1、ICS 65.020.30 B 41 DB4201武汉市地方标准 DB4201/T 5932019 猪口腔液样品采集技术规范 武汉市市场监督管理局 发 布 2019-12-15 发布2020-01-15 实施DB4201/T 5932019 I 前 言 本规范按照GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第1部分:标准的结构和编写给出的规则起草。本规范附录A和附录B为资料性附录。本规范由武汉市动物疫病预防控制中心提出。本规范由武汉市农业农村局归口。本规范起草单位：武汉市动物疫病预防控制中心、黄陂区动物疫病预防控制中心。本规范主要起草人：张四化、尹伟力、王雪、阮征、赵静、刘开武、万云、岳龙、倪杨
2、帆、吴薇、白莲英、宫时玉。本规范首次发布。DB4201/T 5932019 1 猪口腔液样品采集技术规范 1 范围 本规范规定了猪口腔液样品采集的采样前准备、样品采集技术、采样登记、样品的标记与包装、样品的保存与运输。本规范适用于武汉市动物防疫机构技术人员及养殖企业技术人员开展猪口腔液采集工作。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T 3075 畜禽养殖场消毒技术 DB4201/T 540 重要动物疫病监测样品采集技术规范 3 术语和定义 下列术语和
3、定义适用于本文件。3.1 猪口腔液 猪口腔中的唾液以及通过口腔黏膜和齿龈沟进入口腔的血清渗出液组成的混合液体。适用于猪口蹄疫、猪蓝耳病、猪圆环病毒病等疫病的抗体或病原检测。3.2 采样 按照规定的程序和要求从动物及其产品或环境取得样品的过程。4 采样前准备 4.1 采集用品 4.1.1 一般要求 采集绳、自封袋、剪刀、离心管（1.5 mL以上规格）等。4.1.2 采集绳选择 选择100%纯棉、直径1.5 cm 2 cm的绳子，长度根据猪栏高度剪取，建议长度 1.0 m 1.2 m。4.1.3 灭菌 DB4201/T 5932019 2 棉绳、剪刀、离心管使用前应作灭菌处理，棉绳装入无纺布布袋或
4、棉布袋，剪刀、离心管装入铝盒，121 高压蒸汽灭菌30 min，65 烘箱中烘干，将棉绳转入无菌自封袋保存。4.1.4 采集绳数量 4.1.4.1 猪饲养数量在 25 头以内的栏舍，悬挂一根棉绳；4.1.4.2 猪饲养数量大于 25 头的栏舍可适当增加棉绳数量，绳子间的距离不低于 40 cm。4.2 防护用品 一次性口罩、手套、防护服、鞋套，消毒液、医疗废弃物垃圾袋等。4.3 记录用品 记号笔、黑色中性笔、标签纸、采样登记表、样品编号表等。4.4 保存运输用品 采样运输箱、冰袋、防震材料等。5 样品采集技术 5.1 采样注意事项 5.1.1 个人安全防护和消毒隔离规程按照 NY/T 3075
5、的要求执行。5.1.2 每采集一份样品，更换一套一次性采样用品，避免交叉污染。5.1.3 采样后的废弃物等按照相关的法律法规进行无害化处理。5.2 采集时间 宜在猪较为活跃的上午采集，在采食前或采食半小时后采集。5.3 采集绳预处理 若猪啃咬棉绳的意愿不强烈，可在棉绳上喷洒无菌糖溶液。5.4 采集步骤 5.4.1 棉绳悬挂 将棉绳悬挂于猪栏内相对干净的区域，远离饲喂、饮水和排便区，不接触墙壁和猪栏。5.4.2 棉绳固定棉绳上端打结固定，下端悬挂高度与猪身肩关节齐平。5.4.3 棉绳放置时间棉绳放置45 min，任猪自由咀嚼。5.4.4 口腔液收集DB4201/T 5932019 3 戴上一次性
