1、 ICS 65.020 CCS B 05 22 吉林省地方标准 DB22/T 35032023 大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定规程 Code of practice for outcrossing pollination characteristics of soybean three-line fertile germplasm 2023-09-28 发布2023-11-16 实施吉林省市场监督管理厅 DB22/T 35032023 I 前言 本文件按照 GB/T 1.12020标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本
2、文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：吉林省农业科学院。本文件主要起草人：张井勇、张春宝、赵丽梅、彭宝、闫昊、张伟、林春晶、王鹏年、丁孝羊、孙妍妍、关哲允、李慧、孙寰、刘大壮、姚福山。DB22/T 35032023 1 大豆三系可育种质异交传粉结实性鉴定规程 1 范围 本文件确立了大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定的程序，规定了待测可育种质准备、异交传粉能力测试、异交传粉结实性鉴定分类等阶段的操作指示，描述了记录与档案等追溯方法。本文件适用于在自然条件下北方春大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文
3、中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。DB22/T 22092014 杂交大豆种子 3 术语和定义 DB22/T 22092014界定的以及下列术语和定义适用于本文件。可育种质 soybean fertile germplasm 雌蕊及雄蕊发育正常，雌蕊能接受正常花粉而受精结实，雄蕊能产生有功能正常花粉的普通栽培大豆。始花期 beginning stage of flowering 10%大豆植株开花的日期（月/日）。盛花期 blooming stage of flowe
4、ring 50%大豆植株开花的时间（月/日）。终花期 ending stage of flowering 90%大豆植株开花结束的日期（月/日）。花期 flowering period 从始花期到终花期的累计时间（天）。雄性不育系 male sterility line 雄蕊发育退化或败育，不能产生正常可育的花粉，但雌蕊发育正常，能接受正常花粉而受精结实，并能将雄性不育性遗传给后代的品系。来源：DB22/T 22092014，3.1，有修改 DB22/T 35032023 2 异交传粉结实性 outcrossing characteristics 大豆种质作为父本通过吸引传粉昆虫把花粉传给不育
5、系母本花朵完成受精结实的能力。注：通过调查母本结荚数量，并与异交传粉结实性髙、中、低父本对照进行比较，分析结荚数差异显著性，以此鉴定异交结实性高低。4 鉴定流程 异交传粉结实性鉴定过程见图1。图1 大豆“三系”可育种质异交传粉结实性鉴定流程图 5 待测可育种质准备 整理及编号 对待测种质进行去杂、去劣，登记种子的特征特性，进行统一编号。种植 在田间播种待测种质，行长 3 m，株距 10 cm，行距 65 cm。田间性状调查 出苗期至成熟期进行下列性状调查，调查方法参照中国大豆品种志，大豆品种性状分级标准及术语说明：a)出苗后 7 天内观察并记载下胚轴颜色，开花前观察叶形；b)花期观察花色，调查
6、始花期、盛花期、终花期；c)鼓粒期调查吉林省大豆主要病害抗病性（病毒病、灰斑病、霜霉病、细菌性斑点病、根腐病和菌核病）；d)成熟期调查成熟期、抗倒伏性、结荚习性、茸毛色、性状整齐度。DB22/T 35032023 3 考种 成熟后，在行中间位置不缺苗处连续选取 5 株进行考种，考种项目包括株高、主茎节数、底荚高度、有效分枝数、荚形、荚皮色、单株有效荚数、单株粒数、单株粒重、百粒重、粒形、粒色、种脐色、籽粒光泽等。6 异交传粉能力测试 组合配制 6.1.1 测交母本 6.1.1.1 早-中早熟期母本 选用 RN 型高异交率雄性不育系 JLSCMS34A 作为母本，田间异交率超过 90.0%。6.
