1、ICS 65.020.20 B 05 运城市地方标准 DB 1408/T 025 2022 香菇栽培 种生产技 术规程 2022-03-30 发布 2022-05-01 实施 运城 市 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB 1408/T 025 2022 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 术 语和 定义.1 3.1 固体 培养 基.1 4 生 产流 程.1 5 生 产要 求.1 5.1 场地 选择.1 5.2 环境 要求.2 5.3 厂区 布局 与厂 房设 置.2 5.4 生产 设备 与设 施.2 5.5 人员 要求.2 6 生 产原 料与 菌种.2 6
2、.1 生产 原料.2 6.2 菌种 与种 源确 定.2 7 生 产技 术与 操作 规程.2 7.1 培养 基配 制与 分装.2 7.2 培养 基灭 菌.3 7.3 接种.3 7.4 培养.4 7.5 成品 检验.4 7.6 入库 管理.4 附录A（规 范性 附录）生产条 件与 设备.5 DB 1408/T 025 2022 II 前 言 本文件 按 照 GB/T 1.1-2020 标 准化 工作 导则 第 1 部分：标准 化文 件的 结构 和起草 规则 的 规定起草。本文件 由运 城市 农业 农村 局 提出 并监 督实 施。本文件 由运 城市 农业 标准 化技术 委员 会归 口。本文件 起草
3、单位：山 西农 业大学 山西 功能 食品 研究 院、运 城市 农业 农村 局。本文件 主要 起草 人：张程、凌亮、屈 会玲、曹 新武、郭尚、杨 杰、王晓 华、梁盼。DB 1408/T 025 2022 1 香 菇栽培 种生产技 术规程 1 范围 本 文件 规定 了香 菇栽 培种（固体 菌种）生 产相 关 的 术语 和 定义、生 产流 程、生产要求、生产 原料 与菌种、生产 技术 与 操 作规 程 的要 求。本 文件 适用 于 运 城市 范围 内 香菇 栽培 种（固体 菌种）的生 产。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款
4、。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件。不注 日期 的引 用文件，其 最新 版本（包 括所有 的修 改单）适用于本文件。GB/T 12728 食 用菌 术语 GB 19170 香菇 菌种 NY/T 528 食用 菌菌 种生 产技术 规程 NY/T 1731 食 用菌 菌种 良 好作业 规范 NY/T 1742 食 用菌 菌种 通 用技术 要求 NY/T 1846 食 用菌 菌种 检 验规程 3 术语 和 定义 GB/T 12728 界 定的 以及 下 列术语 和定 义适 用于 本文件。3.1 固体培 养基 以富含 木质 纤维 素或 淀粉 类天然 物质 为主
5、 要原 料（运城地 区一般 以 果木 屑为 主要原 料），添加 适当数量的 有机 氮源 和无 机盐 类原料，具 有一 定水 分含 量的培 养基 质。4 生产流 程 生 产 场 地选 择 厂 区 布局与 厂 房 设置 设备 与 设施 生 产 原料 与 菌种 培养基 制 备 分装灭菌 冷却 接种 培养（检 验）成品 检验 入 库管 理。5 生产要 求 5.1 场地选 择 应 选择 地势 高、干燥、通 风良好、排 水畅 通、交通 方便的 场地。DB 1408/T 025 2022 2 5.2 环境要 求 环境要 求 应 符合NY/T 1731 的 要求。5.3 厂区布 局 与 厂房 设置 厂区布 局
