1.3调查方法每田块依据田块形状选择“梅花形”或“S 形”法进行五点取样，每垄单行种植时，每点顺垄逐株调查20 株，每垄双行种植时，每点每行调查 10 株，共 20 株，统计其抗性等级，计算病株率
8、结果记录至草莓拟盘根腐病病情调查记录表（见附录 A 中的 A.1）。5.2严重度分级严重度分级基于叶片或根颈部病变症状分为 6 级，具体分级标准见表 2。草莓拟盘根腐病症状识别及发病规律见附录 B。表 2 草莓拟盘根腐病严重度病级013579 注：X 表示发病叶片数占叶片总数的百分比；S 表示变色面积占剖面的百分比。植株叶片症状健康植株，无症状，X=0草莓植株叶片现典型症状，新叶失去光泽、失绿、老叶主脉一侧呈水渍状褐色斑点，X10%草莓植株叶片现典型症状，新叶失绿、变黄，老叶呈红褐色网纹斑，10X25%草莓植株叶片现典型症状外，植株略有矮化，主脉一侧现椭圆形或不规则病斑，25X50%草莓植株
9、叶片现典型症状，植株明显矮小，不伸展，老叶呈红褐色或紫红色萎蔫，5075%根颈部症状根颈部无病变，S=0根颈部横切面有轻度零星变色点状斑，S10%根颈部横切面有零星变色点状斑，10S25%根颈部横切面现变色，颜色较浅，现红棕色片状斑，25S50%根颈部横切面变色，颜色中度，现红褐色至深褐色病斑，5075%5.3发病程度分级草莓拟盘根腐病按其发病程度分为 6 级，分别为免疫（0 级）、高抗（1 级）、抗病（3 级）、中抗（5 级）、感病（7 级）、高感（9 级），以当地病害流行盛期调查的平均病情指数为分级指标，具体见表 3。表 3 草莓拟盘根腐病发病程度分级抗性等级免疫（I）高抗（HR）抗病（R
10、中抗（MR）感病（S）高感（HS）病情指数（DI）DI=00DI55DI1010DI3030DI5050DI100其中，病情指数（DI）按公式（1）计算：DI=（SiXi）/（SmaxN）100（1）3DB32/T 53032025式中：DI 病情指数；Si病级数；Xi 对应病级（Si）的病株数或病叶数；Smax病级数最大值；N调查总株数或总叶数。6抗性结果根据 5.2 和 5.3 确定抗性水平，可判定草莓拟盘根腐病抗性等级。当室内鉴定与田间鉴定结果不一致时，优先采用田间鉴定结果作为最终依据。7档案记录记录技术实施过程中参与人员、时间、地点、品种资源、样本来源、病原菌分离、抗病性鉴定结果及病
11、害发生情况等，相关记录保留 2 年以上。4DB32/T 53032025附录A（资料性）草莓拟盘根腐病病情调查记录表草莓拟盘根腐病病情调查记录表见表 A.1。表 A.1 草莓拟盘根腐病病情调查记录表调查人员调查时间调查地点寄主品种连作年限生育期总株数病株数抗性等级IHRRMRSHS备注5DB32/T 53032025附录B（资料性）草莓拟盘根腐病的田间症状及发病规律B.1田间症状草莓拟盘根腐病主要危害根颈部、叶片和萼片等，在草莓的整个生长期均可发生，以春秋季发病较重。典型症状是在发病初期病株表现为新叶失绿，底层叶外边缘焦枯，主叶脉一侧呈较深红色或红褐色点状斑（图 B.1），随后扩展为椭圆形或不
12、规则形病斑，边缘呈红褐色，中央呈灰白色，病斑周围褪绿，具有黄色晕圈，病叶多变厚、变硬。后期整叶呈红绿相间的条纹或斑驳，植株多矮小，不伸展，萼片边缘呈焦枯状，严重时叶片干枯死亡，剖开根颈部位可见红褐色及棕褐色变色（图 B.2），最终导致整个植株枯萎死亡。图 B.1 草莓拟盘根腐病在叶片上的症状图 B.2 草莓拟盘根腐病根颈部危害状B.2病原菌目 前 已 知 引 起 草 莓 拟 盘 根 腐 病 的 病 原 菌 是 黑 盘 孢 科（Amphisphaeriaceae）中 的 新 拟 盘 多 毛 孢 属6DB32/T 53032025（Neopestalotiopsis spp.）病原真菌（图 B.3）。图 B.3 草莓拟盘根腐病菌菌落及孢子形态特征B.3病害流行草莓拟盘根腐病的发生流行与种植品种、田间菌源量、温湿度以及栽培管理措施等有关。田间感染源主要包括种苗、土壤、植株残体以及中间寄主等，病原菌主要以菌丝体或孢子形态，在连作土壤、带病种苗、植株病残体等载体上越冬，作为下一季草莓定植后的侵染源。秋季草莓定植后，田间菌源在适宜条件下产生菌丝体和分生孢子盘，孢子盘上产生大量分生孢子，病菌多从植株伤口侵入，借雨水、农事操作或农机具等传播途径扩散蔓延。温度适宜（25 30）时，病害潜育期 7 d14 d。其致病性相对较弱，通常需借助植株伤口或逆境环境才能成功侵染并引发明显病症。7
