1、ICS 65.020.20 CCS B 05 DB22 吉林省地方标准 DB 22/T 33922022 杨树桑黄菌种 Sanghuangporus vaninii strains from poplar 2022-09-16 发布 2022-10-30 实施吉林省市场监督管理厅 发 布 DB22/T 33922022 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件中的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：延边大学、吉林省通化县白山食用菌
2、研究所、延边特色产业发展中心。本文件主要起草人：刘迪、李喜范、周丽洁、王皓、陈功鑫、于婷婷、尹钰涵、王璐。DB22/T 33922022 1 杨树桑黄菌种 1 范围 本文件规定了杨树桑黄（Sanghuangporus vaninii）菌种的质量要求、试验方法、检验规则、标识、包装、运输及贮存。本文件适用于杨树桑黄菌种生产、流通和使用。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 191-2008 包装储运图示标志 GB/T 47
3、89.28-2013 食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求 GB/T 6543-2008 运输包装用单瓦楞纸箱和双瓦楞纸箱 GB/T 12728-2006 食用菌术语 NY/T 528-2010 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 1846-2010 食用菌菌种检验规程 NY 5099-2002 无公害食品 食用菌栽培基质安全技术要求 3 术语和定义 GB/T 12728-2006 界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1 杨树桑黄 Sanghuangporus vaninii 生长于杨属（Populus）活立木和倒木上桑黄孔菌属的一种大型真菌（瓦尼桑黄（Sanghua
4、ngporus vaninii）。3.2 母种 stock culture 经各种方法选育得到的具有结实性的桑黄菌丝体纯培养物及其继代养物，以玻璃试管为培养容器和使用单位。也称一级种，试管种。来源：GB/T 12728-2006，2.5.7 3.3 原种 pre-culture spawn 由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。也称二级种。来源：GB/T 12728-2006，2.5.8 3.4 栽培种 spawn DB22/T 33922022 2 由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。也称三级种。注：栽培种只能用于代料栽培或转接段木袋。来源：GB/T 12728-2006，2.5.
5、9 4 生物学特性 见附录A。5 菌种制作 见附录B。6 质量要求 6.1 母种 6.1.1 感官 应符合表 1 规定。表1 母种感官要求 项 目 指 标 试管 洁净、完整、无损 棉塞或砂芯硅胶塞 干燥、洁净，松紧适度，满足透气和滤菌要求 斜面长度 试管长度的 2/3 接种块大小（0.3 cm 0.5 cm）（0.3 cm 0.5 cm）菌丝生长量 长满试管斜面培养基 菌丝体特征 浅黄色至黄色，绒毛状 菌丝体表面 均匀、舒展、平整、无角变、色泽一致 菌丝分泌物 无 菌落边缘 整齐 杂菌菌落 无 菌种正面外观 虫（螨）体 无 斜面背面外观 培养基不干缩，颜色均匀，无暗斑、有明显色素 气味 具有桑
6、黄固有气味 杂菌 无 6.1.2 镜检 应符合表 2 的规定。表2 母种要求 DB22/T 33922022 3 项 目 指 标 菌丝生长状态 粗壮、浓密、均匀（接种块除外），无锁状联合 杂菌 无 6.1.3 母种菌丝生长速度 在25 28 条件培养，母种培养基上 12 d14 d 菌丝长满斜面。6.2 原种 6.2.1 感官 应符合表 3 的规定。表3 原种感官要求 项 目 指 标 菌种瓶（袋）洁净、完整、无损 棉塞或无棉塑料盖 干燥、洁净，松紧适度，能满足透气和滤菌要求 培养基上表面距瓶或袋口的距离 5 cm 0.5 cm 接种物大小 0.5 cm 0.5 cm 菌丝生长量 长满菌种瓶（袋
