1、 ICS 65.020.01 CCS B 15 41 河南省地方标准 DB41/T 24832023 芝麻枯萎病抗性鉴定技术规范 2023-09-15 发布2023-12-14 实施河南省市场监督管理局发 布 DB41/T 24832023 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 基本要求.1 5 苗期抗病性鉴定与评价.2 6 成株期抗病性鉴定与评价.3 附录 A（资料性）芝麻枯萎病病情调查表样式.5 附录 B（规范性）芝麻枯萎病抗性鉴定结果报告表样式.6 DB41/T 24832023 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则
2、第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由河南省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：河南省农业科学院芝麻研究中心。本文件主要起草人：张海洋、苗红梅、段迎辉、曲文文、常淑娴、琚铭、王慧丽、马琴。DB41/T 24832023 1 芝麻枯萎病抗性鉴定技术规范 1 范围 本文件规定了芝麻枯萎病抗性鉴定的基本要求、苗期和成株期抗病性鉴定与评价方法。本文件适用于芝麻种质资源及新品种（系）枯萎病抗性鉴定与评价。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
3、仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 4407.2 经济作物种子 第2部分：油料类 NY/T 496 肥料合理使用准则 通则 DB41/T 797 夏芝麻栽培技术规程 DB41/T 1312 芝麻田杂草治理技术规程 DB41/T 2393 芝麻主要病虫害综合防治技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 芝麻枯萎病 由尖孢镰刀菌芝麻专化型（Fusarium oxysporum f.sp.sesami）侵染引起的芝麻主要土传真菌病害。苗期发生，造成叶片与幼茎萎焉、植株矮小，甚至整株枯死；成株期发生，造成叶片半边黄化
4、或卷曲，茎部半边或全部维管束变褐，严重时导致叶片萎焉脱落，植株生长受抑，甚至整株枯死。3.2 人工病圃 人为将芝麻枯萎病菌接种到适宜病害发生的场所，以测试芝麻材料的抗病性。3.3 病情指数 全面衡量芝麻枯萎病发病率与严重度的综合指标。3.4 抗病性等级 依据病情指数数值对芝麻抗枯萎病能力作出的评价分级。4 基本要求 抗病性鉴定 4.1 枯萎病抗性鉴定包括苗期室内鉴定和成株期大田病圃鉴定，可根据鉴定目的选用某个时期的鉴定结果评价待测材料的抗病性。DB41/T 24832023 2 种子要求 4.2 选用饱满芝麻种子，剔除破粒、霉粒；播种前禁止使用任何杀菌剂进行种子处理。种子质量应符合GB 440
5、7.2的规定。5 苗期抗病性鉴定与评价 苗期抗病性鉴定 5.1 5.1.1 种子准备 挑选待测芝麻种子100粒，依次用70%乙醇处理30 s、3%次氯酸钠溶液消毒10 min、无菌蒸馏水冲洗35次，然后放入盛有适量无菌蒸馏水的三角瓶中，25 28、100 r/min120 r/min条件下震荡培养至种子露白。5.1.2 幼苗培养 将露白芝麻种子播种于盛有无菌蛭石的塑料花盆中，放入人工气候培养箱培养（温度25 28、相对湿度60%80%、15 h/9 h光暗交替）。培养时定期浇灌1/2霍格兰氏营养液，植株生长至23对真叶期备用。5.1.3 孢子液制备 挑取适量尖孢镰刀菌芝麻专化型菌株菌块，接种于
6、PDB液体培养基中，28、120 r/min150 r/min条件下震荡培养3 d4 d。用无菌医用纱布过滤培养液，并在滤液中加入无菌蒸馏水，调整孢子浓度至1106 cfu/mL5106 cfu/mL。5.1.4 浸根接种 洗去芝麻幼苗根部粘带的蛭石，并用吸水纸快速吸去根部水分。将根部完全浸入孢子液10 min 20 min，重新栽入装有无菌蛭石的塑料花盆中，置于人工气候培养箱培养，培养条件按5.1.2的规定。以无菌水浸根的幼苗作为对照。每处理设置3次重复，每重复植株不少于10株，对应做标记。5.1.5 发病程度调查 5.1.5.1 调查时间及方法 接种后，每7 d观察1次各材料的枯萎病发生情
