1、 ICS 65.020.30 CCS B 40 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 30432023 发酵麸皮生产工艺及饲喂肉羊技术规程 The technical specification for producing fermented wheat bran and feeding sheep 2023-05-11 发布2023-06-11 实施内蒙古自治区市场监督管理局发 布 DB15/T 30432023 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC 19）归口
2、。本文件起草单位：内蒙古农业大学、包头北辰饲料科技股份有限公司、内蒙古赛诺种羊科技有限公司。本文件主要起草人：齐景伟、安晓萍、王园、刘娜、孟子琪、贾阳、陈大勇、宋敏、王瑞芳。DB15/T 30432023 1 发酵麸皮生产工艺及饲喂肉羊技术规程 1 范围 本文件规定了发酵麸皮生产工艺的术语和定义、产品分类、要求、生产技术、评价指标、测定方法、判定规则、标签、包装、运输、贮存和饲喂技术。本文件适用于发酵麸皮生产及其饲喂肉用羊技术。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版
3、本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB/T 6435 饲料中水分的测定 GB/T 8946 塑料编织袋通用技术要求 GB 10648 饲料标签 GB 13078 饲料卫生标准 GB/T 14699.1 饲料 采样 NY/T 119-2021 饲料原料 小麦麸 NY/T 816 肉羊营养需要量 NY/T 1444 微生物饲料添加剂技术通则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。发酵麸皮 fermented wheat bran 以小麦麸皮为发酵主料（70%），豆粕、玉米粉等为辅料，经复合菌粉（包括乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等）和纤维素酶混合固态发酵的产品
4、。肉用羊 meat sheep 以肉用为主要目的，皮、奶、毛（绒）等兼用而饲养的绵羊、山羊。4 要求 原料要求 DB15/T 30432023 2 4.1.1 小麦麸皮：无霉变、无虫蛀、无污染，无杂质，应符合 NY/T 119-2021 要求。4.1.2 小麦麸皮粉碎粒度 80%过 0.85 mm 筛，其他原料过 2.0 mm 筛。4.1.3 所有原料应符合饲料原料目录要求。发酵菌种要求 4.2.1 发酵菌种为复合菌粉，包括乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌等，所用菌种应符合饲料添加剂品种目录、NY/T 1444 和饲料添加剂安全使用规范要求。4.2.2 乳酸菌菌落数108 cfu/g,芽孢杆菌菌落
5、数108 cfu/g,酵母菌活细胞数108 cfu/g。纤维素酶要求 4.3.1 纤维素酶应符合饲料添加剂品种目录（2013）和饲料添加剂安全使用规范要求。4.3.2 纤维素酶酶活10000 U/g。水质要求 应符合GB 5749的规定。发酵要求 4.5.1 选用无破口、无沙眼、无污染、无毒性的带有单向阀的聚乙烯塑料材质的发酵袋。4.5.2 应具备独立的发酵室、原料库和发酵产品存放库。原料库、发酵室和产品存放库应相对集中。发酵室应定期消毒，保持清洁，避免阳光直射，防虫鼠，防雨。5 生产技术 原辅料预处理 原辅料粉碎，灭菌或直接接种。菌粉、纤维素酶的混合 复合菌粉、纤维素酶可直接使用。将菌粉和纤
6、维素酶以及原料按0.2:0.5:1001:2.5:100（w：w：w）比例充分混匀。按照饲料生产企业许可条件，混合均匀度变异系数（CV）不大于7%。过程控制 5.3.1 发酵条件，根据发酵菌粉、纤维素酶的特点，发酵空间温度控制在 28 34。发酵时间 3 d7 d。5.3.2 在发酵过程中应经常检查，注意防鼠，防止发酵袋破损。5.3.3 发酵后的产品经 50 低温烘干，得到发酵麸皮。6 评价指标 感官指标 感官指标应符合表 1 的要求。DB15/T 30432023 3 表1 感官指标 项目 要求 色泽 颜色一致，棕色至棕褐色 气味 有发酵酸香味 杂质 无异物 状态 粉状或颗粒状、无霉变结块，
