1、ICS 65.020.30 B 41 武汉市地方标准 奶牛场牛结核病净化技术规范 2018-08-28 发布2018-09-28 实施武汉市质量技术监督局 发 布 DB4201 DB4201/T 5412018 DB4201/T 541-2018 I 前 言 本规范按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本规范由武汉市动物疫病预防控制中心提出。本规范由武汉市农业委员会归口。本规范起草单位：武汉市动物疫病预防控制中心、蔡甸区动物疫病预防控制中心 本规范主要起草人：阮征、岳龙、张四化、吴君、肖冉、万云、王雪、黎巧、李东、王巧娜、曾令高、宫时玉。本规范首次发布。DB4201/T 541-201
2、8 1 奶牛场牛结核病净化技术规范 1 范围 本规范规定了奶牛场牛结核病的净化阶段、检测程序、诊断技术、阳性牛处置及饲养管理等方面的要求。本技术规范适用于武汉市范围内奶牛场牛结核病净化。2 规范性引用文件 下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GB/T 16568 奶牛场卫生及检疫规范 GB/T 18645 动物结核病诊断技术 GB/T 32945 牛结核病诊断体外检测干扰素法 NY/T 1168 畜禽粪便无害化处理技术规范 中华人民共和国主席令第53号 中华人民共和国进出境
3、动植物检疫法 农医发20077号 牛结核病防治技术规范 农医发201020号 反刍动物产地检疫规程 农医发201033号 跨省调运乳用、种用动物产地检疫规程 农医发201334号 病死动物无害化处理技术规范 农医发201720号 国家奶牛结核病防治指导意见（2017-2020年）国家质检总局令第25号 进境动植物检疫审批管理办法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 牛结核病 牛结核病是由牛分枝杆菌引起的一种慢性消耗性人兽共患传染病，主要经呼吸道、消化道感染，可侵害人和多种动物，其中奶牛最易感。本病潜伏期一般为 1045 天，主要为肺结核，也可发生乳房结核和肠结核等。病牛剖检可见
4、肺脏白色或黄白色结节，胸膜和腹膜可发生密集的结核结节，形如珍珠状。3.2 疫病净化 是以消灭和清除传染源为目的，在特定区域或场所对某种或某些重点疫病实施的有计划的消灭过程，以达到该范围内个体不发病和无感染状态。DB4201/T 541-2018 2 3.3 牛结核病净化场 牛场牛结核病个体阳性率连续两次以上低于0.1%，经市级以上兽医主管部门组织的专家组进行现场评审，且评审通过，认定为牛结核病净化场。3.4 牛结核菌素 为牛分枝杆菌的分泌蛋白，临床上主要使用的是结核分枝杆菌纯蛋白衍生物（purified protein derivative,PPD）。感染过牛分枝杆菌的机体，在接触到牛结核菌素
5、后，由于体内致敏淋巴细胞的作用，会发生局部变态反应，表现为在结核菌素注射部位形成硬结甚至发生水泡、坏死。3.5 干扰素 由淋巴细胞等免疫细胞分泌的一种重要细胞因子。感染了牛分枝杆菌后，动物体内致敏淋巴细胞再次接触相同抗原如牛结核菌素时，会产生大量干扰素。因此，检测干扰素浓度升高程度可用于牛结核病诊断。4 净化阶段 参照国家奶牛结核病防治指导意见（2017-2020年）的要求，将奶牛场开展牛结核病净化工作分为以下四个阶段：未控制阶段：开展牛结核病净化工作，个体阳性率大于 3的阶段；控制阶段：连续 2 年监测个体阳性率为 13的阶段；稳定控制阶段：连续 2 年监测个体阳性率为 0.11的阶段；净化
6、阶段：连续 2 年以上监测个体阳性率小于 0.1的阶段。5 检测程序 5.1 对处于未控制阶段的奶牛场，每年至少进行 4 次检测。6 周龄以上奶牛按 100比例进行检测。发现阳性牛按照 7 的要求处置。当连续两年检测个体阳性率小于 3后，进入控制阶段。5.2 对处于控制阶段的奶牛场，6 周龄以上的奶牛每年全群检测 3 次，发现阳性牛按照 7 的要求处置。当连续两年监测个体阳性率小于 1后，进入稳定控制阶段。5.3 对处于稳定控制阶段的奶牛场，6 周龄以上的奶牛每年全群检测 2 次，发现阳性牛按照 7 的要求处置。当连续两年检测个体阳性率小于 0.1，经市级以上兽医主管部门组织专家评审，现场综合
