1、 ICS 67.08 CCS B 32 3401 安徽省合肥市地方标准 DB 3401/T 3142023 西瓜抗白粉病鉴定技术规程 Technical code of practice for evaluation of watermelon resistanceto powdery mildew 2023-12-15 发布2023-12-15 实施合肥市市场监督管理局发 布 Q/LB.XXXXX-XXXX 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由
2、合肥市农业农村局提出并归口。本文件起草单位：安徽省农业科学院园艺研究所、合肥丰乐种业股份有限公司。本文件主要起草人：严从生、洪秀景、张其安、王浩波、方凌、江海坤、俞飞飞、王艳、王明霞、马绍鋆、贾利、葛治欢、范家萌、徐丽媛。DB 3401/T 3142023 1 西瓜抗白粉病鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了西瓜抗白粉病鉴定的原理、方法及抗病性评价方法。本文件适用于西瓜抗白粉病室内苗期抗病性鉴定。2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。3 术语和定义 NY/T 3626 界定的术语和定义适用于本文件。4 材料与方法 材料 4.1.1 病原菌 单囊壳白粉菌（Podosphaera xant
3、hii）生理小种2 France。4.1.2 西瓜品种 鉴定品种：待鉴定西瓜品种。对照品种：抗病对照品种为西瓜抗白粉病种质PI482246，感病对照品种“早佳”和其他待鉴定品种。4.1.3 培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）、马铃薯葡萄糖培养液（PDB）、麦粒沙培养基。4.1.4 其他材料 培养皿（直径大小为90 mm）、250 mL三角瓶、试管、镊子、酒精灯、脱脂棉、育苗盘等实验耗材；恒温培养箱、超净工作台、高压灭菌、冰箱、可控温温室、微波炉、电磁炉、摇床、离心机等实验仪器。方法 4.2.1 PDA 培养基制备 称取洗净去皮的马铃薯200 g，切成小块，加水1000 mL，煮沸0.5
4、h，纱布过滤，加入琼脂粉15 g，加热彻底溶化后，再加入葡萄糖15 g，搅拌均匀并溶解后，加水至总体积为1000 mL，分装于250 mL 三角瓶；121、0.1 MPa，灭菌20 min，随后倒入90 mm 培养皿备用。4.2.2 PDB 培养液制备 DB 3401/T 3142023 2 PDA 培养基中不加入琼脂粉，制备方法和流程与4.2.1相同。4.2.3 病原菌扩繁 取保存在80的西瓜白粉病病原菌，用PDA培养基28条件下复苏2 d，待菌落长出后再转接到新的PDA培养基上生长，培养7 d 10 d备用。4.2.4 喷雾法孢子悬浮液的制备 取生长旺盛的西瓜白粉病病原菌菌丝，接种于PDB
5、液体培养基中，在28摇床里振荡培养7 d 10 d后，将振荡培养后的菌液用双层纱布过滤，去掉菌丝，滤液以3000 r/min离心，去除上清液，用无菌水重悬，用血球计数板统计病原菌孢子的数目，调至孢子悬浮液浓度为1106个/ml，现用现配。4.2.5 育苗 用47春雷霉素王铜可湿性粉剂按1000倍加入55温水中浸种6 h，用干净的湿纱布包好，置于28催芽，待种子胚根长至0.5 cm、85的种子露白后播种。播种时，将种子轻轻放入培养钵或育苗盘，覆盖潮土l cm，温度控制在25 30 的可控温室。育苗到3叶或4叶期时形成鉴定和对照材料备用。4.2.6 接种 采用PDA培养基繁殖病原菌，再用PDB培养
6、基扩大培养，制备孢子悬浮液，需要鉴定的品种直接播种于无菌基质中，同时播种对照品种。选取3叶或4叶期生长状态一致、健壮的待鉴定西瓜幼苗，用制备的1106个/ml 孢子悬浮液均匀喷洒植株叶面。设无菌水喷雾叶面接种为对照。5 鉴定 选择材料 选取生长健壮、长势一致的待鉴定材料、抗病材料和感病材料各20株幼苗，重复3次，分别放置，用于抗病性鉴定。接种后幼苗培养 接种后的待测材料在温室生长，温度控制在25 30，正常管理。调查 5.3.1 调查时间 接种后第10 d开始调查，每隔5 d调查一次，直至感病对照品种发病率达80止。5.3.2 调查方法 记录待测材料品种的发病情况，健康株数及总株数等记入西瓜抗
7、白粉病鉴定调查表（参见附录A），分别记录，计算发病率。5.3.3 计算发病率 5.3.4 数据处理 DB 3401/T 3142023 3 根据调查数据，记录待测材料白粉病抗病性鉴定调查表（参见附录A)，鉴定材料记录于表A.1，抗病材料记录于表B.1，感病材料记录于表B.2。计算发病率：按式（1）计算。P=bab 100（1）式中：P=发病率，单位为百分号（%）；b=总株数，单位为株；a=健株数，单位为株。平均值：（P1+P2+P20）20 评价 5.4.1 结果有效性 感病对照材料80%P，且抗病对照材料P20%，该批次抗白粉病鉴定结果视为有效。5.4.2 鉴定判别 西瓜白粉病抗病性分级标准
8、用发病率的高低评价。高抗（High Resistance,HR）P20%中抗（Middle Resistance,MR）20%P50%轻抗（Slight Resistance,SR）50%P80%感病（Susceptible,S）80%P 6 鉴定记录 鉴定结果报告单需要出具鉴定单位、地点及时间等，报告格式参见附录A。DB 3401/T 3142023 4 附录A （资料性）西瓜待测材料白粉病抗病性鉴定调查表 西瓜白粉病品种抗病性鉴定调查表：鉴定材料见表A.1；抗病材料见表A.2；感病材料见表A.3。表A.1 西瓜鉴定材料白粉病抗病性鉴定调查表 编号 品种名称 总株数 接种后第10d 接种后第
9、15d 接种后第20d 接种后第25d 接种后第30d 接种后第35d 接种后第40d 平均值 抗性类型 株 健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%接种日期 鉴定地点 鉴定单位 单位（盖章程）年 月 日 检测人：复核人：年 月 日 年 月 日 DB 3401/T 3142023 5 表 A.2 西瓜抗病材料白粉病抗病性鉴定调查表 编号 品种名称 总株数 接种后第10d 接种后第15d 接种后第20d 接种后第25d 接种后第30d 接种后第35d 接种后第40d 平均值 抗性类型 株 健康株数 发病率%健康
10、株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%接种日期 鉴定地点 鉴定单位 单位（盖章程）年 月 日 检测人：复核人：年 月 日 年 月 日 表 A.3 西瓜感病材料白粉病抗病性鉴定调查表 编号 品种名称 总株数 接种后第10d 接种后第15d 接种后第20d 接种后第25d 接种后第30d 接种后第35d 接种后第40d 平均值 抗性类型 株 健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%健康株数 发病率%接种日期 鉴定地点 鉴定单位 单位（盖章程）年 月 日 检测人：复核人：年 月 日 年 月 日 DB 3401/T 3142023 6
