1、 ICS 65.020.30 CCS B41 DB51 四川省地方标准 DB51/T 2898 2022 规模场猪 伪狂犬病 净化技术 规范 The technical specification of porcine pseudorabies virus eradication for intensive pig farm 2022-05-20 发布 2022-07-01 实施 四川省市场监督管理局 发 布 DB51/T 2898 2022 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 术 语和 定义、缩 略语.1 术语 和定 义.1 3.1 缩略 语.2 3.2
2、4 净 化条 件.2 净化 准备 工作.2 4.1 净化 流程.2 4.2 5 净 化标 准.5 免疫 净化 判定 标准.5 5.1 非免 疫净 化判 定标 准.5 5.2 附录A（规 范性）规模 场猪伪 狂犬 病净 化维 持阶 段常规 监测 方案.6 附录B（规 范性）规模 场猪伪 狂犬 病免 疫净 化标 准抽检 要求.7 附录C（规 范性）规模 场猪伪 狂犬 病非 免疫 净化 标准抽 检要 求.8 DB51/T 2898 2022 II 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标准 化工 作导则 第1 部分：标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定起草。本文件 的某 些内 容可
3、 能涉 及专利。本 文件 的发 布机 构不承 担识 别专 利的 责任。本文件 由四 川省 农业 农村 厅 提出、归口 并 解释。本文件 起草 单位：四 川省 动物疫 病预 防控 制中 心。本文件 主要起 草人：梁璐 琪、陈 斌、李 春、张毅、陈冬、裴超信、蔡 冬冬、陈弟诗、李淳、邓 飞、邢坤、王正 义。本文件 首次 发布。DB51/T 2898 2022 1 规 模场猪 伪狂犬病 净化技 术规范 1 范围 本文件 规定 了规 模场 猪伪 狂犬病 净化 的术 语和 定义、净化 条件、净 化标 准。本文件 适用 于 规 模场 猪伪 狂犬病 的净 化。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通
4、 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件；不注 日期 的引 用文件，其 最新 版本（包 括所有 的修 改单）适 用 于 本文件。GB/T 18641-2018 伪 狂犬 病诊断 方法 3 术语和 定义、缩 略语 术语和 定义 3.1 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1.1 猪伪狂 犬病 porcine pseudorabies 由 属于 疱疹 病 毒科、疱疹 病毒甲 亚科、暂定 为水痘 病毒属 的猪伪 狂犬 病毒（PRV）引 起的 猪 的急 性传染病。注：猪感染PRV 具有 年龄 差
5、异性，仔猪 更 容易 感 染，出 现共 济失 调、抽 搐等 特 征性 的 神经 症状，突 然 死亡；成年 猪主要出现呼吸窘迫或 亚临床症状；怀孕母猪 出现胎儿吸收、木乃伊胎、流产等。3.1.2 猪伪狂 犬病 净化 porcine pseudorabies virus eradication 通过监 测、检 验检 疫、隔 离、淘汰 等一 系列 综合措 施,在特 定区 域或场 所消 灭、清除PRV,达到并 维持猪个体 无 感染 和不 发病 的状态。3.1.3 猪伪狂 犬病 毒 gB 抗体 antibody of PRV gB PRV 囊 膜蛋 白gB 诱导 机体 产生的 中和 抗体。注：囊膜蛋白g
6、B是猪伪狂犬病毒中 的一种保守蛋白，并且是病毒感染过程中的必需成分，主要参与病毒与宿主细胞膜的融合过程。3.1.4 猪伪狂 犬病 毒 gE 抗体 antibody of PRV gE PRV 囊 膜蛋 白gE 诱导 机体 产 生 的中 和抗 体。注：囊膜蛋白gE是猪伪狂犬病毒中 的一 种非必需糖蛋白，gE 缺失 后不会影响病毒在宿主细胞上的增殖。3.1.5 猪伪狂 犬病 稳定 场 intensive pig farm with stable infective level of PRV 有感染 野毒 的猪，但 在体 内免疫 抗体 和场 内其 他综 合防控 措施 的共 同作 用下，不表 现或 只