6、 与 厂房 设置 按附录 表A.1执行。5.4 生产设 备与 设施 生产设 备与 设施 按附录 表A.2 执行。5.5 人员要求 应配备 能 掌 握菌 种生 产相 关知识 技能 的专 业技 术员 及检验 人员。6 生产原 料与 菌种 6.1 生产原 料 生产原 料应 符合 NY/T 528 的 要求。原料 主要 是 农作 物谷粒 及农 副产 品的 废弃 下脚料，如 木屑（果木屑）、麸皮、棉籽 壳等，还有 其他 生物 制剂 如酵 母粉、蛋白 胨等。另外 还 应添加 一些 化学 药品 如硫 酸镁、磷 酸二 氢钾 等。6.2 菌种与 种源 确定 6.2.1 菌种的 引种 来源 应确 实可 靠，母 种
7、的 感官 要求 和生 物学要 求应 符 合GB/T 19170 的 要求。6.2.2 栽培种 生产 单位 每年 在种 源进入 扩大 生产 程序 之前，应进 行菌 种质 量和 种性 的 检验，检 验项 目应 包括 纯度、活 力、菌 丝 长势的 一致 性、菌丝 生长 速度 和 菌落 外观 等，并做 出菇试 验，验证 种性。种 源出菇试 验方 法及 种源 质量 要求应 符 合 NY/T 1742 的 要求。7 生产技 术与 操作 规程 7.1 培养基 配制 与分 装 7.1.1 母种培 养基 一般 应 使用 马铃 薯葡 萄糖 琼脂培 养基(PDA)，并严格控制pH 值。7.1.2 原种与 栽培 种培
8、 养基 应选用 以下 的培 养基 配方：a)阔叶硬 杂木 屑（果木 屑）78%，麸 皮20%，蔗糖1%，石膏 1%，含水 量60%1%，pH 6.5；b)阔叶硬 杂木 屑（果木 屑）70%，棉 籽壳 13%，麦麸 15%，蔗糖 1%，石膏 1%，含水 量 60%1%，pH 6.5；c)阔叶硬 杂木 屑（果木 屑）63%，棉 籽壳 20%，麸皮 15%，蔗糖 1%，石膏 1%，含水 量 60%1%，pH 6.5。7.1.3 培养基 分装 DB 1408/T 025 2022 3 a)母种培 养基 的分 装量 应掌 握在试 管长 度的 四分 之一 至五分 之一 处，灭 菌后 摆放 成的斜 面顶 端
9、 距试管口 应不少于 50mm；b)原种和 栽培 种培 养基 应装 至距瓶(袋)口不 少 于50mm，灭菌 后 应 不少 于45mm。7.2 培养基 灭菌 7.2.1 灭菌 香菇的 菌种 培养 基灭 菌应 使用高 压灭 菌：a)母种的 培养 基配 制分 装后 应立即 灭菌，母 种培 养基 灭菌 0.11MPa 0.12MPa，30min；b)原种和栽 培种培 养基 配制 后应在 4h 内 灭菌，原种 和栽培种 培养基 灭菌 0.14MPa 0.15MPa，2.5h。7.2.2 冷却 冷却室 在使 用前 应进 行清 洁和消 毒处 理。将灭 菌后 的 栽培种 放置 在冷 却室 中自 然冷却 到料
10、温降 至适宜温度。7.2.3 灭菌效 果检 查 灭菌后 应进 行灭 菌效 果检 查。a)母种培 养基 可直 接放 入 28 恒温 培养；b)原种和 栽培 种培 养基 随机 抽取 1%作 为样 品，选取 其 中的基 质颗 粒接 入无 菌 PDA 培 养基 中，置于28 恒 温培 养；c)恒温培 养48h 后 应检 查有 无微生 物长 出，并判 断培 养基灭 菌是 否合 格。7.3 接种 7.3.1 接种室(箱)的清 洁灭 菌处 理 7.3.1.1 接种室 应为 接种 专用，室 内要求 清洁 无菌。在 搬入 接种物 和被 接种 物前 应先 进行卫 生清 洁处理，再 进行 消毒 处理。7.3.1.2
11、 接种室（箱）药 物 消 毒处 理可选 用甲 醛和 高锰 酸钾 混合熏 蒸（每 平 方米 一 般 应使 用 40%甲醛10mL、高锰 酸 钾8mL，时间 应不低于 20min）。喷 雾灭菌 处理 可 用 0.1%氯化汞 或 5%苯酚 溶液。7.3.1.3 接种超 净台（接 种箱）应 先用 75%酒 精进 行表 面擦 拭消毒，再 用紫 外灯 照射 预净 20min。7.3.2 接种物 的灭 菌 接种用 培养基 可以 先放入 培养室 与培养 室一 起消毒 灭菌。菌种放 入超 净台时，应用75%酒 精进行 表面擦拭 消毒 灭菌。7.3.3 接种操 作 在无菌 室(箱)或 净化 工作 台上 应 严格
