1、DB43/T 26782023 43湖南省地方标准ICSCCS 65.020.01B 39发 布湖南省市场监督管理局蛹虫草菌种生产技术规程Technology Code of practice of production for yongchongcao strain production 2023-08发布-222023-11实施-22DB43/T 26782023 I 目 次 前言 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 环境条件 1 5 菌种选择 1 6 母种生产 2 6.1 工艺流程 2 6.2 培养基配制 2 6.3 分装与灭菌 2 6.4 斜面摆放 2 6.5
2、 接种 2 6.6 培养 2 6.7 贮存 2 7 栽培种生产 2 7.1 工艺流程 2 7.2 培养基配制 2 7.3 分装与灭菌、冷却 2 7.4 接种 3 7.5 培养 3 7.6 贮存 3 8 质量检验 3 8.1 质量要求 3 8.2 抽样与检测 3 8.3 留样 3 8.4 标识与储运 3 9 废弃物处理 3 10 档案管理 3 附录 A（资料性）常用母种培养基配方 4 附录 B（资料性）常用栽培种培养基配方 5 附录 C（资料性）母种质量要求 6 附录 D（资料性）栽培种质量要求 7 附录 E（资料性）蛹虫草菌种生产记录表 8 参考文献 9 DB43/T 26782023II D
3、B43/T 26782023 III 前 言 本文件按照 GB/T 1.12020标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由湖南省农业农村厅提出。本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。本文件起草单位：湖南金芙农业科技有限公司、衡阳市蔬菜研究所、湖南华达田园生态农业股份有限公司、衡阳桃源特色种养专业合作社、衡阳市德丰源种业有限责任公司。本文件主要起草人：胡国平、龙新、郑丽娟、郑婷、龙耀、郑四清、李明骏、秦柏生、李珊珊、李晴、罗雨秋。DB43/T 26782023IV DB43/T 267
4、82023 1 蛹虫草菌种生产技术规程 1 范围 本文件规定了蛹虫草菌种生产的环境条件、菌种选择、母种生产、栽培种生产、质量检验、废弃物处理与档案记录。本文件适用于蛹虫草菌种生产。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB/T 34805 农业废弃物综合利用通用要求 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 1742 食用菌菌种通用技术要求 NY/T 1846 食用菌菌种检验规程 NY
5、/T 1935 食用菌栽培基质质量安全要求 NY/T 2375 食用菌生产技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 蛹虫草 cordyceps militaris 麦角菌科、虫草属真菌，又名北冬虫夏草、北虫草、北蛹虫草，由子座（即草部分）与菌核（即虫的尸体部分）两部分组成的复合体。3.2 出草 out of the grass 菌丝形成原基，由原基发育成子实体的过程。4 环境条件 环境条件应符合 NY/T 528、NY/T 2375 的规定；生产用水应符合 GB 5749 的规定。5 菌种选择 应从具有生产经营资质的供种单位购买，菌种质量应符合 NY/T 1742 的要求；
6、自制菌种应符合食DB43/T 267820232 用菌菌种管理办法(农业部令第 62 号2015 年修正本）的规定。6 母种生产 6.1 工艺流程 培养基配制分装灭菌摆斜面冷却接种培养检查成品。6.2 培养基配制 培养基配制应符合 NY/T 528、NY/T 1935 的规定。常用母种培养基配方参见附录 A.6.3 分装与灭菌 采用规格为 18 mm180 mm 或 20 mm200 mm 的玻璃试管，试管用硅胶塞封口。将配制好的培养基立即分装，装量为试管长度的 1/41/5。试管口应保持干净，随后塞入硅胶塞，并用牛皮纸包扎。将分装包扎好的试管直立放入高压灭菌锅内（压力 0.12 Mpa0.1
7、5 Mpa、温度 121 126），灭菌25 min30 min。6.4 斜面摆放 灭菌结束后温度自然冷却至 85 95 时，打开排气阀排出热空气；当压力表指针降至 0 Mpa、培养基温度降到 55 65 时取出试管摆斜面，斜面长度不超过试管长度的 2/3。6.5 接种 接种设施设备消毒流程应符合 NY/T 528 的规定。接种时应无菌操作，接种后及时贴好标签，标签应注明菌种名称及接种时间。6.6 培养 接种后置于培养箱或培养室培养，控制温度 16 18，避光培养 5 d6 d，定期检查，清除污染试管，待菌丝长满试管斜面，继续培养 3 d5 d 即可用于生产。6.7 贮存 储存超过 60 d