7、质地松软 理化指标 理化指标应符合表2的要求。表2 理化指标 项目 一级产品 二级产品 水分/%12 可溶性多糖含量 g/kg SP150 80SP150 可溶性蛋白含量 g/kg SCP30 15SCP30 多酚含量 g/kg PP10 5PP10 注：理化指标为干物质基础。卫生指标 应符合 GB 13078 规定。7 测定方法 抽样 按 GB/T 14699.1 执行 感观指标 采用目测、鼻嗅、手捻方法检验。理化指标 7.3.1 水分含量 按GB/T 6435执行。7.3.2 可溶性多糖含量 按照附录 A 的方法进行检验。DB15/T 30432023 4 7.3.3 可溶性蛋白含量 按照
8、附录 B 的方法进行检验。7.3.4 多酚含量 按照附录 C 的方法进行检验。卫生指标 按 GB 13078 规定的方法检验。8 判定规则 产品经检验，所检项目均符合本文件规定，判该批产品为合格品；若检验项目中有一项以上（含一项）不符合本文件规定，则判该批产品为不合格品。若三项指标不在同一级，以最低指标所处的级别为判定标准。9 标签、包装、运输和贮存 标签 按 GB 10648 的规定执行。包装 9.2.1 产品内袋采用聚乙烯材料，外包装采用包装袋或包装箱。包装材料符合 GB/T 8946 要求。9.2.2 包装应密封、无破损。运输 应符合卫生要求的专用运输工具，防止污染。贮存 贮存仓库应清洁
9、、干燥、通风、避免阳光直射，堆放时应离地。防止受潮、虫、鼠及有毒有害物质的污染。保质期 原包装产品在规定的运输、贮存条件下。保质期为 180 天。10 饲喂技术 根据肉羊的体重、不同生理阶段及饲喂方式等，按照 NY/T 816 的规定制定基础日粮配方。发酵麸皮适宜的添加比例为基础日粮的 0.5%1.0%。DB15/T 30432023 5 A A 附录A （规范性）发酵麸皮可溶性多糖含量的测定 A.1 测定方法的计算 见公式A.1。SP=TP-RS.(A.1)式中：SP可溶性多糖含量；TP总糖含量；RS还原糖含量。还原糖：采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定，总糖：采用苯酚-硫酸法测定，以葡萄糖
10、为标准样品。A.2 发酵麸皮水抽提液 取10 g干燥发酵麸皮加入200 m L蒸馏水中，80 水浴30 min，离心（5000 r/min，10 min）取上清即得发酵麸皮水抽提液。A.3 还原糖含量的测定 A.3.1 试剂的配制 3,5-二硝基水杨酸：将6.3 g DNS和262 mL 2M NaOH溶液，加到500 mL含有185 g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5 g 结晶酚和5 g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000 mL，贮于棕色瓶中备用。1 mg/mL葡萄糖标准液：准确称取80 烘至恒重的分析纯葡萄糖100 mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100 mL容量瓶
11、中，用蒸馏水定容至100 mL，混匀，4 冰箱中保存备用。A.3.2 DNS法标准曲线的绘制 取7支20 mL具塞刻度试管编号，分别按照标准曲线绘制所需的量加入浓度为1 mg/mL的葡萄糖标准液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂，使之配成葡萄糖浓度为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mg/L的反应液。将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5 min，取出，冷却至室温，用蒸馏水定容至20 mL，加塞后颠倒混匀，在分光光度计上进行比色。调波长540 nm，用0号管调零点，测出1-6号管的吸光度值。以吸光度值为纵坐标，葡萄糖含量（mg）为横坐标，在坐标纸上绘出标准曲线。A.3.3
12、 还原糖的测定 吸取发酵麸皮水抽提液1 mL按A.3.2的步骤测吸光度值，以标准曲线计算样液中的还原糖含量。A.4 总糖含量的测定 A.4.1 苯酚硫酸法标准曲线的绘制 准确称取恒重葡萄糖10 mg定容至250 mL容量瓶中，分别吸取标准葡萄糖溶液（40g/ml）0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8 mL置于比色管中，分别补水至2.0 mL，再加入6%苯酚1.0 mL后，DB15/T 30432023 6 置冷水中迅速加入浓硫酸5.0 mL，摇匀后于冷水中放置5 min,然后置沸水浴中加热15 min，再置冷水中放置5 min，最后于490 nm波长下测吸光度值。以2
