1、 ICS 65.080 CCS B 10 12 天津市地方标准 DB12/T 12702023 土壤中碱解氮的测定 Determination of soil alkali-hydrolyzed nitrogen2023-11-07 发布2023-12-08 实施天津市市场监督管理委员会发 布 DB12/T 12702023 I 前言 本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由天津市农业农村委员会提出并归口。本文件起草单位：天津市农业发展服务中心，天津市农业科学院。本文件主要起草人：于美荣，陈秋生，张鑫，辛勍，殷萍，张强，孙瑞，
2、欧阳小雪，王震，程禹。DB12/T 12702023 1 土壤中碱解氮的测定 1 范围 本文件规定了凯氏定氮法测定土壤中碱解氮的方法原理、试剂和材料、仪器和设备、分析步骤、结果计算及允许偏差。本文件适用于天津市区域内各类土壤碱解氮含量的测定。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 601 化学试剂 标准滴定溶液的制备GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。4 原理 土
3、壤碱解氮包括无机态氮（铵态氮、硝态氮）及易水解的有机态氮（氨基酸、酰铵和易水解蛋白质），在碱性条件下水解，转化为铵态氮，蒸馏出的氨由硼酸溶液定量吸收后以盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量计算碱解氮含量。5 试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯。实验用水应符合GB/T 6682中三级水的要求。5.1 氢氧化钠溶液，1.0mol/L：称取40.0g氢氧化钠，加水溶解，冷却，稀释至1000mL。5.2 定氮混合指示剂：分别称取0.066 g甲基红和0.099g 溴甲酚绿于玛瑙研钵中，加人少量95%乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95%乙醇至100 mL。5.3 硼酸溶液，20 g/L
4、：称取硼酸20.00 g，用热水（约60）溶解，稀释至950mL，冷却后，加入混合指示剂20mL，混匀，并用稀盐酸或稀碱调节至紫红色（pH约5），加水稀释至1L混匀备用。此试剂宜现配。5.4 盐酸标准滴定溶液c(HC1)=0.0100mol/L：配制与标定见GB/T 601规定。5.5 锌一硫酸亚铁粉还原剂：将50.0 g硫酸亚铁磨细，通过0.25 mm孔径筛，与10.0 g锌粉混匀，贮于DB12/T 12702023 2 棕色瓶中。或使用市售定氮催化片。5.6 液体石蜡。6 仪器与设备 6.1 土壤筛：2 mm孔径筛。6.2 分析天平：感量为0.01g。6.3 半微量酸式滴定管：5mL。6.
5、4 半自动定氮仪或全自动定氮仪。7 分析步骤 7.1 试样制备 7.1.1 风干 在风干室将土样放置于盛样器皿中，除去土壤中混杂的动植物残体等，摊成 23cm 的薄层，置于阴凉处自然风干，严禁暴晒或烘烤。风干过程中，适时翻动，用木锤敲碎（或用两个木铲搓碎）土样，进一步清理土壤中的动植物残体等杂物。翻动过程要注意防止样品间交叉污染。对于黏性土壤，在土壤样品半干时，戴一次性丁腈或聚乙烯等无污染材质手套将大块土捏碎，以免完全干后结成硬块。7.1.2 研磨和过筛 将风干样品置于有机玻璃板（或硬质木板或无色聚乙烯薄板）上，用木锤轻轻敲碎，再用木棍或有机玻璃棒再次压碎，细小已断的植物须根采用静电吸附的方法
6、清除。将检测样品手工研磨后，过孔径2mm 尼龙筛，去除 2mm 以上的石砾，大于 2mm 的土团要反复研磨、过筛，直至全部通过。研磨过程中不可随意遗弃样品，应及时填写样品制备原始记录。7.2 测定 7.2.1 半自动定氮仪法 称取过 2mm 孔径筛的试样 5g，精确至 0.01g，置于 250mL 消化管中，加入 1.25g 锌-硫酸亚铁粉还原剂，加入 50mL 水、40mL 氢氧化钠溶液，最后加液体石蜡 1mL，将消化管置于凯氏定氮仪上。另准备 250mL 三角瓶，加 15mL 硼酸吸收液，加 5-6 滴定氮混合指示剂，置于定氮仪冷凝管下端，管口插入硼酸溶液中，以免吸收不完全。进行蒸馏，蒸馏
7、时间 3.5 分钟，停止蒸馏。用 0.0100mol/L 盐酸标准溶液滴定馏出液，由蓝绿色刚变为紫红色且 30 秒不褪色时为终点。记录所用盐酸标准溶液的体积（mL）。同时做空白试验，空白测定所用酸标准溶液的体积不得超多 0.4mL。7.2.2 全自动定氮仪法 DB12/T 12702023 3 称取过 2mm 孔径筛的试样 5g，精确至 0.01g，置于 250mL 消化管中，加入 1.25g 锌-硫酸亚铁粉还原剂，液体石蜡 1mL。将消化管置于凯氏定氮仪上（设定水、氢氧化钠溶液、硼酸-指示剂溶液加液体积分别为 50mL、40mL、15mL）实现自动加液、蒸馏，滴定。同时先做空白试验，仪器自动扣除空白值，自动计算和记录样品含氮量。8 结果计算 半自动定氮仪法测定土壤中碱解氮含量的计算见公式（1）。mcVVw1000140（1）式中：w碱解氮含量，mg/kg；V滴定土样消耗标准酸体积，mL。V0滴定空白消耗标准酸体积，mL。c酸标准溶液浓度，mol/L。m风干土样质量，g。14氮的摩尔质量，g/mol。1000每g换算成每kg质量。取两次平行测定结果的算术平均值作为测定结果，结果保留整数位。9 允许偏差 表 1 允许偏差 测定值（mg/kg）允许差值200相对差值5%200-50绝对偏差 10mg/kg2.5mg/kg50绝对偏差2.5mg/kg