8、再使用的母种，应进行转代扩繁和出草试验。7 栽培种生产 7.1 工艺流程 培养基配制装瓶灭菌冷却接种培养成品。7.2 培养基配制 培养基配制应符合 NY/T 528、NY/T 1935 的规定。常用栽培种培养基配方参见附录 B。7.3 分装与灭菌、冷却 采用规格为 250 mL 的玻璃三角瓶，用专用封口膜封扎瓶口。将配制好的培养基立即分装，装量不DB43/T 26782023 3 超过三角瓶容量的 2/5。将分装好的三角瓶放入高压灭菌锅内（压力 0.12 Mpa0.15 Mpa、温度 121 126），灭菌 25 min30 min。灭菌结束后温度自然冷却至 85 95，压力表指针降至 0 M
9、pa时，打开排气阀，在培养基温度降到 55 65 时取出三角瓶，冷却至常温。7.4 接种 接种设施设备消毒流程应符合 NY/T 528 的规定，接种时应无菌操作。用接种钩从母种斜面中切取1 cm菌面(可稍带培养基)放入玻璃三角瓶中，迅速用专用封口膜封扎瓶口，每支母种可接种 10 瓶15瓶栽培种。接种后及时贴好标签，标签应注明菌种名称及接种时间。7.5 培养 接种后先避光静置培养，温度 16 18，时间 1 d2 d，再放入摇床上振荡培养，控制转速150 r/min，温度 16 18，避光培养 4 d5 d，定期检查，清除污染的菌种，保持培养房空气环境清新无异味。7.6 贮存 栽培种培养好后应尽
10、快投入生产，未用完的栽培种储存在 2 4 环境中，储存不得超过 7 d。8 质量检验 8.1 质量要求 母种质量要求参见附录 C；栽培种质量要求参见附录 D。8.2 抽样与检测 母种、栽培种的抽样、检验和判定应符合 NY/T 1846 的规定。8.3 留样 应符合 NY/T 1742 的规定。8.4 标识与储运 应符合 NY/T 528、NY/T 1742 的规定。9 废弃物处理 菌种生产所产生的废弃物应集中分类无害化处理，并符合 GB/T 34805 的规定。10 档案管理 蛹虫草菌种生产记录表见附录 E，原始记录档案应保存 3 年及以上。DB43/T 267820234 附 录 A（资料性
11、）常用母种培养基配方 常用母种培养基配方见表 A.1。表 A.1 常用母种培养基配方 序号 原辅材料名称 PDA培养基 CPDA加富培养基 备注 1 马铃薯浸出汁 200 g 200 g PH值自然 2 葡萄糖 20 g 20 g 3 琼脂 20 g 20 g 4 磷酸二氢钾 0 2 g 5 硫酸镁 0 0.5 g 6 水 1000 mL 1000 mL DB43/T 26782023 5 附 录 B（资料性）常用栽培种培养基配方 常用栽培种培养基配方见表 B.1。表 B.1 常用栽培种培养基配方 序号 原辅材料名称 配方一（100）配方二（100）配方三（100）备注 1 马铃薯 16.20
12、 18.00 20.00 PH值自然 2 蚕蛹粉 1.62 2.00 1.00 3 葡萄糖 0.40 0.20 0.30 4 磷酸二氢钾 0.16 0.10 0.10 5 硫酸镁 0.08 0.10 0.10 6 维生素B1 0.24 0.30 0.30 7 水 81.30 79.30 78.20 合计 100.00 100.00 100.00 DB43/T 267820236 附 录 C（资料性）母种质量要求 母种质量要求见表 C.1。表 C.1 母种质量要求 项 目 要 求 菌 丝 菌丝长满基质斜面，菌苔粉末状或短绒毛状，橘黄色或橘红色，厚薄均匀一致，无明显白色绒毛状气生菌丝；无杂菌；菌苔
13、底部呈黄色 原 基 母种试管在24的条件下长时间保存可出现原基 转代次数 一代母种转代不超过3次 镜 检 菌丝丝状，均匀一致，无杂菌 DB43/T 26782023 7 附 录 D（资料性）栽培种质量要求 栽培种质量要求见表 D.1。表 D.1 栽培种质量要求 项 目 要 求 菌 丝 菌丝絮状或小球状，均匀一致，挂瓶壁的菌丝短绒毛状，淡黄色 杂 质 无任何杂质 培 养 液 菌液澄清透明，菌球在菌液中分散均匀、无上浮、无沉淀 气 味 有蛹虫草独有的菌香味、无异味 镜 检 菌丝直径与分枝均匀一致，无其它真菌和细菌 DB43/T 267820238 附 录 E（资料性）蛹虫草菌种生产记录表 蛹虫草菌种生产记录表见表 E.1。表 E.1 蛹虫草菌种生产记录表 日期 母种来源 栽培种来源 生产活动内容 生产规格 投入品内容 使用量 操作人 技术负责人 记录人：审核人：记录日期：DB43/T 26782023 9 参 考 文 献 1 食用菌菌种管理办法(农业部令第 62 号2015 年修正本）
