1、 ICS 13.080 CCS Z 18 37 山东省地方标准 DB37/T 46222023 土壤中 15 种农药残留量的测定 气相色谱-串联质谱法 Determination of 15 pesticides residues in soilGas chromatography-tandem mass spectrometry2023-07-24 发布2023-08-24 实施山东省市场监督管理局发 布 DB37/T 46222023 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 原理.1 5 试剂和材料.1 6 仪器.2 7 试样制备.2 8 分析步
2、骤.2 9 结果计算.4 10 精密度.4 11 定量限.4 附录 A（资料性）15 种农药中英文名称、CAS 号、分子式.5 附录 B（资料性）15 种农药的保留时间、定量离子对和定性离子对.6 附录 C（资料性）15 种农药多反应监测（MRM）色谱图及质谱图.7 附录 D（资料性附 录）精密度的表示和计算.10 DB37/T 46222023 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省农业农村厅提出并组织实施。本文件由山东省农业标准化技
3、术委员会种植业标准化分技术委员会归口。DB37/T 46222023 1 土壤中 15 种农药残留量的测定 气相色谱-串联质谱法 1 范围 本文件规定了土壤中15种农药及其代谢物残留量气相色谱-串联质谱测定的原理、试剂和材料、仪器、试样制备、分析步骤、结果计算、精密度及定量限。本文件适用于土壤中15种农药残留量的测定。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 术语和定义 本文件没有需
4、要界定的术语和定义。4 原理 试样经乙腈提取，提取液经固相萃取净化后，用气相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。5 试剂和材料 除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂，水应为GB/T 6682规定的一级水。5.1 试剂 5.1.1 乙腈（CH3CN，CAS 号：75-05-8）。5.1.2 乙酸乙酯（CH3COOC2H5，CAS 号：141-78-6）：色谱纯。5.1.3 正己烷（C6H14，CAS 号：92112-69-1）。5.1.4 丙酮（CH3COCH3，CAS 号：67-64-1）。5.1.5 氯化钠（NaCl，CAS 号：7647-14-5）。5.2 溶液配制 丙酮-正己烷溶液（1+
5、9，体积比）：量取100 mL丙酮加入900 mL正己烷中，混匀。5.3 标准品 15种农药标准品，参见附录A，纯度应不小于96%。5.4 标准溶液配制 DB37/T 46222023 2 5.4.1 标准储备溶液（100 mg/L）：准确称取 10 mg（精确至 0.01 mg）各农药标准品，用乙酸乙酯溶解并分别定容至 100 mL，-18 以下条件冷冻避光保存，有效期 6 个月。5.4.2 混合标准储备溶液（10 mg/L）：准确吸取 1.0 mL 标准储备溶液（5.4.1）于 10 mL 容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度，-18 及以下条件避光保存，有效期 3 个月。5.5 材料 5.5.
6、1 固相萃取柱：弗罗里矽柱，容积 6 mL，填充物 500 mg。5.5.2 微孔滤膜（有机相）：0.22 m。6 仪器 6.1 气相色谱-串联质谱仪：配有电子轰击源（EI）。6.2 分析天平：感量 0.01 mg 和感量 0.01 g。6.3 冷冻干燥机。6.4 恒温水浴振荡器（往复式）。6.5 涡旋混合器。6.6 氮吹仪：可控温。6.7 离心机：转速不低于 5 000 r/min。6.8 土壤筛：2 mm 孔径。7 试样制备 取0 cm10 cm深地表土1 kg以上，除去样品中的异物（枝棒、叶片、石子、动植物残体等），碾碎后混匀，用四分法留样250 g。将样品置于冷冻干燥机中冻干24 h，
7、并过2 mm孔径的土壤筛。将筛过的细土装入洁净容器，密封避光，粘贴唯一性标识，于-18 及以下条件保存备用。8 分析步骤 8.1 提取 称取10 g 试样（精确至0.01 g）于50 mL具塞刻度离心管中，加入10 mL水浸泡1 h，准确加入乙腈10.0 mL，于50 水浴振荡器上振荡提取30 min，加入5 g氯化钠，剧烈振荡1 min，4 500 r/min离心5 min。准确吸取5.0 mL上清液于15 mL具塞离心管中，将离心管放于80 水浴锅上加热，氮气吹至近干，待净化。8.2 净化 用5 mL丙酮-正己烷溶液（5.2）预淋洗固相萃取柱（5.5.1），弃去淋洗液。下接15 mL刻度离
8、心管，将上述待净化试样（8.1）用5.0 mL丙酮-正己烷溶液（5.2）洗涤至固相萃取柱中，重复一次。将盛有淋洗液的离心管置于氮吹仪上，在水浴温度50 条件下，氮吹蒸发至小于5 mL，用乙酸乙酯定容至5.0 mL，在旋涡混匀器上混匀，用微孔滤膜（5.5.2）过滤，待测。8.3 气相色谱-串联质谱仪参考条件 参考条件如下：a)色谱柱：SH-Rxi-5Sil MS 30 m0.25 mm0.25 m，或相当者；DB37/T 46222023 3 b)色谱柱温度：50 保留 1 min，25/min 升至 125，10/min 升至 300，保留 7 min；c)载气：氦气，纯度99.999%，流速
