1、ICS 65.150 B 52 武 汉 市 地 方 标 准 DB4201DB 4201/T 4672015 茶用菊花繁育技术规程 2015-04-20 发布 2015-05-20 实施 武汉市质量技术监督局 发 布 DB 4201/T 4672015 I 前 言 本标准按GB/T 1.1-2009 标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写给出的规则起草。本标准由江汉大学提出并起草。本标准由武汉市质量技术监督局批准发布。本标准主要起草人：蒋细旺、戴希刚、宋彦丽、张建、镇鸿燕、王沁。DB 4201/T 4672015 1 茶用菊花快速繁育技术规程 1 范围 本标准规定了茶用菊花组织培养、扦插
2、育苗技术及苗期养护管理等技术规范。本规程适用于武汉地区茶用菊花组织培养、扦插快速繁育技术。气候相近地区亦可参照执行。2 品种 适宜本地栽植，产量高，抗性强的茶用菊花品种，如:“杭白菊”（Chrysanthemum morifolium Hangbaiju）等。3 主要繁育技术 3.1 组织培养法 3.1.1 茶用菊花植株的热处理脱毒 3.1.1.1 植株的热处理 取生长健壮、无病虫害的植株，采用昼夜变温并逐步升温的方式进行热处理。将待处理植株先置于人工气候箱中，白天起始温度 28，每天升 2 至 38；晚间起始温度 25，每天升 2 至 32。完成阶段升温处理后继续处理。热处理时间持续 30
3、d40 d。处理期间要保证植株的基质湿润。3.1.1.2 茎尖外植体的获得 取茶用菊花经过热处理后植株的带顶芽的茎段，长 1.5 cm2.5 cm，于流水中冲洗 4 h6 h，然后在超净工作台上将材料浸入 70 酒精中浸泡 30 s，用无菌水冲洗 3 次，再用 0.1 升汞消毒 3 min，无菌水冲洗 5 次6 次，升汞消毒重复 2 次。将消毒后的材料放入无菌的培养皿内，在解剖镜下剥掉顶芽外面的幼叶，切取茎尖，长度为 0.4 cm0.5 cm。3.1.1.3 丛生芽的形成 将茎尖在诱导培养基中培养，茎尖诱导培养基MS蔗糖 3%琼脂 0.75%，pH 6.0。日光灯光源，每天连续光照 12 h，
4、光照强度为 2000 lx3000 lx，培养温度(251)。培养 5 周6 周后形成丛生芽。3.1.1.4 丛生芽的病毒检测 当丛生芽的长度为 2.5 cm3.5 cm时，分割成单株，对其用生物学（指示植物法、症状观察法）、分子生物学（酶联免疫法、逆转录PCR法）的方法进行菊花常见的菊花B病毒（CVB）、番茄不孕病毒（TAV）、黄瓜花叶病毒（CMV）等的病毒检测，选择无病毒植株作为大规模生产脱毒种苗的材料。3.1.2 脱毒丛生芽的增殖 DB 4201/T 4672015 2 将脱毒的单株转接到增殖培养基上进行增殖。增殖培养基是：1/2 MS蔗糖 3%琼脂 0.75%，pH 6.0。培养条件同
5、前 3.1.1.3。当植株长至 6 cm8 cm时，将植株切成带12个节的茎段进行增殖，如此反复。3.1.3 生根培养 将增殖获得的幼苗，长至 6 cm8 cm时，切成带12 个节的茎段，在生根培养基（1/2 MS蔗糖3%琼脂 0.75%，pH 6.0）上进行生根培养 12 d16 d。生根培养条件同见 3.1.1.3。3.1.4 炼苗和移栽 3.1.4.1 炼苗苗床的准备 选择排水良好地块做苗床，苗床宽80100 cm，高1520 cm，长度610m。用泥炭与珍珠岩（体积比1：1）混合均匀作为基质，基质厚度1520 cm。基质先用水淋透，再喷多菌灵50%可湿性粉剂 500倍液消毒，放置12d