7、）菌丝体特征 先呈白色，再由浅黄色至黄色，生长旺盛 培养物表面菌丝体 生长均匀，无角变，无高温抑制线 培养基及菌丝体 菌丝体紧贴瓶（袋）壁，无明显分离现象 培养物表面分泌物 允许有少量黄色水珠 杂菌菌落 无 虫（螨）体 无 菌种外观 拮抗现象 无 气味 具有桑黄固有气味 6.2.2 镜检 按照 6.1.2 规定。6.2.3 菌丝生长速度 在 25 28 条件培养，木屑培养基上 40 d 45 d 菌丝长满菌种瓶（袋）。6.3 栽培种 6.3.1 感官 表4 栽培种感官要求 DB22/T 33922022 4 项 目 指 标 菌种袋 洁净、完整、无损 棉塞或无棉塑料盖 干燥、洁净，松紧适度，能满
8、足透气和滤菌要求 培养基上表面距袋口的距离 5 cm 0.5 cm 菌丝生长量 长满菌种袋 菌丝体特征 浅黄色至黄色，生长旺盛 培养物表面菌丝体 生长均匀，色泽一致，无角变，无高温抑制线 培养基及菌丝体 菌丝体紧贴袋壁，无分离现象 培养物表面分泌物 允许有少量黄色水珠 杂菌菌落 无 虫（螨）体 无 拮抗现象 无 菌种外观 出现子实体原基的袋比例（%）无 气味 具有桑黄固有气味 6.3.2 镜检 符合 6.1.2 规定。6.3.3 菌丝生长速度 25 28 条件下培养，木屑培养基上 40 d 45 d 菌丝长满菌种袋。7 检验 7.1 检验规则 7.1.1 批次 7.1.1.1 同一种源、同一接
9、种时间和同一培养条件生产的母种为 1 个批次。7.1.1.2 同一种源、同一接种时间、同一制作方法和同一培养条件生产的原种或栽培种为 1 个批次。7.1.2 抽样 7.1.2.1 方法 母种按品种、培养条件、接种时间分批编号，原种和栽培种按菌种来源、制种方法和接种时间分批编号，按批随机抽取被检样品。7.1.2.2 数量 母种、原种、栽培种抽样数量分别为该批菌种量的 10%、5%、1%随机取样，但每批抽样数量不少于 10 支（瓶、袋）。超过 1000 支（瓶、袋）可进行两批抽样。7.1.3 判定规则 检验项目全部符合要求时，为合格菌种。DB22/T 33922022 5 7.2 检验方法 按照
10、NY/T 1846 规定执行，具体见附录 C。8 标识、包装、运输及贮存 8.1 包装 8.1.1 原种和栽培种采用符合 GB/T 6543 规定的瓦楞纸箱或木盒，内部用泡沫板等轻质材料填满。8.1.2 箱（盒）内附产品合格证书和使用说明（包括菌种种性、培养基配方及适用范围等）。8.2 标识 菌种包装储运标志应符合 GB/T 191 的规定:a)每支（瓶、袋）菌种应加贴标签，标明产品名称、品种名称、生产单位、接种时间、执行标准等内容。b)菌种外包装箱加贴包装标签，标明产品名称、品种名称、生产单位、厂址、联系电话、出厂日期、保质期、贮存条件、数量、执行标准等内容。8.3 运输 菌种以在 4 6
11、温度条件下运输为宜，防震、防冻、防杂菌污染、防挤压，其它应符合 NY/T 2798.5 的规定。8.4 贮存 8.4.1 母种在 3 5 条件贮存，贮存期不超过 90 d。8.4.2 原种和栽培种在 4 6 条件下贮存，贮存期不超过 45 d；在温度不超过 25、清洁、通风、干燥（空气相对湿度 45%55%）室内存放时间不超过 15 d。9 记录与档案 9.1 生产者应对各生产环节进行有效记录，建立生产档案并及时归档。9.2 档案主要内容应包括：生产者，产地，菌种、培养料等投入品购买与使用记录等。9.3 档案长期保存，做到可追溯。DB22/T 33922022 6 A A 附 录 A（规范性）
12、杨树桑黄生物学特性 A.1 子实体 子实体多年生，硬木质，无柄，侧生。菌盖扁半球形、马蹄形或不规则形，腹面凸，长径 3 cm 21 cm，短径 2 cm 12 cm，厚 1.5 cm 10 cm。有黄色翻边，底部亦颜色鲜黄。幼时表面有细绒毛，后脱落，有明显的龟裂，无皮壳，有假皮壳，有同心环棱。盖面呈灰褐色、肝褐色至黑色，有光泽；边缘圆钝，龟裂少，有密生的短绒毛，干后脱落，呈咖啡色。菌肉硬，木质，深咖啡色至深黄色，厚 0.5 cm 左右(见图A.1)。菌管多层，层次常不明显，老的菌管有白色菌丝充塞，管口面锈褐色至酱色，管口圆形，每1 mm间4 个 5 个。刚毛顶端尖锐，基部膨大，（10 25）m