9、 1.5 mL/min；d)进样口温度：250；e)进样量：1 L；f)进样方式：不分流进样；g)电子轰击源；70 eV；h)离子源温度：200；i)GC-MS 接口温度：250；j)溶剂延迟：1.5 min；k)多反应监测（MRM）：每种农药分别选择一对定量离子、两对定性离子。所有需要检测离子对按照出峰顺序，分时段分别检测。每种农药的保留时间、定量离子对、定性离子对和碰撞电压，参见附录 B。8.4 标准工作曲线 精确吸取一定量5.4.2中配制的标准工作溶液，逐级用乙酸乙酯稀释，配制成质量浓度为0.01 mg/L、0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L的系列标准
10、工作溶液，供气相色谱-串联质谱仪测定。以测得峰面积为纵坐标、对应的标准溶液质量浓度为横坐标，绘制标准工作曲线。注：标准工作溶液现配现用。8.5 定性及定量测定 8.5.1 保留时间 被测试样中目标化合物色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在2.5%之内。8.5.2 定量离子、定性离子及子离子丰度比 在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物的质谱定性离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的2个离子的相对丰度比与浓度相当的标准溶液相比，其相对偏差不超过表1规定的范围，则可判断
11、样品中存在目标化合物。本方法的15种农药标准物质多反应监测色谱图和质谱图参照附录C。表1 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度%50 20 50 10 20 10 允许相对偏差%20 25 30 50 8.5.3 定量 外标法定量。8.6 测定 DB37/T 46222023 4 将标准工作溶液与待测溶液分别注入气相色谱-串联质谱仪中，以保留时间和定性离子定性，测得定量离子峰面积，样品中农药质量浓度应在标准工作曲线质量浓度范围内，超过工作曲线最高点时则应稀释后再进行分析。8.7 平行试验 按8.18.6的规定对同一试样进行平行试验测定。8.8 空白试验 除不加试样外，按照8.18
12、.6的规定进行平行操作。9 结果计算 试样中各农药残留含量，按公式（1）计算：(1)式中：试样中农药残留量，单位为毫克每千克(mg/kg)；农药标准工作溶液的质量浓度，单位为毫克每升(mg/L)；As 农药标准工作溶液的峰面积；A 样品中农药的峰面积；V1 提取溶剂总体积，单位为毫升(mL)；V2 吸取出用于检测的提取溶液的体积，单位为毫升(mL)；V3 样品定容体积，单位为毫升(mL)；m 样品质量，单位为克(g)。注：计算结果应扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留2位有效数字，当结果大于1 mg/kg时，保留3位有效数字。10 精密度 在重复性条件下，获得的2次独立测定结果
13、的绝对差值不应超过重复性限（r），参见附录D。在再现性条件下，获得的2次独立测定结果的绝对差值不应超过再现性限（R），参见附录D。11 定量限 本文件方法对各种化合物的定量限为0.01 mg/kg。DB37/T 46222023 5 附录A （资料性）15 种农药中英文名称、CAS 号、分子式 15种农药中英文名称、CAS号、分子式，见表A.1。表A.1 15 种农药中英文名称、CAS 号、分子式 序号 农药中文名称 农药英文名称CAS号 分子式 1-六六六 alpha-BHC319-84-6 C6H6Cl6 2-六六六 beta-BHC319-85-7 C6H6Cl6 3-六六六 gamma
14、-BHC58-89-9 C6H6Cl6 4-六六六 delta-BHC319-86-8 C6H6Cl6 5 乙烯菌核利 Vinclozolin50471-44-8 C12H9Cl2NO3 6 杀螟硫磷 Fenitrothion122-14-5 C9H12NO5PS 7 毒死蜱 Chlorpyrifos2921-88-2 C9H11Cl3NO3PS 8 三唑酮 Triadimefon43121-43-3 C14H16ClN3O2 9 腐霉利 Procymidone32809-16-8 C13H11Cl2NO2 10 异菌脲 Iprodione36734-19-7 C13H13Cl2N3O3 11
15、 联苯菊酯 Bifenthrin82657-04-3 C23H22ClF3O2 12 甲氰菊酯 Fenpropathrin39515-41-8 C22H23NO3 13 氯氟氰菊酯 Cyhalothrin68085-85-8 C23H19ClF3NO3 14 氟氯氰菊酯 Cyfluthrin68359-37-5 C22H18Cl2FNO3 15 氯氰菊酯 Cypermethrin52315-07-8 C22H19Cl2NO3 DB37/T 46222023 6 附录B （资料性）15 种农药的保留时间、定量离子对和定性离子对 15种农药的保留时间、定量离子对和定性离子对，见表B.1。表 B.1
16、 15 种农药的保留时间、定量离子对和定性离子对 序号 中文名称 保留时间 min 定量离子对 碰撞电压 V 定性离子对 碰撞电压 V 定性离子对 碰撞电压 V 1-666 10.80 180.9-144.9 16 218.9-182.9 8 218.9-144.9 20 2-666 11.33 180.9-144.9 16 218.9-182.9 8 218.9-144.9 20 3-666 11.48 180.9-144.9 16 218.9-182.9 8 218.9-144.9 20 4-666 12.06 180.9-144.9 16 218.9-182.9 8 218.9-144.
