1、 ICS 65.020.30 CCS B 41 4114 商丘市地方标准 DB 4114/T 1772022 獭兔人工授精操作技术规程 2022-09-20 发布 2022-10-20 实施 商丘市市场监督管理局 发 布 DB 4114/T 1772022 I 前言 本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由商丘市农业农村局提出并归口。本文件起草单位：商丘市农业农村局、睢县畜牧发展服务中心、柘城县畜牧发展服务和中心、郸城县农业农村局、鄢陵县畜牧局、鹿邑县农业农村局、武陟县畜牧发展中心。本文件主要起草人：何永红、李文超、张巧红、顾
2、晓丽、李明霞、舒宁宁、郑修平、高魁英、李龙金、李春晓、魏芝灵、朱鲁豫。DB 4114/T 1772022 1 獭兔人工授精操作技术规程 1 范围 本文件规定了獭兔人工授精的术语和定义、器具用品准备、采精、精液质量检查、精液稀释、输精前准备、输精、器具清洗消毒和档案记录管理的技术要求。本文件适用于商丘市区域獭兔的人工授精操作。2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 人工授精 利用器械以人工方法采集公兔的精液，经特定处理后的兔精液输入母兔生殖道内的特定部位，使母兔卵子受精的一种过程。3.2 精子密度 是指单位容积内所含的精子数目，分为密、中
3、、稀三级。3.3 精子活力 指精液中呈直线前进运动精子占精子总数的比例。3.4 台兔 用于诱导公兔爬跨、采集精液的活体母兔或兔模具。4 器具用品准备 4.1 器具用品 包括干燥箱、恒温保温箱、恒温水浴锅、采精器、集精瓶、连续输精枪、输精套管、显微镜、载玻片、胶用手套等器具、生理盐水等用品。4.2 器具消毒 将器具清洗干净，放入干燥箱消毒20 min30 min，烘干备用。DB 4114/T 1772022 2 5 采精 5.1 采精器的准备 采精器由假阴道和集精瓶组成，假阴道由外壳和内胆组成，外壳是硬塑料管，内胎是橡胶套，内胎用蒸馏水冲洗干净后再用酒精棉球擦拭，酒精挥发后，把内胎装入外壳，内胎
4、两端翻套在外壳上，并用橡皮圈固定。然后将50 60 温水注入假阴道夹层内，采精时保持水温39 42 为宜。5.2 台兔准备 用母兔作为台兔时，台兔应与公兔体格相仿，身体健康，性格温和；用兔模具作为台兔时，台兔外形和大小应符合公兔爬跨和射精要求，方便人工收集精液。5.3 公兔选择 根据品种特征，选择体质结实、生殖器官发育正常，性欲旺盛，经检查精液品质良好的公兔；采精前剪除公兔阴茎周围的长毛，体表擦拭干净。5.4 稀释液的准备 采用0.9%的氯化钠或5%的葡萄糖溶液配制稀释液，也可配制复合稀释液，或购买商品稀释液。自配稀释液时每100 ml要加入青霉素和链霉素各10万国际单位，使用前精液稀释液要放
5、入32 36 水浴锅中预热。5.5 精液质检设备的准备 使用显微镜检测时，显微镜放大倍数在150倍以上，载玻片、盖玻片、量筒、玻璃杯、漏斗等要冲洗干净，载物台上的恒温板和精子密度测定仪要控温预热。5.6 采精程序 5.6.1 采精在公兔笼内进行。将采精台兔置于公兔笼内诱情，台兔后驱朝向笼内，左手保定台兔，右手持采精器伸入母兔腹下，假阴道开口端紧贴母兔阴部。待公兔“爬背”时，右手呈 43角持采精器放在母兔后腿中间，将公兔阴茎导入假阴道，手持假阴道顺着假阴道用力，待公兔射精后，立即收回采精器，使开口端向上，防止精液流出，然后取下采精器。5.6.2 射精后取下集精杯，然后盖上集精杯盖，贴上标签送往精
6、液处理室。5.6.3 每次采精应更换集精瓶，将装有精液的集精瓶放入 35 水浴锅中保存。5.6.4 成年公兔每天采精 1 次，连续采精 4 d5 d 为 1 个采精周期，两个采精周期之间要停止采精休息 1 d，在公兔身体状况异常或者饲养环境温度30 时停止采精。6 精液质量检查 6.1 检查室环境要求 检查室面积20 m230 m2，室内不安装窗户，避免阳光照射，室内安装空调，用于控制温度和湿度，保障空气流通。安装排水系统和水池，便于清洗器具，室内保持干净卫生。6.2 外观检查 DB 4114/T 1772022 3 6.2.1 正常精液为乳白色，是具有特殊腥味的液体。呈清水样、颜色不一致或混
7、有血、粪便等的精液不得用于输精。6.2.2 精液量可直接从集精管的刻度线读出，一般采精量在 0.3 ml2 ml 之间。6.3 显微镜检查 6.3.1 将采集的精液部分样本混匀后，涂抹在载玻片上，置于 38 恒温载物台上，用高倍镜观察精子密度和精子活力。6.3.2 显微镜观测精子呈云雾状，快速涡旋，无法看清单个精子，看似黑云状，判定为精子密度高；呈云雾状，快速涡旋，偶见单个精子，判定为精子密度中；呈薄云状，快速运动，可见少数单个精子闪现，判定为精子密度为合格；精子不动、运动慢、间距大于一个精子头长的判定为不合格。6.3.3 显微镜下观察精子活力，按 0.11.0 分为 10 级来评定，鲜精活力
8、6 级方可用于人工授精。7 精液稀释 7.1 根据显微镜检查结果确定稀释倍数，一般以 5 倍10 倍为宜，稀释操作过程中，切忌用力摇动或振荡。7.2 稀释液应与精液温度接近，维持 25 30，两者温差4。7.3 稀释液注入集精瓶的速度不应过快，注入后用玻璃棒轻轻搅动，使其混合均匀。7.4 稀释后的精液应检查精子活力，活力在 6 级以上的方可用于授精。8 输精前准备 8.1 输精器准备 购买专用兔用输精器，输精前将输精器高温消毒，将稀释后的精液置于输精器中，调节输精刻度。8.2 母兔准备 选择健康无病、发情期的母兔输精，人工授精前6 d，适度增加母兔光照刺激。9 输精 9.1 注射激素 输精时先
9、给母兔注射促排卵素，用量0.3g0.5g，初配用0.3g，以后可增加至0.5g。9.2 输精方法 输精时保定员和输精员相互配合共同完成输精过程，首先保定员左手抓住兔双耳和颈皮，右手将尾翻压在背部，并抓起尾部及背部皮肉，将后躯向上，呈 45度角固定。输精员使用生理盐水把母兔外阴擦拭干净，左手翻开外阴部，右手持连续输精器，稍微晃动插入母兔阴道约7 cm8 cm，感觉有阻力时停止插入，然后后退0.5 cm1 cm，将精液慢慢输入。输精后缓慢抽出输精管，并轻拍母兔臀部，以防精液倒流。DB 4114/T 1772022 4 9.3 输精次数及输精量 一般一次输精即可，每次输精0.3 ml0.5 ml精液，输精10 d后进行妊娠检查。10 器具清洗与消毒 人工授精后，将所有器具用清水洗净，再用蒸馏水冲洗；玻璃和橡胶材质的器具121高压灭菌15 min20 min，烘干冷却后放置相应的在器具柜内。11 档案记录 记录要清晰准确，主要记录采精公兔情况、公兔精液品质检查、稀释倍数、采精时间、授精时间，授精母兔情况等，档案记录保存2年。