12、按无 菌操 作接 种。a)接种的 品种 应单 品种 操作，中间 不得 更换 品种。应 一个品 种操 作完 成后，再 换另一 品种；b)母种、原种、栽 培种 的接 种都应 从开 口处 一点 接种，不应 打孔 多点 接种；c)接种完 成后 应及 时贴 好标 签，按 照品 质管 理要 求，记录品 种、接种 时间 等必 要信息。7.3.4 接种室(箱)后处 理 DB 1408/T 025 2022 4 接种室 每次 使用 后，应及 时清理 清洁、排 除废 气、清除废 物，台面 要用75%酒 精擦拭 消毒。7.4 培养 7.4.1 培养室 灭菌 处理 使用培 养室 时，应提 前 2d 进行灭 菌处 理：
13、a)首先应 采用 无扬 尘方 法进行 清洁；b)清洁后 应进 行药 物消 毒，药物消 毒处 理 应 参照 7.3.1 的方 法进 行；c)药物消 毒处 理后 再采 用紫 外线照 射灭 菌（1m3配 置紫 外线灯 应不 低 于 1.5W）。7.4.2 培养条 件 a)温度：241；b)空气相 对湿 度：75%以下；c)通风良 好 处 避光 培养。7.4.3 培养期 的检 查 各级菌 种培 养期 间应 定期 检查。及时 拣出 不合 格菌 种，并 做好 检查 记录。a)母种 每48h 检查 一次；b)原种和 栽培 种长 满袋 前每 周检 查 2 次，长 满袋 以后 每周检 查 1 次。7.5 成品检
14、 验 培养结 束后 应对 成品 进行 抽样检 验，成品 检验 应符 合NY/T 1846 的 要求。7.6 入库管 理 入库之 前应 确认 产品 正常，并做 好入 库登 记。a)母种 应 在5 1 贮存，保藏期 应不超 出 90d；b)原种应在 5 1 贮存，保藏期 应不超 出 40d。短 期储藏 可在 温 度 15 1、清 洁、通风、干燥(相对 湿度60%65%)、避光 的室 内存 放，但不 应超 出20d；c)栽培种 应尽 快使 用。在温 度 15 1、清洁、通风、干燥(相 对湿 度60%65%)、避 光的 室内存放 应 不超 出 20d。在 5 1 下可 贮存90d。DB 1408/T
15、025 2022 5 A A 附 录 A（规范 性附 录）生产条 件与 设备 表A.1 厂区布 局与 厂房 设置 区域 厂房名称 功能 设置要点 无菌区域 灭菌室 培养基灭菌 水电、安全设备齐全、通风排气良好、进出原料便利。冷却室 灭菌后培养基的冷却 室内清洁、防尘、散热通气良好。接种室 菌种生产的接种 有较好的防尘性能、内壁及屋顶光滑、便于清洗和消毒、通风换气良好。培养室 接种后的菌种培养 有较好的防尘性能、内壁及屋顶光滑、便于清洗和消毒、通风换气良好。温度、湿度、通 风调节良好、防虫防鼠防杂菌。储存库 菌种产品存放 要求与培养同样的设置条件。质量检验室 菌种质量检验 水电等条件具备、有利于
16、安装各种检验试验用设备和设施。栽培试验场 菌种质量检验 水电等条件具备、有利于安装各种检验试验用设备和设施。一般区域 原料晾晒场 晾晒培养基原材料 地面平整、光照好、空旷、远离火源。原料储存库 储存生产原料等 防雨、防潮、防火、防虫、防鼠、防杂菌。配料分装室 原料配制、调整、分装及灭菌准备 水电方便、空间充分。办公区域 质量管理室 技术与生产室 销售及服务室 行政管理室 表A.2 菌种生 产常 用设 备与 设施 设备设施名称 功能用途 设备实施名称 功能用途 大型磅秤 原料配制 恒温箱、培养架、培养室 培养 原料搅拌机 原料搅匀 超净工作台、接种箱 接种 装瓶机、装袋机 分装培养基 消毒设备 消毒各环节 高压灭菌锅、常压灭菌器 培养基灭菌 冷库、冰箱 保存菌种 检验室用品 常用器械 显微镜 检验用 天平 配料用 湿度调节设备、空调设施 培养室等 叉车、传送带 运输搬移 _