17、9 20 5 乙烯菌核利 12.71 212.0-172.0 16 285.0-212.0 12 212.0-145.0 24 6 杀螟硫磷 13.26 277.0-260.0 6 277.0-109.1 14 260.0-125.1 12 7 毒死蜱 13.57 196.9-168.9 14 313.9-257.9 14 313.9-285.9 8 8 三唑酮 13.78 208.1-181.0 10 208.1-111.0 22 208.1-127.0 14 9 腐霉利 14.60 283.0-96.0 10 285.0-96.00 10 283.0-68.0 24 10 异菌脲 17.7
18、5 314.0-245.0 12 314.0-56.0 22 316.0-247.0 12 11 联苯菊酯 17.88 181.1-166.1 12 181.1-179.1 12 181.1-153.1 8 12 甲氰菊酯 18.07 181.1-152.1 22 265.1-210.1 12 181.1-127.1 28 13 氯氟氰菊酯-1 18.68 208.0-181.0 8 197.0-141.0 12 197.0-161.0 8 14 氯氟氰菊酯-2 18.86 208.0-181.0 8 197.0-141.0 12 197.0-161.0 8 15 氟氯氰菊酯-1 20.21
19、163.1-127.1 6 163.1-91.0 14 226.1-206.1 14 16 氟氯氰菊酯-2 20.31 163.1-127.1 6 163.1-91.0 14 226.1-206.1 14 17 氟氯氰菊酯-3 20.37 163.1-127.1 6 163.1-91.0 14 226.1-206.1 14 18 氟氯氰菊酯-4 20.41 163.1-127.1 6 163.1-91.0 14 226.1-206.1 14 19 氯氰菊酯-1 20.53 163.1-127.1 6 163.1-91.0 14 181.1-152.1 22 20 氯氰菊酯-2 20.64 16
20、3.1-127.1 6 163.1-91.0 14 181.1-152.1 22 21 氯氰菊酯-3 20.70 163.1-127.1 6 163.1-91.0 14 181.1-152.1 22 22 氯氰菊酯-4 20.74 163.1-127.1 6 163.1-91.0 14 181.1-152.1 22 DB37/T 46222023 7 附录C （资料性）15 种农药多反应监测（MRM）色谱图及质谱图 15种农药多反应监测（MRM）色谱图及质谱图见图C.1图C.27。10.511.00.51.01.5(x1,000,000)218.90144.90218.90182.90180.