6、，再用水淋透，搭盖4060的塑料拱棚，然后用塑料薄膜覆盖保湿7d，保证基质潮湿和较高空气湿度。3.1.4.2 增殖苗的移栽 生根3周后，当苗长至高 5 cm 7cm，具有 4 5 片叶，56 条根时，可将试管苗进行适当炼苗，即将培养瓶拿出培养室，去掉封口膜，置于（252）下通风炼苗3d，期间可逐渐增强光照。从培养瓶中取出试管苗，用清水小心洗净粘附在根系上的琼脂，不可伤害根系和茎叶。移栽入基质，株行距 3 cm8 cm。用塑料薄膜搭成小拱棚覆盖保湿，及时搭盖遮阳网，遮荫 7080%。3.1.5 组培苗的田间管理 3.1.5.1 温度、湿度和光照的控制 移栽后遮阴 70%80%，晴天中午和下午揭开
7、塑料薄膜 23 次通风。温度控制在 25 30，6 d10 d后必须保持空气相对湿度 95%以上；10 d20 d逐渐增加通风，揭膜，每天用喷雾器喷雾 35 次保持空气湿度 80%90%，逐渐减少浇水量，但保持基质湿润。710 d幼苗即可成活，23 周后移栽成活率为 95 以上。3.1.5.2 苗期养分和病虫害管理 刚移栽的幼苗初期，10 d内间隔 35 天叶面喷0.2%的磷酸二氢钾 23 次，10 天后基质浇0.4%的磷酸二氢钾一次。当苗长至高 8 cm 12 cm，具有 5 8片叶，68 条根，且植株健壮、叶大而颜色深绿，可出圃。3.2 扦插法 3.2.1 采穗圃的建立 选择水源充足，无传
8、染源的场地，为脱毒苗建立采穗圃。3.2.2 采穗母株的培育 2 月下旬，对上年宿存的脱毒苗植株，施入充分腐熟的有机肥，有机肥由菜籽饼 200 kg/666.7 m和普通过磷酸钙 52.3 kg/666.7 m组成。采穗的脱毒母株要求2代以内。扦插成活率与愈伤组织的尽快形成密切相关。插穗在剪切后脱离了母体，很容易失去水分和养分，若愈伤组织形成的时间短，则有利于生根，并发育成健壮苗；若愈伤组织形成的时间长，则不利于生根，即使生根也不能发育成健壮苗，最终仍会死亡。因此在采取接穗前的 14 d21 d，应对采接 DB 4201/T 4672015 3 穗植株加强水肥管理，可喷施含磷酸二氢钾 0.3 和
9、过磷酸钙 1%5（取上清液）的混合肥料，保证插穗旺盛的生命力。3.2.3 扦插苗床准备 按本标准3.1.4.1的要求准备。3.2.4 插穗采集与保湿保鲜 46 月选当年生发育健壮的脱毒苗的嫩枝梢作插穗，插穗随剪随插。若从远距离采集插穗时，将枝条剪成 20 cm30 cm的长度，保护好叶片。每30枝捆成一束，用湿毛巾包裹，放人无盖透气的瓦楞箱中，低温运输。运达目的地后，将枝条插入装有清水的开口容器中，放在阴凉处，每天换清水一次，保存 3 d5 d。当天插不完的插条，用湿毛巾包裹置低温处保鲜。3.2.5 插穗剪制 将插条剪成 6 cm8 cm，去掉顶芽，带 24 节，保留上部 2 片叶，上端距最上
10、腋芽 0.5 cm处平剪，下端剪成斜口，靠近最下端的节位。3.2.6 扦插 扦插前将苗床浇透，按株行距 3 cm10 cm先用细棍插孔，深达 2 cm3 cm，插后压实，淋清水，再喷多菌灵 50%可湿性粉剂 500 倍液；搭建塑料薄膜小拱棚，高度 40 cm60 cm，薄膜四周用土块压紧实。再在外搭建 1 m1.5 m荫棚，遮光率 60%70%。3.2.7 扦插后管理 扦插后，小拱棚内保持空气湿度 85%95%，7 d后逐渐减少浇水量。每天中午和下午揭开塑料薄膜 23 次通风透气。14 d后揭膜，常规田间管理。及时喷药预防和防治病虫害，具体防治方法见附录A。21 d28 d后可移栽。DB 42