7、有 部 分 猪表现轻 微临 床症 状的 猪场。DB51/T 2898 2022 2 注：临床症状包括高烧、厌食、精神萎靡、消化不良、口水增多、呕吐、战栗、共济失调、咳嗽、打喷嚏、呼吸困难，怀孕母猪出现 胎儿吸收、木乃伊胎、流产等。3.1.6 猪伪狂 犬病 发病 场 intensive pig farm with onset of PRV 有感染 野毒 的猪，并 表现 出明显 临床 症状 的猪 场。3.1.7 猪伪狂 犬病 受威 胁场 intensive pig farm threaten by PRV 5公里 以内 有其 他场点 暴发猪伪狂 犬病 的稳定 场 或PRV 进入猪 伪狂 犬病 非免
8、 疫净 化的猪 场。缩略语 3.2 下列 缩 略语 适用 于本 文件。PRV：猪伪 狂犬 病毒（porcine pseudorabies virus）ELISA：酶 联免 疫吸 附测 定（enzyme linked immunosorbent assay）4 净化条 件 净化 准 备工 作 4.1 4.1.1 建立科 学、高效 的鉴 别诊 断方法 净化前 应使用PRV 的gE 基 因缺失 疫苗 和gE-ELISA 抗 体检测 试剂 盒，对猪 群采 血 进行gE 抗 体监 测，建立科 学、高效 的鉴 别诊 断方法，掌 握猪 群 中 PRV 野毒感 染情 况。4.1.2 人、财、物、意识 和 支持
9、 有效推 进净 化工 作 应 具备 广泛的 净化 共识，并 在人 力、财 力、物力 等方 面进 行协调 和支 持。4.1.3 区域性 净化 部署 伪狂犬 病具 有传 播迅 速 的 特点，适 合区 域净 化模 式，制定相 应的 净化 路线，采 取检测、消毒、淘汰、无害化 处理 等综 合性 防控 措施，取得 良好 的 净 化效 果。净化流程 4.2 4.2.1 净化前 期准 备 4.2.1.1 本底调查 按猪群 规模的5%10%采 样，进行 病原和 抗体 检测。按照GB/T 18641-2018 中第5章规定 的 酶联 免疫吸附实 验 方法 检测gE 抗体 和gB抗体，按照GB/T 18641-2
10、018 中第7 章规 定的 聚 合 酶链式 反应方法 检测PRV核酸，确定 猪群 的野 毒感 染情况 和免 疫抗 体水 平。4.2.1.2 免疫程序 4.2.1.2.1 疫苗要 求 所用疫 苗均为PRV 的gE 基 因 缺失 疫 苗。4.2.1.2.2 猪伪狂 犬病 稳定 场 DB51/T 2898 2022 3 参考 下 列免 疫程 序 对 猪伪 狂犬病 稳定 场进行 免疫：仔猪及 生长 猪群：0 日龄 3 日 龄活 疫苗 滴鼻 免疫1 次，45 日龄、70 日龄 75 日龄、100 日龄120 日龄 各 免疫1 次，共免 疫 4 次。后备猪：配 种 前 8 周免 1 次，配 种 前 4 周
11、 加强 免疫。种猪：一年 普 免 4 次。4.2.1.2.3 猪伪狂 犬病 发病 场或 猪伪 狂犬病 受威 胁 场 参考 下 列免 疫程 序 对 猪伪 狂犬病 发病 场或 猪伪 狂犬 病受威 胁 场 进行 紧急 免疫：种猪：紧急 接种 灭活 疫苗2 次，每次 间隔4 周6 周；配种 前免 疫一 次，产 前1 个月 加强 免 疫1 次。发病猪 群 或 受威 胁猪 群：紧急接 种活 疫 苗 2 次，每 次间 隔 4 周。4.2.2 免疫控 制 4.2.2.1 生物安 全措施 4.2.2.1.1 引种要 求 应 从取 得 种畜 禽生 产经 营许可 证 和 动物 防疫 条件合 格证，且猪 伪狂 犬病阴
