1、ICS 65.020B 05黑 龙 江 省 佳 木 斯 市 地 方 标 准DB2308DB2308/T 1252022水稻稻瘟病抗性鉴定技术规程2023-01-05 实施2022-12-06 发布佳木斯市市场监督管理局 发布 DB2308/T 1252022前言本文件按照 GB/T1.1-2020标准化工作导则第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件准由佳木斯市农业农村局提出并归口。本文件由佳木斯市市场监督管理局批准发布。本文件准起草单位：黑龙江省农业科学院水稻研究所。本文件主要起草人：王桂玲、陆文静、
2、周雪松、宋成艳、刘乃生。本文件为 2022 年首次发布。DB2308/T 12520221水稻稻瘟病抗性鉴定技术规程1范围本文件规定了水稻稻瘟病抗性鉴定技术的术语与定义、试剂材料、仪器设备、病菌的制备，田间试验方法，调查方法。本文件适用于黑龙江省佳木斯市水稻种质资源、品种（系）等材料对稻瘟病抗性的鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T 1300农作物品种区域试验技术规范 水稻NY/T 2646水稻品种试验稻瘟病抗性鉴定与评价技术规程NY/T 32
3、57-2018水稻稻瘟病抗性室内离体叶片鉴定技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1水稻稻瘟病水稻稻瘟是由无性型真菌稻梨孢属侵染引起的水稻病害，包括苗瘟、叶瘟、节瘟、枝梗瘟、谷粒瘟和穗颈瘟。3.1.1叶瘟本田成株期叶片发病称为叶瘟。一般在水稻分蘖期盛发，病斑的形状、色泽和大小常由于气侯条件，病斑新老和水稻品种的感病程度而差异，可分为慢性型、急性型、白点型和褐点型四种。3.1.2穗颈瘟穗颈瘟发生于颈部、穗轴、枝梗上，病斑初为暗褐色小点，以后上下扩展形成长达2 cm3 cm黑褐色条斑，轻者影响结实、灌浆以至秕粒增多，重者可形成白穗，不结实。3.2人工接种鉴定在适宜条件下，通过人工操作
4、将接种体接种于水稻植株上，判别水稻品种抗病性的接种鉴定方法。3.3自然诱发鉴定在适宜条件下，通过高肥足水及种植感病品种判别水稻品种抗病性的鉴定方法。3.4接种体用于人工接种鉴定的水稻稻瘟病菌分生孢子悬浮液。3.5喷雾接种将水稻稻瘟病菌分生孢子悬浮液喷雾至水稻叶片和穗颈上，使水稻在适宜条件下感染稻瘟病菌的接种方法。4试剂与材料DB2308/T 125202224.1酵母淀粉培养基淀粉10 g，酵母粉2 g，琼脂粉20 g，蒸馏水1000 mL。4.2高梁粒培养基高粱粒煮到中间有小硬心时，装入三角瓶中，高温灭菌40 min。5仪器设备5.1超净工作台洁净等级100级0.5 um，平均风速0.25
5、m/s0.6 m/s。5.2高压灭菌锅温度范围0 135，灭菌时间范围4 min120 min，最高工作压力0.22 MPa0.25 MPa。5.3恒温培养箱温度范围0 50，温度波动1，光照度0 lx7500 lx。5.4光学显微镜目镜10；物镜10、40。5.5电子天平感量0.01 g。6病菌的制备6.1病原菌分离培养选病菌标样，用无菌水冲冼3 min，放入铺有湿滤纸的培养皿内，放入28 恒温箱内培养24 h，用悬挂法分离多孢菌株，确认为稻瘟病菌后挑入酵母淀粉平面培养基上提纯一次，转入酵母淀粉试管斜面培养基上进行扩大培养。6.2接种体准备将斜面培养基上培养的多孢菌株接种到高粱粒培养基上，在
6、26培箱内黑暗培养14d左右备用。将高粱粒培养基培养的多孢菌株用无菌水洗后放在医用白瓷盘内培养48 h，促其产孢，然后用无菌水洗下孢子，用2层医用纱布过滤，孢子悬浮液的制备符合NY/T 3257-2018中6.2.2的规定，配制成5105 个/mL的孢子悬浮液备用。7鉴定方法7.1病圃设置7.1.1种子质量鉴定材料种子符合NY/T 1300中5.4中规定，不应带检疫性病虫害。7.1.2自然诱发病圃DB2308/T 12520223塑料大棚旱育苗，于5月下旬插秧，插植规格30 cm10 cm，每穴3株5株，每品种2行区，行长1 m，试验区四周插感病品种伊79-5，并在田间水耙地前施磷酸二铵，于生
7、育期间追施尿素，按350 kg/hm2分三次施入，以诱发稻瘟病发生。7.1.3人工接种病圃种植方法同自然诱发病圃。7.2人工接种同熟期的水稻品种叶瘟接种时间为分蘖末期，穗颈瘟接种时间为孕穗期，叶瘟和穗颈瘟各接种3次，每两次接种间隔1天。接种方法：采用人工喷雾接种孢子悬浮液方法，接种时间：下午4:00至傍晚。7.3调查方法7.3.1调查时间叶瘟的调查时间为8月初，穗颈瘟的调查时间为9月初。7.3.2调查标准叶瘟调查标准按NY/T2646执行：0级 无病；1级 针尖状大小褐点；2级 稍大褐点；3级 小圆形稍长的灰色病斑，边缘褐色，病斑直径约1 mm2 mm；4级 典型纺缍形病斑，长3 mm以上，通常局限在两条主脉之间，为害面积不超过叶面积的2%；5级 典型病斑，为害叶面积为叶面积2%10%；6级 典型病斑，为害叶面积为叶面积11%25%；7级 典型病斑，为害叶面积为叶面积26%50%；8级 典型病斑，为害叶面积为叶面积51%75%；9级 为害叶面积超过叶面积的75%；穗颈瘟调查标准：0级 无病；1级 发病率低于1%；3级 发病率为1%5%；5级 发病率为6%25%；7级 发病率为26%50%；9级 发病率为51%100%。
