1、 ICS 65.020.20 CCS B 05 14 山西省地方标准 DB14/T 16132023 代替 DB14/T 1613-2018 大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程 2023-11-13 发布2024-02-13 实施山西省市场监督管理局发 布 DB14/T 16132023 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 病圃建设.1 5 鉴定前准备.1 6 鉴定方法.2 7 鉴定圃管理.2 8 调查.3 9 抗性评价.3 附录 A（资料性）调查用表.4 附录 B（资料性）生理小种鉴别.5 DB14/T 16132023 II 前言 本文件按
2、照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件代替DB14/T 16132018大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程，与DB14/T 16122018相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：增加了病圃建设（见第3章）；增加了鉴定圃管理（见第3章）；增加了调查人及记载人的信息（见附录A）。本文件由山西省农业农村厅提出、组织实施和监督检查。本文件由山西省市场监督管理局对标准的组织实施情况进行监督检查。本文件由山西省农业标准化技术委员会（SXS/TC19）归口。本文件起草单位：山西农业大学。本文件主要起草人：陈妍、张海平、聂萌恩。2018
3、年首次发布为 DB14/T 16132018；本次为第一次修订。DB14/T 16132023 1 大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了大豆种质资源抗胞囊线虫鉴定技术的病圃建设、鉴定试验准备、鉴定方法、鉴定圃管理和抗性评价标准。本文件适用于大豆种质资源抗胞囊线虫抗性鉴定和抗性评价。2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。胞囊线虫病 指大豆胞囊线虫病，是由病原物大豆胞囊线虫（Heterodera Glycines Ichinode）感染引起的土传病害，其主要症状为叶片变黄，发育不良，植株矮小，开花少，结荚少甚至不结荚。大豆
4、根系根瘤数明显减少，且不发达。在感病初期，根系附着白色、黄褐色小颗粒，后期根系开始腐烂，导致地上部分枯死。生理小种 简称为“小种”，在形态上相似而在培养性状、生理、生化、病理（致病力）或其他特性上有差异的生物型或生物群型。鉴别寄主 用于鉴别病原物生理小种（菌系、毒系）的抗病性不同的一套寄主植物品种。4 病圃建设 立地条件 病圃所在地块应地势平整，形状规正，肥力均匀，排灌方便，不受阴庇，具有人工灌溉措施。面积 根据鉴定规模确定病圃面积，但不应小于100 m2。5 鉴定前准备 DB14/T 16132023 2 塑钵制备 将厚度0.1 mm的透气性塑料膜裁为宽26 cm，高22.5 cm的小块，用
5、订书机将其制成宽11 cm，高22 cm的袋状塑料钵。接种病土制备 根据试验需要在病圃取适量的病土（大豆胞囊线虫密度30个胞囊/100 g风干土），将病土与无菌20目细沙以2:1的比例充分混匀后制备成试验病土。6 鉴定方法 田间病圃法 6.1.1 选择大豆胞囊线虫密度30 个胞囊/100 g 风干土的病圃，当气温大于 20 时播种。6.1.2 穴播，行距 50 cm，株距 13 cm。每份材料播种 10 穴。6.1.3 每穴留苗 1 株。6.1.4 每 30 个材料设 1 个感病对照。6.1.5 同时种植 1 套生理小种鉴别材料。病土塑钵法 6.2.1 将试验病土装入塑钵至距钵口 1 cm 处