13、.0 mL水按同样显色操作为空白样，横坐标为多糖微克数，纵坐标为吸光度值，制得标准曲线。A.4.2 总糖的测定 量取发酵麸皮水抽提液稀释合适倍数，吸取0.5 ml稀释液蒸馏水补足1.0 ml，加6%苯酚0.5 ml，加浓硫酸2.5 ml摇匀、冷却，室温静置20 min后，测定490 nm处的吸光度值。A.5 可溶性多糖含量的计算 见公式A.2。SP=TP-RS.(A.2)式中：SP可溶性多糖含量；TP总糖含量；RS还原糖含量。DB15/T 30432023 7 B B 附录B （规范性）发酵麸皮可溶性蛋白含量的测定 B.1 方法提要 采用考马斯亮蓝法测定，以牛血清白蛋白溶液为标准。B.2 发酵
14、麸皮水抽提液 取 10 g 干燥发酵麸皮加入 200 m L 蒸馏水中，80 水浴 30 min，离心（5000 r/min，10 min）取上清即得发酵麸皮水抽提液。B.3 可溶性蛋白含量测定 B.3.1 试剂的配制 考马斯亮蓝 G250 溶液配制：准确称取 0.1 g 考马斯亮蓝 G250，溶于 50 mL 95%乙醇，加入 100 mL 85%磷酸，最后用蒸馏水稀释定容到 1000 mL。牛血清蛋白标准液配制：准确称取 50 mg 牛血清蛋白，加入 0.526 g NaCl，溶于少量蒸馏水中，然后稀释定容到 500 mL，配制成浓度为 100 g/mL 的牛血清蛋白标准液。B.3.2 标
15、准曲线的绘制 准确配制不同浓度梯度的牛血清蛋白溶液（浓度控制在 10g/mL100g/mL 范围内）1mL，具体操作：取 100l900 l 牛血清蛋白原液，水补足到 1 mL，浓度相当于所取原液量的十分之一；在不同浓度的 1 mL 牛血清蛋白溶液中，分别加入 5 mL 考马斯亮蓝溶液，混合均匀，置于 25 水浴保温 10 min；以 1 mL 蒸馏水加 5 mL 考马斯亮蓝溶液为空白对照，冷却后测定波长 595 nm 处的吸光度值；以配制的标准蛋白浓度为横坐标，对应吸光值为纵坐标制作标准曲线，并做线性回归分析，求线性方程。B.3.3 目标样品测定 取发酵麸皮水抽提液按标准曲线方法测定 595
16、 nm 处的吸光度值。依据线性方程计算其可溶性蛋白质含量。DB15/T 30432023 8 C C 附录C （规范性）发酵麸皮多酚含量的测定 C.1 方法提要 采用福林酚法测定，以没食子酸为标准品。C.2 发酵麸皮水抽提液 取10 g干燥发酵麸皮加入200 mL 蒸馏水中，80 水浴30 min，离心（5000 r/min，10 min）取上清即得发酵麸皮水抽提液。C.3 多酚含量测定C.3.1 试剂的配制 没食子酸标准储备液配制：准确称取 20 mg（精确至 0.1 mg）没食子酸标准品，用蒸馏水溶解定容至 100 mL，此溶液中没食子酸含量为 200 mg/L，于 4 冰箱中避光保存。N
17、a2CO3溶液（15%）的配制：精确称取 15 g 无水碳酸钠，用水溶解定容至 100 mL。乙醇溶液（60%）配制：量取 600 mL 无水乙醇，用水溶解定容至 1000 mL。C.3.2 标准曲线的绘制 准确吸取没食子酸标准储备液 0.0，0.2，0.4，0.6，1.0，1.5 mL 分别置于 10 mL 容量瓶中，用60%乙醇溶液定容，得到没食子酸工作液。然后分别移取没食子酸工作液 1.0 mL 于 10 mL 比色管中，加入 2.5 mL 福林酚试剂，摇匀，加入 2.5 mL15%Na2CO3溶液，加水定容至刻度，摇匀。在 40 水浴 60 min，静置冷却 20 min。配制成浓度为
18、 0 mg/L、4 mg/L、8 mg/L、12 mg/L、20 mg/L、30 mg/L的标准系列，测定波长 765 nm 处的吸光度值。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，并做线性回归分析，求线性方程。C.3.3 目标样品测定 取发酵麸皮水抽提液按标准曲线方法测定 765 nm 处的吸光度值。依据线性方程计算其多酚含量。DB15/T 30432023 9 参考文献 1 中华人民共和国农业部公告第1773号饲料原料目录（2013）及修改单 2 中华人民共和国农业部公告第2045号饲料添加剂品种目录（2013）及修订单 3 中华人民共和国农业部公告第2625号饲料添加剂安全使用规范 4 中华人民共和国农业部公告第1849号饲料生产企业许可条件
