1、ICS65 150CCS B 5245广西壮族自治区地方标准DB45/T 25522022乌原鲤Procypris merus2022-06-24 发布2022-07-30 实施广西壮族自治区市场监督管理局 发 布DB45/T 25522022II前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由广西壮族自治区农业农村厅提出、归口并宣贯。本文件起草单位：广西壮族自治区水产科学研究院。本文件主要起草人：施军、何安尤、韩耀全、吴伟军、雷建军、李育森、王大鹏。DB45/T 255220221乌原鲤1范围本文件规定了乌原鲤（Procypris
2、merus Lin）种质评定的技术要求。本文件适用于广西行政区域内乌原鲤的种质评定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 18654.3养殖鱼类种质检验第3部分：性质测定GB/T 18654.4养殖鱼类种质检验第4部分：年龄与生长的测定GB/T 18654.6养殖鱼类种质检验第6部分：繁殖性能的测定GB/T 18654.12养殖鱼类种质检验第12部分：染色体组型分析3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4名称与分类地位
3、4.1名称乌原鲤（Procypris merus Lin）。4.2分类地位硬骨鱼纲（Chondrichthyes），鲤形目（Cypriniformes），鲤科（Cyprinidea），鲤亚科（Cyprininae），原鲤属（Procypris Lin），乌原鲤（Procypris merus Lin）。5主要形态特征5.1外形特征5.1.1外形体长，侧扁，略显菱形，背部隆起，腹部圆而平直。头近圆锥形，头背面鼻孔处稍凹。吻钝，吻长大于眼径。口亚下位，深弧形，口裂末端达鼻孔前下方。唇发达，上下唇均具细小乳突。须2对，发达，吻须可达鼻孔的下方。眼大，侧上位，眼间距大于眼径。侧线平直，向后伸至尾鳍基部
4、。背鳍外缘深凹，DB45/T 255220222第4根不分枝鳍条为硬刺，后缘具锯齿；臀鳍最后1根不分枝鳍条为骨质硬刺，其后缘有锯齿；尾鳍深叉。外形见图1。图 1外形5.1.2体色头及体侧上部暗黑色，腹部银白色；体侧每个鳞片基部具1个黑斑，组成1112条纵形细条纹；各鳍呈深黑色。5.2内部构造特征5.2.1鳔鳔分2室。前室较后室大，后室末端尖，呈锥状。5.2.2肠长度为体长的3.13.5倍。5.2.3腹膜颜色灰白色。5.3可数性状5.3.1鳍式背鳍-1517，臀鳍-5，胸鳍-18，腹鳍-9。5.3.2齿式下咽齿3行。齿式为234432。5.3.3鳞式侧线鳞42895645，背鳍前鳞1417，围尾
5、柄鳞1618。DB45/T 2552202235.3.4鳃耙数第一鳃弓外侧鳃耙2023。5.3.5脊椎骨脊椎骨总数：43枚。5.4可量性状体长250 mm450 mm、体重800 g1 800 g的个体，实测可量性状比例变动值见表1。表 1实测可量性状比例变动值全长/体长体长/体高体长/头长体长/尾柄长头长/吻长头长/眼径头长/眼间距尾柄长/尾柄高1.280.022.840.234.140.135.880.452.310.204.640.311.900.221.300.096生长与繁殖6.1生长全长与体重的关系见式（1）：W=6 1052.50222=0.958(1)式中：W体重,单位为克(g
6、)；L体长,单位为毫米(mm)。6.2繁殖6.2.1性成熟年龄雌、雄鱼均5龄性成熟。6.2.2繁殖力性成熟个体性腺每年成熟1次，性腺成熟系数平均18.5，绝对繁殖力平均50 000粒卵，体长相对繁殖力每毫米平均139.9粒，体质量相对繁殖力每克平均43.9粒，净体质量相对繁殖力每克平均53.4粒。卵具粘性，黄色，卵径1.68 mm1.98 mm。6.2.3繁殖水温16 22，最适水温18 20。7遗传学特征7.1细胞遗传学特征7.1.1染色体体细胞染色体数目：2n=100。DB45/T 2552202247.1.2核型核型公式：2n=14m+28sm+16st+42t；臂数NF=142。染色体
7、组型见图2。图 2染色体组型7.2分子遗传学特征COI条形码基因共1551 bp，种内个体间最大遗传距离2。COI基因DNA条形码序列见图3。DB45/T 255220225图 3COI 基因 DNA 条形码序列8检验方法8.1性状测定按照GB/T 18654.3的要求执行。8.2生长与繁殖测定生长测定按照GB/T 18654.4的要求执行，年龄鉴定材料为鳞片。繁殖测定按照GB/T 18654.6的要求执行。DB45/T 2552202268.3染色体和核型检测按照GB/T 18654.12的要求执行。8.4DNA 条形码检测8.4.1DNA 提取取肌肉组织剪碎，用酚氯仿方法或者高盐抽提法提取
8、基因组DNA，用无菌超纯水溶解后存放于-20 环境保存备用。8.4.2PCR 扩增8.4.2.1引物序列DNA条形码基因引物序列见表2。表 2DNA 条形码基因引物序列引物序号扩增基因引物序列（5-3）FCOIGACTTGAAAAACCACCGTTGRCOICTCCGATCTCCGGATTACAAGAC8.4.2.2扩增反应条件总体积为20 L，其中10PCR buffer 2.0 L，dNTP1.5 L(2.5 mmol/L)，TaqDNA聚合酶0.3 L，正反向引物各1 L(10 mol/L)，模板DNA 1 L，其余体积用双蒸水补足。8.4.2.3PCR 反应程序94 预变性4min；94 变性45s，54 退火45s，72 延伸1min，30个循环；72 终延伸10min。8.4.3序列测定将PCR产物纯化后双向测序。9判定规则被检测样品符合本文件第5章和第7章要求的为合格样品，有不合格项的则判定为不合格样品。