7、1.1.2 中熟-中晚熟期母本 选用 RN 型高异交率雄性不育系 JLSCMS82A 作为母本，田间异交率超过 90.0%。6.1.2 测交父本 任一待测可育种质为父本。6.1.3 测交父本对照 6.1.3.1 早熟-中早熟期组对照 分别以髙异交率可育系 JLSCMS34B、中异交率可育系 JLCMS47B、低异交率可育系 JLCMS31B 作为父本异交结实性高、中、低对照。6.1.3.2 中熟-中晚熟期组对照 分别以髙异交率可育系 JLSCMS82B、中异交率可育系 JLCMS9B、低异交率可育系 JLCMS89B 作为父本异交结实性高、中、低对照。测交组合田间种植 6.2.1 试验地选择
8、在吉林省西部地区，选择 1 块3 块试验田，试验地点应满足以下条件：适合大豆生长，年降雨量少于 400 mm，7 月8 月大豆花期，平均降雨天数少于 10 天，无孢囊线虫等土壤传播病虫害、野生传粉昆虫丰富的地区。6.2.2 田间设计 随机区组设计，3 行区，行长 3 m，行距 0.65 m，相邻小区间空置 1 行（0.65 m），3 次重复，相邻区组间空置 1.0 m。小区具体设计见 图 A.1。6.2.3 亲本的播种 6.2.3.1 播种方式：小区内 3 行按父本、母本、父本顺序播种，见图 A.1。6.2.3.2 播种日期：依据待测可育系开花期调整播种日期，使之与母本不育系开花期相遇。DB2
9、2/T 35032023 4 6.2.3.3 种植密度：父母本均按穴播种，穴距 20 cm，每穴播 4 粒种子，出苗后每穴定苗 2 株。6.2.4 田间去杂 6.2.4.1 母本田间去杂 出苗期依据下胚轴颜色（绿色或紫色）去杂，第二个复叶期依据叶形、茸毛色去杂，始花期依据花色、茸毛色去杂，始花期对开放的花朵手检花粉育性，拔出可能混杂的花粉可育植株。6.2.4.2 父本田间去杂 出苗期依据下胚轴颜色去杂，第二个复叶期依据叶形、茸毛色去杂，始花期依据花色、茸毛色去杂。昆虫异交传粉 6.3.1 传粉环境 父母本开花前一周，喷施登记的、对蜂类毒性小的杀虫剂。为避免影响野生昆虫传粉，整个花期，减少农事操
10、作，不喷施杀虫剂。6.3.2 花期昆虫传粉 父母本整个花期，利用野生传粉昆虫作为传粉媒介，完成花粉从父本到母本的异交授粉、结实。杂交荚调查 成熟期在母本行不缺苗中间位置，连续取 5 株记录结荚个数。7 异交传粉结实性鉴定分类 传粉能力评价 用待测种质异交传粉结荚数差异显著性评价异交传粉结实性能力。对 6.4 结荚数数据进行差异显著性分析，按表 B.1 确定父本异交传粉结实性高低。异交传粉结实性分类 按表 B.1 父本异交传粉结实性的高低，与 3 个对照父本比较分为高异交传粉结实性、中高异交传粉结实性、中异交传粉结实性、中低异交传粉结实性、低异交传粉结实性 5 类种质。8 记录与档案 对整个鉴定
11、过程进行及时记录，并存档，档案至少保存 20 年，做到可以追溯。DB22/T 35032023 5 附录A （资料性）田间种植示意图 图 A.1 给出了父母本田间种植示意图。图A.1 田间种植示意图3.0 m 0.65m1 A 11 A 1 1 A 1.1 A 1 1 A 1 行1 行2 行3 1.95m小区-1 2 A 22 A 2 2 A 2.2 A 2 2 A 2 行5 行6 行7 3 A 33 A 3 3 A 3.3 A 3 3 A 3 行9 行10 行11 小区-n 小区-2 区 组 3.0 m 1 A 11 A 1 1 A 1.1 A 1 1 A 1 行1 行2 行3 小区-1 2
12、 A 22 A 2 2 A 2.2 A 2 2 A 2 行5 行6 行7 3 A 33 A 3 3 A 3.3 A 3 3 A 3 行9 行10 行11 小区-n 小区-2 区 组 1.0 m DB22/T 35032023 6 附录B （规范性）待测父本异交结实性分类对照表 表 B.1 给出了待测父本异交结实性高低分类。表B.1 待测父本异交结实性分类对照表 父本异交结实性分类母本结荚数与父本对照比较、差异显著性髙异交父本对照中异交父本对照低异父本对照高异交髙，极显著或显著；相同或低，无显著差异。中高异交低，极显著或显著。髙，极显著或显著。中异交低，极显著或显著。髙、相等或低，无显著差异。髙，极显著或显著；中低异交低，极显著或显著。低，极显著或显著。髙，极显著或显著；低异交低，极显著或显著。低，极显著或显著。髙、相等或低，无显著差异；或低，差异显著或极显著。DB22/T 35032023 7 参考文献 1 邱丽娟等.中国大豆品种志M.吉林：农业出版社，19932004.