6、无菌手套，将棉绳下端的湿润部分放入一次性无菌自封袋中，用力挤压袋内棉绳，释放口腔液至袋底。剪掉自封袋底部一角，将口腔液转移至离心管中备用，液体量1 mL为有效采集量。5.4.5 废弃物处理 取下棉绳与其他废弃物，装入医疗废弃物垃圾袋，按相关的法律法规进行无害化处理。6 采样登记 6.1 填写猪口腔液采样登记表（见附录 A）和样品编号表（见附录 B），一式二份。6.2 表格应用黑色中性笔逐项填写，信息准确，字迹工整、清晰。6.3 将两张表格装在透明自封袋中，一份随样品送实验室，另一份留存备案。7 样品的标记与包装 7.1 根据口腔液液体量及检测目的选择不同规格的离心管，液体容量不可超过离心管容量
7、的 2/3。装入口腔液后盖上管盖，用封口膜固封。7.2 用记号笔在离心管管盖和管壁上作好标记，以阿拉伯数字标识，并在样品编号表填写样品编号对应的栏舍编号。7.3 不同栏舍的口腔液样品不要混样，同一场点采集的样品置于同一自封袋中，在袋外粘贴标签，标签应注明采样场点、采样日期、样品名称和数量等。7.4 自封袋上贴封条，封条上应有采样人签章，并注明贴封日期。8 样品的保存与运输 8.1 口腔液采集后，24 h 内可送抵实验室的，置于采样运输箱内运输，放冰袋维持箱内温度处于 2 8，加填防震材料避免样品晃动；24 h 内不能送检的，-20 以下温度冻存，详细参照 DB4201/T 540 中 10.1
8、 和 10.2 规定执行。8.2 采样运输箱应完整无损，密封不漏液，必要时经清洁、灭菌后使用，详细参照 DB4201/T 540 中 9.1 规定执行。8.3 样品运送应符合生物安全要求，详细参照 DB4201/T 540 中 10.5 规定执行。DB4201/T 5932019 4 AA附 录 A（规范性附录）猪口腔液采样登记表 表A.1给出了猪口腔液采样登记表表样。表A.1 猪口腔液采样登记表 采样单位：采样时间：采样人：联系电话：填表人签字：*场点名称 *联系人 *联系电话 *地 址 区 街（乡）村*地理坐标 经度：纬度：*场点类型 种猪场 商品代养猪场 散养户 生猪屠宰场 采样数量 基
9、本 情况*现存栏数 年出栏数 种公畜数 母畜数 生产：后备：样品 情况 序号 样品编号（起止）养殖阶段 群体数量 备注 免疫情况 疫苗 是否免疫 疫苗类型 最后一次免疫时间*O 型口蹄疫 是 否 灭活苗 合成肽苗 *型口蹄疫 是 否 灭活苗 合成肽苗 *猪瘟 是 否 脾淋苗 细胞苗 *伪狂犬 是 否 弱毒苗 灭活苗 *蓝耳病 是 否 普通型灭活苗 普通型弱毒苗 高致病性灭活苗 高致病性弱毒苗 其他 是 否 样品 情况 序号 样品编号（起止）养殖阶段 群体数量 免疫情况 疫苗 是否免疫 疫苗类型 最后一次免疫时间*O 型口蹄疫 是 否 灭活苗 合成肽苗 *型口蹄疫 是 否 灭活苗 合成肽苗 *猪
10、瘟 是 否 脾淋苗 细胞苗 *伪狂犬 是 否 弱毒苗 灭活苗 *蓝耳病 是 否 普通型灭活苗 普通型弱毒苗 高致病性灭活苗 高致病性弱毒苗 其他 是 否 样品 情况 序号 样品编号（起止）养殖阶段 群体数量 免疫情况 疫苗 是否免疫 疫苗类型 最后一次免疫时间*O 型口蹄疫 是 否 灭活苗 合成肽苗 *型口蹄疫 是 否 灭活苗 合成肽苗 *猪瘟 是 否 脾淋苗 细胞苗 *伪狂犬 是 否 弱毒苗 灭活苗 *蓝耳病 是 否 普通型灭活苗 普通型弱毒苗 高致病性灭活苗 高致病性弱毒苗 其他 是 否 注1：地理坐标，要求填写 6 位数（必须填写）。注2：样品编号：以例如 110 的简单阿拉伯数字标识在采样管上。注3：养殖阶段：哺乳仔猪、保育猪、育肥猪、生产母猪、后备母猪、种公猪。注4：该表格一式两份。DB4201/T 5932019 5 B B 附 录 B（资料性附录）样品编号表 表B.1给出了样品编号表表样。表B.1 样品编号表 场点名称：采样人：联系电话：采样时间：样品编号 栏舍编号 样品编号 栏舍编号 样品编号 栏舍编号 注：该表格一式两份。填表人签字：_