21、90144.90150160170180050100%145183 图 C.1-六六六 1 1.0 01 1.2 50.51.0(x 1,0 0 0,0 0 0)2 1 8.9 0 1 4 4.9 02 1 8.9 0 1 8 2.9 01 8 0.9 0 1 4 4.9 01 5 01 6 01 7 01 8 0050100%145183图 C.2-六六六 11.5011.750.51.0(x1,000,000)218.90144.90218.90182.90180.90144.90150160170180050100%145183图 C.3-六六六 12.012.52.55.07.5(x1
22、00,000)218.90144.90218.90182.90180.90144.90150160170180050100%145183图 C.4-六六六 12.513.01.02.0(x100,000)212.00145.00285.00212.00212.00172.00150.0175.0200.0050100%172212145图 C.5 乙烯菌核利 DB37/T 46222023 8 13.013.50.250.500.751.00(x100,000)260.00125.10277.00109.10277.00260.00125.0150.0175.0200.0225.0250.00
23、50100%260109125图 C.6 杀螟硫磷 13.514.02.55.0(x100,000)313.90285.90313.90257.90196.90168.90175.0200.0225.0250.0275.0050100%169258286图 C.7 毒死蜱 13.514.01.02.03.0(x100,000)208.10127.00208.10111.00208.10181.00125.0150.0175.0050100%181127111图 C.8 三唑酮 14.515.02.55.07.5(x100,000)283.0068.00285.0096.00283.0096.0
24、070.075.080.085.090.095.0050100%9668图 C.9 腐霉利 17.518.00.51.0(x100,000)316.00247.00314.0056.00314.00245.00100150200250050100%56245图 C.10 异菌脲 17.518.02.55.07.5(x1,000,000)181.10153.10181.10179.10181.10166.10155.0160.0165.0170.0175.0180.0050100%166179153图 C.11 联苯菊酯 DB37/T 46222023 9 18.0018.2518.502.55
25、.0(x100,000)181.10127.10265.10210.10181.10152.10125.0150.0175.0200.0050100%152210127图 C.12 甲氰菊酯 18.519.02.55.07.5(x100,000)197.00161.00197.00141.00208.00181.00140150160170180050100%181141161图 C.13 氯氟氰菊酯 20.0020.252.50.0(x100,000)226.10206.10163.1091.00163.10127.10100.0125.0150.0175.0200.0050100%1279
26、1206图 C.14 氟氯氰菊酯 20.5020.752.55.0(x100,000)181.10152.10163.1091.00163.10127.1090100110120130140150050100%12791152图 C.15 氯氰菊酯DB37/T 46222023 10 附录D （资料性附录）精密度的表示和计算 实验室重复性限（r）数据见表D.1，实验室再现性限（R）数据见表D.2。表 D.1 实验室重复性限（r）数据 名称 含量 mg/kg 重复性限 r 含量 mg/kg 重复性限 r 含量 mg/kg 重复性限 r-六六六 0.01 1.010-3 0.1 4.210-3 1
27、.0 8.710-2-六六六 0.01 1.010-3 0.1 5.910-3 1.0 6.710-2-六六六 0.01 4.810-4 0.1 7.310-3 1.0 7.010-2-六六六 0.01 4.810-4 0.1 7.310-3 1.0 8.110-2 乙烯菌核利 0.01 1.310-3 0.1 1.310-2 1.0 1.110-1 杀螟硫磷 0.01 2.410-3 0.1 7.610-3 1.0 8.710-2 毒死蜱 0.01 9.210-4 0.1 5.910-3 1.0 7.810-2 三唑酮 0.01 1.510-3 0.1 1.410-2 1.0 1.110-1
28、 腐霉利 0.01 7.810-4 0.1 6.210-3 1.0 5.910-2 异菌脲 0.01 2.010-3 0.1 1.110-2 1.0 1.510-1 联苯菊酯 0.01 1.310-3 0.1 1.410-2 1.0 7.610-2 甲氰菊酯 0.01 1.510-3 0.1 5.010-3 1.0 1.510-1 氯氟氰菊酯 0.01 2.710-3 0.1 9.510-3 1.0 1.110-1 氟氯氰菊酯 0.01 2.010-3 0.1 6.410-3 1.0 9.810-2 氯氰菊酯 0.01 1.810-3 0.1 7.310-3 1.0 8.410-2 DB37/
29、T 46222023 11 表 D.2 实验室再现性限（R）数据 名称 含量 mg/kg 再现性限 R 含量 mg/kg 再现性限 R 含量 mg/kg 再现性限 R-六六六 0.01 1.710-3 0.1 9.210-3 1.0 1.110-1-六六六 0.01 1.810-3 0.1 1.010-2 1.0 1.110-1-六六六 0.01 9.810-4 0.1 1.110-2 1.0 1.110-1-六六六 0.01 9.010-4 0.1 1.310-2 1.0 1.110-1 乙烯菌核利 0.01 1.810-3 0.1 2.010-2 1.0 1.310-1 杀螟硫磷 0.01
30、 2.810-3 0.1 1.510-2 1.0 1.610-1 毒死蜱 0.01 1.610-3 0.1 1.010-2 1.0 1.310-1 三唑酮 0.01 2.110-3 0.1 2.310-2 1.0 1.710-1 腐霉利 0.01 1.310-3 0.1 1.110-2 1.0 8.110-2 异菌脲 0.01 2.510-3 0.1 1.710-2 1.0 2.010-1 联苯菊酯 0.01 2.010-3 0.1 2.310-2 1.0 1.210-1 甲氰菊酯 0.01 2.310-3 0.1 8.110-3 1.0 2.110-1 氯氟氰菊酯 0.01 3.410-3 0.1 1.410-2 1.0 1.510-1 氟氯氰菊酯 0.01 2.510-3 0.1 1.110-2 1.0 1.510-1 氯氰菊酯 0.01 2.610-3 0.1 1.110-2 1.0 1.210-1