6、。6.2.2 将装好土的塑钵依次装入塑料箱中，放于温室。6.2.3 将塑料钵中土壤浇透，待钵内土壤干湿程度适宜后开始播种。每钵留苗 3 粒种子，表面覆盖病土 1 cm。6.2.4 出苗后每钵留苗 2 株，每个品种 3 个重复。6.2.5 每 30 个材料设 1 个感病对照。6.2.6 同时种植 1 套生理小种鉴别材料，随机摆放。6.2.7 温室温度保持在 25 30，含水量控制在 50%60%。人工接种鉴定法 6.3.1 试验在温室中进行。将待鉴定的种质在育苗盘中育苗，同时播种小种鉴别材料。6.3.2 将出苗后子叶展开、根系发达、健壮一致的植株移栽到装有灭菌沙土的塑钵中，每钵 2 株，三次重复
7、。6.3.3 每 30 个材料设 1 个感病对照。6.3.4 提前在病土中种植感病品种，在胞囊显盛期，将根系上的胞囊冲洗下来，制备成浓度为 1 000 个/ml 的卵悬浮液。6.3.5 待鉴定材料在移栽后 3 天接种卵悬浮液 2 mL。6.3.6 温室温度保持在 25 30，含水量控制在 50%60%。7 鉴定圃管理播种后，应及时补充水分，保持土壤湿润。及时中耕除草，鉴定期间不使用杀菌剂和除草剂。DB14/T 16132023 3 8 调查 待感病对照白色胞囊突破根系表皮时即可调查。将待调查植株根系上的土轻轻抖掉或用水冲洗干净、晾干，统计其根上的胞囊数。鉴定调查表格见附录A。9 抗性评价 生理
8、小种鉴别 大豆胞囊线虫生理小种划分具体见附录B。鉴定有效性评价 感病对照品种Lee根系上的胞囊数应在30.0个以上，抗性级别达高感，视为该次鉴定有效。抗性级别划分 根据根系平均胞囊数进行抗性级别划分，划分依据见表1。表1 大豆对胞囊线虫的抗性级别划分依据抗性级别抗性类别胞囊数与症状0免疫（I）（根系胞囊数为 0，植株生长正常）1高抗（HR）（0根系胞囊数3.0，植株正常生长）3抗（R）（3.0根系胞囊数10.0，植株生长基本正常或部分矮黄）7感（S）（10.0根系胞囊数30.0，植株矮小，叶片发黄、结实少）9高感（HS）（根系胞囊数30.0，植株不结实，干枯死亡）重复鉴定 当鉴定结果为抗或高抗
9、时（抗性级别划分依据见表1），应进行重复鉴定确定其抗性。若重复鉴定结果有差异，以抗性级别低的结果为准。确定抗性后，将抗性品种移栽。DB14/T 16132023 4 附录A （资料性）调查用表 A.1 大豆抗胞囊线虫鉴定调查表 大豆抗胞囊线虫鉴定调查表见表A.1。表A.1 年大豆抗胞囊线虫鉴定调查汇总表 播种日期：鉴定编号 品种名称 出苗日期 调查日期 胞囊数 平均胞囊数 病情指数 抗性评价 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 调查人：记载人：DB14/T 16132023 5 附录B （资料性）生理小种鉴别 B.1 大豆胞囊线虫生理小种的鉴别 B.1.1 一种为传统
10、的Riggs鉴别模式（大豆胞囊线虫生理小种Riggs鉴别模式见表B.1），共4份材料，分别为Pickett、Peking、PI88788、PI90763，根据寄主根系平均胞囊指数来确定大豆胞囊线虫小种。B.1.2 一种为HG分类系统（大豆胞囊线虫生理小种HG鉴别模式见表B.2），辅助鉴别线虫是否变异，共7份材料，分别为PI548402、PI88788、PI90763、PI437654、PI209332、PI89772、PI548316。根据寄主根系平均胞囊数计算胞囊指数（FI），按照表B.1和表B.2划分标准确定生理小种。FI=（供试品种胞囊数/感病对照品种胞囊数）100%(B.1)表B.1 大豆胞囊线虫生理小种 Riggs 鉴别模式 鉴别寄主小种类型12345678910111213141516Pickett-+-+-+-+-Peking-+-+-+-+-+PI88788+-+-+-+-+PI90763-+-+-+-+-+注：“+”表示FI大于等于10%；“-”表示FI小于10%。表B.2 大豆胞囊线虫生理小种 HG 鉴别模式 鉴别寄主HG 分型01234567PickettPeking+PI88788+PI90763+PI437654+PI209332+PI89772+PI548316+注：“+”表示大于等于感病对照品种Lee寄生胞囊量的10%。