13、（5 7）m。图A.1 A.2 菌丝体 菌丝为二体型菌丝系统，具有生殖菌丝和骨架菌丝。气生菌丝多为骨架菌丝，黄色，微螺旋状，直径115m 215m。基内菌丝多为生殖菌丝，透明，多分支，（115 215）m（5 9）m，部分菌丝多短分支，分支端部膨大呈球形；骨架菌丝很少，壁厚，直径 510m 515m。A.3 孢子 孢子椭圆形，厚壁，黄色，光滑，（3.3 4.5）m（2.4 3.5）m。DB22/T 33922022 7 B B 附 录 B（规范性）杨树桑黄菌种制作 B.1 母种制作 B.1.1 母种培养基配方 配方 1：马铃薯 200 g，葡萄糖 20 g，琼脂 20 g，水 1000 mL，
14、pH 5.5 6.5。配方 2：马铃薯 200 g，葡萄糖 20 g，酵母浸膏 2.0 g，硫酸镁 0.3 g，琼脂 20 g，水1000 mL，pH 5.5 6.5。配方 3：马铃薯 200 g，葡萄糖 20 gL1，磷酸二氢钾 1 gL1，维生素 B1 10 mg，琼脂 20 g，水 1000 ml，pH 5.5 6.5。B.1.2 制作方法 试管规格 18 mm180 mm 或 20 mm200 mm，无菌接种后在 25 28 条件培养 12 d 14 d 长满试管斜面，制作过程应符合 NY/T 528 的规定。B.2 原种制作 B.2.1 原种培养基配方 配方1：阔叶木屑 10%，玉米
15、粒 60%，黄豆粒 30%，pH 5.5 6.5。配方2：阔叶木屑 10%，玉米粒 45%，小麦粒 455，pH 5.5 6.5。配方3：阔叶木屑 10%，玉米粒 30%，小麦粒 30%，黄豆粒 30%，pH 5.5 6.5。B.2.2 制作方法 培养基原料质量应符合 NY 5099 的要求。使用 750 mL 容积透明菌种瓶，或 16.5 cm38 cm 聚丙烯袋，在 25 28 条件下培养 40 d 45 d 长满菌种瓶（袋）。B.3 栽培种制作 B.3.1 栽培种配方 配方1：柞木屑 78%，麦麸 20%，石灰粉 1%，石膏粉 1%，pH 6.0 7.0。配方2：柞木屑 78%，麦麸 1
16、5%，玉米粉 5%，石灰粉 1%，石膏粉 1%，pH 6.0 7.0。配方3：柞木屑 78%，麦麸 15%，黄豆粉 2.5%，玉米粉2.5%，石灰粉1%，石膏粉1%，pH 6.0 7.0。B.3.2 制作方法 培养基制作方法同 B.2.2 DB22/T 33922022 8 C C 附 录 C（规范性）杨树桑黄菌种检验方法 C.1 感官检验 应符合表 C.1 的规定。表 C.1 菌种感官要求 项 目 观察方法 试管、菌种瓶（袋）、棉塞或硅胶塞、无棉塑料盖、斜面背面外观肉眼观察 培养基上表面距瓶（袋）口距离、斜面长度、接种量、菌种外观 肉眼观察和测量 杂菌菌落、虫（螨）体 肉眼观察，或用 5 放
17、大镜观察 子实体原基 随机抽取样本 100 瓶（袋），肉眼观察有无原基，并计算 C.2 微生物学检验 C.2.1 菌丝生长状态及锁状联合 用放大倍数不低于 10 40 的光学显微镜对培养物的水浸片进行观察，每一检样观察不少于 50 个视野。C.2.2 细菌检验 将检验样本按无菌操作接种于 GB/T 4789.28-2013 中 4.7 规定的营养琼脂培养基中，28 下培养 1 d 2 d，观察斜面表面是否有细菌菌落生长，必要时用显微镜检查。C.2.3 霉菌检验 将检验样本按无菌操作接种于 PDA 培养基中，25 28 下培养 3 d 4 d，观察是否有菌丝形态菌落或有异味，必要时用水浸片镜检。C.3 菌丝生长速度 C.3.1 母种 PDA 培养基，90 mm 直径培养皿，每培养皿倾倒培养基 30 mL 35 mL，菌龄 10 d 12 d 的菌种为接种物，用灭菌的 5 mm 直径打孔器在菌落周围相同菌龄处打接种物，接种后置于 25 28 黑暗培养，并计算长满平板培养皿生长所需天数。C.3.2 原种和栽培种 在选定的培养基上接种后置于 25 28 黑暗培养，并计算长满瓶（袋）所需天数。_