7、评审通过后，此场认定为牛结核病净化场，进入净化阶段。5.4 对处于净化阶段的奶牛场，6 周龄以上的奶牛每年全群检测 1 次，发现阳性牛按照 7 的要求处置，同时，净化级别降至上一等级。5.5 在净化全阶段中，初生犊牛应于 20 日龄时进行一次检测。6 诊断技术 DB4201/T 541-2018 3 6.1 临床诊断 按照牛结核病防治技术规范规定的流行病学、临床症状和病理变化进行临床诊断。6.2 牛分枝杆菌 PPD 皮内变态反应试验 6.2.1 单纯皮内变态反应 参照GB/T 18645中4.1要求执行。6.2.2 比较变态反应 参照GB/T 18645中4.2要求执行。6.3 抗体 ELIS
8、A 检测 采集牛血清，选择商品用牛结核ELISA试剂盒，按照试剂盒说明操作。6.4 干扰素释放试验 参照GB/T 32945采集牛静脉抗凝血进行干扰素ELISA检测。6.5 检测方案 根据奶牛场实际情况从以下四种检测方案中进行选择：a)选用 6.2.1 的方法进行初筛，6.4 的方法确诊；b)选用 6.2.1 的方法进行初筛，6.2.2 的方法确诊；c)选用 6.3 的方法进行初筛，6.4 的方法确诊；d)选用 6.3 的方法进行初筛，6.2.2 的方法确诊。6.6 结果判定 6.6.1 本病依据病理变化可做出初步诊断。6.6.2 ELISA 检测阳性或 PPD 单纯皮内变态反应阳性牛，判为牛
9、结核病疑似牛。6.6.3 PPD 比较变态反应试验或 干扰素释放试验阳性牛，判为牛结核病牛。7 阳性牛处置 7.1 隔离 对牛结核病疑似牛或牛结核病牛进行隔离。隔离场地周围应有自然屏障或人工栅栏。7.2 复检 对牛结核病疑似牛使用6.2.2或6.4的方法进行复检，复检为阴性，方可合群。7.3 处置 对确诊的牛结核病阳性牛全部扑杀，并按照病死动物无害化处理技术规范进行无害化处理。对阳性牛污染的场地、用具等按照8.8的要求进行紧急消毒。DB4201/T 541-2018 4 8 饲养管理 8.1 引种和调运 8.1.1 引进的奶牛应来自非疫区，引进前报本地动物防疫监督机构备案。跨省引进奶牛及其胚胎
10、和精液，应按跨省调运乳用、种用动物产地检疫规程向输入地动物防疫监督机构申请办理审批手续。8.1.2 调运前 45 天进行牛结核病检疫，凭当地动物防疫监督机构出具的检疫合格证明进行调运。8.1.3 奶牛到达输入地后,第 5 天7 天进行一次牛结核病检疫，隔离观察 45 天后，再进行一次牛结核病检疫，经本地动物防疫监督机构检查，确定为牛结核病阴性牛后方可合群饲养。8.1.4 跨境引进奶牛及其胚胎和精液，参照中华人民共和国进出境动植物检疫法要求执行，并按照进境动植物检疫审批管理办法办理审批手续，入境后第 5 天7 天进行一次牛结核病检疫，隔离观察 45 天后，再进行一次牛结核病检疫，经检疫合格方可入
11、关。8.1.5 奶牛移出本市，必须提前向本地动物防疫监督机构报检，按照反刍动物产地检疫规程实施产地检疫，检疫合格后出具动物检疫合格证明，凭证出场。8.2 奶牛场严格按照 GB/T 16568 的要求进行防疫管理。8.3 病牛所产牛犊经检疫无结核病后，与母牛隔离饲养，饲喂健康牛乳或消毒乳。8.4 建立详细的奶牛结核病监测记录，包括耳标号、年龄、监测时间、检测方法、检测结果等内容，监测记录应保存 5 年以上。8.5 奶牛场员工与奶牛接触时应穿工作服，佩戴口罩、手套等防护用具。8.6 奶牛场员工每年进行一次健康检查，发现患有结核病的应及时调离岗位进行治疗。新招人员须经健康检查，确认无结核病后方可上岗
12、。8.7 常规消毒 8.7.1 保持牛舍、饲槽及器具的清洁卫生，交替使用 2 种3 种消毒剂定期消毒，适时通风换气。产房每周进行一次大消毒，分娩室在临产牛生产前及分娩后各进行一次消毒。挤奶人员、挤奶器等工具每次必须做好清洗消毒工作。8.7.2 转群后的栏舍应先彻底清洁干净，再使用高含量溴氯消毒剂等进行有效消毒，待消毒完全空栏1 周后，引入新的奶牛。8.7.3 奶牛场门口，栏舍门口设置消毒池、消毒间或消毒通道，人员、车辆彻底消毒后方可进出奶牛场。消毒池应每隔 15 天更换一次消毒液。8.7.4 奶牛场道路及栏舍周边环境每月使用相应消毒剂进行 2 次以上消毒。8.8 紧急消毒 8.8.1 奶牛群中检出并剔出结核病牛后，对被污染的金属设施、设备采取火焰、熏蒸等方式消毒；牛场的圈舍、场地、车辆等，采用相应消毒药彻底消毒。8.8.2 对被污染的饲料、垫料，阳性牛的粪便等的无害化处理，参照 NY/T 1168 执行。_