11、01/T 4672015 4 附 录 A（规范性附录）茶用菊花主要病虫害防治 表A.1 茶用菊花主要病虫害防治 病虫害名称 发病时间、危害部位及症状 防治方法 黑斑病 Septoria chrysanthemella 57 月；主要危害植株叶片。下层叶先感病，病斑由淡黄转褐至黑色，病部与正常部位分明，后期病斑连接，死叶悬于茎上一段时间。发病时从植株下部叶片开始侵染，逐渐向上蔓延 及时将园圃内的枯枝落叶和杂草彻底清除销毁，改善卫生状况，减低黑斑病病原菌的种群数量。发病后及时用 50%多菌灵 500800倍液、波尔多液 100150 倍液喷洒 菊 花 褐 斑 病Septoria chrysanth
12、emi-indica 由立枯丝核菌引起的一种真菌病害。下部叶片开始发病，逐渐向上部蔓延，初期为圆形或椭圆形，紫褐色，后期为黑色。严重时病斑可连成片，使叶片枯黄脱落。跟黑斑病相比叶病斑褐色较浅 发病初期喷洒 50%多菌灵可湿性粉剂 500 倍液，或 75%百菌清可湿性粉剂 700 倍液，或50%苯菌灵可湿性粉剂 15001600 倍液 白粉病 Erysiphe cichoracearum 410 月；危害叶片。叶两面产生白色粉霉层，后出现黑色斑，湿度高易感病 666.7 m2 用多菌灵 50%可湿性粉剂 100200克，兑水喷雾，于发病初期喷洒，共喷 2次，间隔 57 天 霜霉病 Peronos
13、pora danica 610 月；危害叶、茎 花蕾。叶正面出现界限不清的斑块，叶背病斑产生白色至淡褐色霜霉 25%多菌灵可湿性粉剂 400 倍液与 40%三乙膦酸铝可湿性粉剂 200 倍液混配后，710 d喷 1 次 蚜虫：包括菊姬(小)长管蚜Macrosiphoniella sanborni、桃（烟）蚜 Myzus persicae、棉 蚜Aphis gossypii。危害嫩枝、叶背，致使植株矮化、卷叶甚至死亡。叶片还受蚜虫排泄物影响，易遭致煤污病产生。蚜虫也是茶用菊花病毒病害的主要传播者之一。5 月上旬7 月上旬，是蚜虫的第一次发生发育高峰。9月下旬11 月中旬，是蚜虫的第二次发生发育高
14、峰 喷 2.5%的溴氰菊酯 50008000 倍液或 20%杀灭菊酯 20004000 倍液进行防治 棉蛉虫 Heliothis armigera 危害叶。卵淡绿色，幼虫色泽和斑纹变异大，成虫为带褐色的中型蛾。一年有三次发生发育高峰，分别是 5 月上旬6 月下旬，9 月下旬10 月中旬，10月下旬11 月下旬 用黑光 灯诱杀。每 亩用 50%辛硫磷乳油10002000 倍，对水 50 升喷雾；或菊酯类药 2000-4000 倍液喷雾 叶蝉（浮尘子）：包括大青叶蝉（大浮尘子）Cicadella viridis、棉叶蝉（浮尘子）Empoasca biguttata、二星叶 蝉（二 点 浮 尘 子）
15、Erythroneura apicalis。危害叶和茎。它们主要在5 月上旬7 月中旬进行危害 用 50%的磷胺乳剂 2000 倍液、或菊酯类药5000-8000 倍液喷雾 白粉虱（小白蛾、白蝇）Trialeurodes vaporariorum 危害叶片。它们主要在5 月上旬7 月中旬进行危害 用 12%扑虱灵乳油 1 000 倍液，或 25%灭螨猛乳油 1 000 倍液，或 2.5%天王星乳油 3000倍液、2.5功夫菊酯乳油 20003000 倍液 喷洒 银纹夜蛾 Plusia agnata 幼虫蛀食叶片。它们主要在5月上旬7 月下旬进行危害 用每 g 含 100 亿以上孢子的青虫菌粉剂 1500倍液。此外，可选用 10%吡虫啉可湿性粉剂2500 倍液或 5%抑太保乳油 2000 倍液，隔 20天 1 次，防治 1 次或 2 次 DB 4201/T 4672015 5 _