7、况，第28 d调查并记录总株数、发病株数及病害发生等级，填写芝麻枯萎病病情调查表，见附录A。5.1.5.2 发病等级 芝麻苗期枯萎病发生等级：a)0 级：全株无病状；b)1 级：全株 1/3 以下叶片变黄或萎蔫；c)2 级：全株 1/31/2 叶片变黄或萎蔫，植株略矮；d)3 级：全株 1/23/4 叶片变黄、萎蔫或脱落，植株明显变矮；e)4 级：全株所有叶片萎蔫脱落，茎秆变褐枯死。5.1.5.3 调查结果计算 DB41/T 24832023 3 病情指数（DI）按式（1）计算：DI=(Sini)N4100 (1)式中：DI病情指数；Si 各发病等级的代表数值；ni 各发病等级对应的植株数；N
8、 调查的总株数。病情指数均值（ADI）按式（2）计算：ADI=3 (2)式中：ADI 被鉴定材料3次重复病情指数的平均值；苗期抗病性评价 5.2 根据鉴定材料接种后第28 d的病情指数均值（ADI）大小评定该材料的抗病性等级，填写芝麻枯萎病抗性鉴定结果报告表，见附录B。芝麻苗期枯萎病抗性评价等级划分见表1。表1 芝麻枯萎病抗性评价等级 级别 抗病性等级 病情指数均值(ADI)1 免疫（I）ADI0 2 高抗（HR）0ADI15.0 3 抗病（R）15.0ADI30.0 4 中抗（MR）30.0ADI55.0 5 感病（S）55.0ADI70.0 6 高感（HS）70.0ADI100 6 成株期
9、抗病性鉴定与评价 成株期抗病性鉴定 6.1 6.1.1 病菌培养物制备 将麦粒淘洗干净后，沸煮30 min至麦粒熟透（表皮微裂），按2:1体积比与洗净的稻壳混匀，装入塑料桶（上口直径25 cm，高25 cm），121 湿热高压灭菌1 h；后接入半皿（直径9 cm）长满芝麻枯萎病菌菌丝的PDA固体培养基，混匀后22 28 培养10 d左右，至麦粒稻壳培养物布满菌丝。6.1.2 病圃准备 人工病圃初次接菌前应进行土壤灭菌处理，处理后连续3年以上人为接入芝麻枯萎病菌培养物。人工病圃需具有良好的灌溉条件，接菌后及时灌溉，保持土壤湿度。另外，人工病圃应于当年鉴定结束后休田至次年鉴定开始。6.1.3 病圃
10、接菌 DB41/T 24832023 4 播种前，将制备好的芝麻枯萎病菌培养物与沙土混合后均匀撒入病圃，翻耕23次，耕深约15 cm。每亩接种病菌培养物30 kg。6.1.4 试验设计 试验采用随机区组法，每处理设置3次重复，重复间留走道。每重复2行，行长5 m，行距40 cm，株距14 cm17 cm，株数不少于60株。试验设置抗病和感病对照各1个。在病圃中，抗病对照材料的病情指数小于10.0，感病对照材料的病情指数55.0，且抗性稳定。6.1.5 播种 5月中下旬至6月上旬，适时足墒播种，播种方式为人工开沟条播或起垄穴播，播种深度3 cm左右，适当覆土、镇压，确保一播全苗。播种前，肥料应作
11、为底肥一次施入。肥料使用应符合NY/T 496的规定。6.1.6 田间管理 全生育期内不进行真菌病害防控，且保持土壤湿度适中，以利于枯萎病正常发生。病圃中常规田间栽培管理及草害、虫害防控措施应符合DB41/T 797、DB41/T 1312和DB41/T 2393的规定。6.1.7 发病程度调查 6.1.7.1 调查时间及方法 初花后，宜每7 d调查1次各材料的发病情况，记录总株数、发病株数及病害发生等级，填写芝麻枯萎病病情调查表，见附录A。成株期内共进行45次枯萎病病情调查，直至材料收获前1周终止。当感病对照材料的病情指数均值55.0时，调查结果有效；否则无效。6.1.7.2 发病等级 芝麻
12、成株期枯萎病发生等级：a)0 级：全株无病状；b)1 级：全株 1/3 以下叶片变黄卷缩或萎蔫；c)2 级：全株 1/31/2 叶片变黄卷缩或萎蔫，植株略矮；d)3 级：全株 1/23/4 叶片变黄卷缩或萎蔫，叶片脱落，茎杆大部分变褐，植株明显变矮；e)4 级：全株叶片变黄卷曲或萎蔫，叶片脱落，茎杆变褐枯死。6.1.7.3 调查结果计算 病情指数（DI）和病情指数均值（ADI）分别按式（1）和式（2）计算。成株期抗病性评价 6.2 基于鉴定材料生育期内的多次调查结果，统计病情指数均值（ADI）最大值。根据其大小评定该材料的抗病性等级，填写芝麻枯萎病抗性鉴定结果报告表，见附录B。芝麻成株期枯萎病
13、抗性评价等级划分见表1。DB41/T 24832023 5 A A 附录A （资料性）芝麻枯萎病病情调查表样式 芝麻枯萎病病情调查表样式见表A.1。表A.1 芝麻枯萎病病情调查表 调查时间：年 月 日 第 次调查 材料编号 总株数（株）各病害等级病株数（株）病情指数 0级 1级 2级 3级 4级 调查人：核校人：审核人：年 月 日 年 月 日 年 月 日 DB41/T 24832023 6 B B 附录B （规范性）芝麻枯萎病抗性鉴定结果报告表样式 芝麻枯萎病抗性鉴定结果报告样式见表B.1。表B.1 芝麻枯萎病抗性鉴定结果报告表 送样单位：样品编号 材料名称 病情指数均值 抗病性等级 感病对照 抗病对照 制表人：校核人：负责人：年 月 日 年 月 日 年 月 日
