1、 ICS 65.020.01 CCS B 01 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 28932023 玉米耐盐碱鉴定与评价技术规程 Technical code of practice for Identification and evaluation of maize tolerance to saline-Alkali in tumuan plzhain 2023-02-27 发布2023-03-27 实施内蒙古自治区市场监督管理局发 布 DB15/T 28932023 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件
2、由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC 20）归口。本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业生态与资源保护中心、鄂尔多斯市农牧业生态与资源保护中心。本文件主要起草人：景宇鹏、李跃进、赵举、高日平、王伟妮、红梅、刘红霞、刘宏金、张永虎、乔志刚、武岩、任永峰、张君、伊风艳、尹春艳、刘晓宇、吴雪琨、刘俊梅。DB15/T 28932023 1 玉米耐盐碱鉴定与评价技术规程 1 范围 本文件规定了玉米萌发期、苗期耐盐碱性鉴定、鉴定方法、评价标准等技术规范。本文件适用于玉米品种种质资源的耐盐碱性鉴定。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构
3、成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 4404.1粮食作物种子 第1部分：禾谷类 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。耐盐碱性 saline-alkaline tolerance 作物在其生长发育和产量形成对盐碱胁迫的反应能力。盐害指数 salt injury index of seedlings 在盐碱胁迫条件下，是反映盐害率和盐害程度的指标。盐碱胁迫 saline-alkali stress treatment 植物受NaCl、Na2SO4、NaHCO3、Na2CO3等盐
4、碱离子形成的胁迫，称为盐碱胁迫。4 鉴定方法 胁迫溶液制备 采用Na2SO4、NaCl、NaHCO3、Na2CO3 4种单盐按土壤盐分组成类型配比混合盐碱胁迫溶液；胁迫浓度设置为：0.0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%。采用不同浓度的1/2 Hoagland盐碱营养液胁迫处理，为了保持各处理浓度不变，每天以2倍对应处理液浇灌上次浇灌积余的盐碱离子，以1/2 Hoagland营养液为对照，每个处理4次重复。DB15/T 28932023 2 萌发期耐盐碱性鉴定 4.2.1 种子准备 玉米种子应符合GB 4404.1相关要求。4.2.2 种子处理 挑选籽粒饱满一致的种子用5%次
5、氯酸钠浸泡15 min，用蒸馏水冲洗晾干。4.2.3 胁迫处理 在15 cm培养皿放入发芽纸注入胁迫溶液，待发芽纸吸水饱和时沥去多余溶液，将种子均匀摆放在发芽纸上，每皿10粒种子，每隔1 d用称重法补存水分，保持各处理相对浓度不变；每隔2 d重新更换一次胁迫溶液。4.2.4 发芽调查 将发芽皿放入光照培养箱中，在每24 h连续提供8 h光照条件下，25 恒温培养，分别在第1 d、3 d、5 d和7 d调查发芽种子数。4.2.5 耐盐碱率 nd=nntn 100%(1)式中：nd种子萌发率，1 nd、3 nd、5 nd、7 nd分别为第 1 d、3 d、5 d、7 d的种子萌发率；nn在特定时间
6、内种子萌发数；tn种子总数。A=1.00 1nd+0.75 3nd+0.50 5nd+0.25 7nd(2)式中：A 萌发指数；nd种子萌发率，1 nd、3 nd、5 nd、7 nd分别为第 1 d、3 d、5 d、7 d的种子萌发率。GS=GIG0 100%(3)式中：GS萌发期耐盐碱率；GI萌发指数；G0对照下萌发指数。苗期鉴定 4.3.1 种子要求 玉米种子应符合GB4404.1相关要求。4.3.2 种子处理 DB15/T 28932023 3 挑选出籽粒饱满一致的种子用5%次氯酸钠浸泡15 min消毒后，用蒸馏水冲洗晾干后置于石英砂盆播内。4.3.3 盆栽准备 在苗温室内石英砂培养法，
7、挑选出籽粒饱满一致的种子播于事先准备好的石英砂塑料钵（长宽、高=25 cm20 cm15 cm）中，每盆播种50粒。4.3.4 胁迫处理 采用Na2SO4、NaCl、NaHCO3、Na2CO3 4种单盐按土壤实际盐分组成类型配比混合盐碱胁迫溶液；盐碱胁迫浓度设置5个梯度，分别为：0.0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%。采用不同浓度的1/2 Hoagland盐碱营养液胁迫处理，为了保持各处理浓度不变每天以2 倍对应处理液浇灌上次浇灌残余的盐碱离子，以1/2 Hoagland营养液为对照，每个处理4 次重复。4.3.5 性状调查 胁迫处理18 d后观察苗情表现情况，详见下表1。
8、表1 碱胁迫处理下单株苗情分类 苗情类别 受害症状 0 生长正常，无受害症状 1 生长基本正常，全株几乎无萎蔫或叶缘蜷曲 2 全株 1/4 叶片萎蔫或叶缘蜷曲，叶色变黄 3 全株 1/3 叶片萎蔫或叶缘卷曲，叶尖、叶缘焦枯 4 全株 1/2 叶片萎蔫或叶缘卷曲，叶枯、叶落 5 全株枯死或接近死亡 4.3.6 抗逆指标检测 4.3.6.1 生理指标 可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游离脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指标。4.3.6.2 检测方法 参照植物生理生化实验原理和技术，从植株顶端连续向下取34片叶片。5 耐盐碱性评价 苗期耐盐碱率 SS=()5i5TN 100%(i=0，1，
9、2，5)(4)式中：SS苗期耐盐碱率；STi苗情类别；SNi每类苗情株数；DB15/T 28932023 4 TN检测样本总株数。评价标准 根据耐盐指数对材料萌发期耐盐碱性评价，详见下表2。表2 萌发期耐盐性分级标准 耐盐性 盐害指数 耐盐级别 高耐 70.0%100%1 耐盐 60.1%70%2 中耐 50.1%60%3 敏感 40.1%50%4 高感 0.0%40%5 根据耐盐指数对材料幼苗期耐盐碱性评价，详见下表3。表3 苗期盐碱性分级标准 耐盐性 盐害指数 耐盐级别 高耐 0.0%20%1 耐盐 20.1%40%2 中耐 40.1%60%3 敏感 60.1%80%4 高感 80.1%1
10、00%5 综合评价 5.3.1 因子确定 对种子萌发期发芽率、萌发指数、耐盐碱率和苗期叶片中可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游离脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指标进行主成分分析，确定耐盐碱性评价指标。5.3.2 评价方法 5.3.2.1 隶属度确定 运用隶属函数法对关键特征因子各指标进行标准化处理，然后计算隶属函数值。()=()()(5)反隶属函数值计算公式：()=1()()(6)式中：Xi 各指标测定值；DB15/T 28932023 5 Xmin 各测定指标的最小值；Xmax 各测定指标的最大值。当某一指标与玉米耐盐碱性成正相关时，用公式（1）；当某一指标与玉米耐盐碱性成负相关时，则用公式（2）。5.3.2.2 权重确定 采用标准差系数法，计算标准差系数，归一化后得到每个指标的权重系数。W(j)=P(j)P(j)kj=1 (j=1，2，k)(7)式中：W（j）权重；P（j）经主成分分析所得到各材料第 j 个综合指标的方差贡献率；k 提取的主成分个数。5.3.2.3 综合评级 计算各材料综合评价值，然后从大到小依次进行排序判断耐盐碱能力。Z(j)=Z(j)kj=1 W(j)(j=1，2，k)(8)式中：Z（j）综合评价值，第j个综合指标的得分值与权重乘积的和。