12、 性的 种猪 场 引 种(包括 精液)，引 进的 种猪 必须是gE抗 体阴 性。4.2.2.1.2 隔离检 疫 种猪入 场后 应隔离 饲养2 个月，gE抗 体检 测 为 阴性 再 与 本场 猪混群。混 群后 每年 检测3次，gE 抗体 和gB抗体。4.2.2.1.3 生产养 殖模 式 采用 自 繁自 养、全进 全出、早期 断奶、多 点式 饲养 等 模式 进行 养殖。4.2.2.1.4 人员和 车辆 管理 应 根据 养殖 规模、生 产条 件和方 式、场区 布局，规 范 饲养 人员、技 术人 员、管理人 员的 活动，执行从业人 员健康 年检 和进场 消毒制度，场 外人 员 严禁 入场。应在猪 场门
13、口、生 产区入 口设 置 雾化 消毒 室，雾化消 毒 用1:1000 复合 醛 溶液（10%戊 二醛+10%苯 扎 溴铵）；室内 设置 洗 手池，洗手 消毒用0.1%新洁 尔灭溶液；地 面放 置消 毒垫，浸润2%4%氢 氧化 钠溶 液。人 员出 入应 在 雾 化消 毒 室内 消毒3分 钟。运载车辆 应 按照 下列 流程，做好 清洗、消 毒、烘 干：专业泡 沫清 洁剂 喷洒 全车 浸泡 10 分 钟20 分钟，高压冲 洗清 除所 有有 机物 和泡沫 清洁 剂；泡沫消 毒液 喷洒 全车，应 覆盖 车 身、车顶、车 头、车轮、车底 盘，挂泡 10 分 钟以上；5070 烘干 车辆。4.2.2.1.5
14、 其他动 物、虫媒 控制 场内不得 饲 养其 他动 物，严防 流 浪犬 猫入 场，并定 期开展 灭鼠、灭 虫工 作。4.2.2.1.6 消毒 选用优 质低 毒低 残留 的消 毒剂，定期 对猪 舍、栏圈、用具 等可 能被 污染 的场 所、设 施、设备 进 行 严格消毒。DB51/T 2898 2022 4 4.2.2.1.7 临床异 常 猪 的处理 病猪应 隔离，死 猪、死胎 及相关 物品 应 无 害化 处理。4.2.2.1.8 饲料管 理 按各阶 段猪 的营 养需 要，提供均 衡、适宜 的饲 料。在饲料 生产、储 存、运 输 和使用 过程 中，防止 饲料发霉、变 质、受污 染。4.2.2.2
15、免疫与 监测 参考4.2.1.2 的免 疫程序，应每半 年按猪 群规模 的5%8%采样，检测gE 抗体和gB 抗体。当猪 群的gE抗体阳 性率下 降 至20%左 右 后，将gE 抗体 阳性 猪与阴 性猪分群 饲养。优先 淘汰 胎次高 的gE抗 体阳 性猪，做好gE 抗体 阴性 猪群 的隔 离 和监 测。4.2.3 免疫净 化 4.2.3.1 普检 对 全场 猪 逐 头进 行gE 抗体 检测，淘汰 全部gE抗体 阳 性猪，建立 阴性 猪群。4.2.3.2 第一次 复检 普检 后 的一 个月，按 阴性 猪群规模 的10%抽样，复 查gE抗体。4.2.3.3 第二次 复检 若 复检 无gE 抗体 阳
16、性 猪，则三个 月后 再次 按阴性 猪 群 规模 的10%抽 样，复查gE 抗体。4.2.3.4 过渡期 的监测 若 步骤4.2.3.2 和步 骤4.2.3.3 中 连续 的两 次复 查 均 为 阴性，则 在 六个 月和 十二 个 月后分 别 按 阴性 猪群规模10%抽样，检测gE 抗体 和gB 抗体，对 猪群 中免 疫抗体 水平 和野 毒感 染情 况进行 监测。4.2.3.5 监测阳 性的 处理 步骤4.2.3.2 步骤4.2.3.4 中任 意步 骤检出gE 抗体 阳 性，则 按照 以下 程序 处理：若阳性 率 在 1%5%，则 重 新对全 群逐 一进 行 gE 抗 体 检测，剔除 全部 阳
17、性 猪；若阳性 率低 于 1%，则 重复 步骤 4.2.3.2 步骤4.2.3.4。4.2.4 净化维 持 4.2.4.1 常规监 测方 案 步骤4.2.3.2 步 骤4.2.3.4 均未检出gE抗体 阳 性的猪 场，可 转入净 化维 持阶段。按照 附录A 的方 案开展常 规监 测。4.2.4.2 设立哨 兵 猪 在猪舍 放置gB抗 体阴 性猪，观 察是 否感 染和 发病，检 测 其gE 抗体 情况，判断 哨兵 猪所 在猪 群 是 否感染野毒。4.2.4.3 临床异 常猪 的监 测 DB51/T 2898 2022 5 应每天 进行 临床 巡查，凡 出现疑似 猪 伪狂 犬病 临床 症状的 猪
18、应 采样 检测。血液 样品 检测gE抗体，组织样品 检测PRV 核酸。4.2.4.4 风险评 估 针对引 种（包 括精 液）、人员、车辆等 有可 能传入PRV 的途 径，应 每个 季度开展 一次 风险评 估，根据评估 结果，提 出针 对性 的防控 措施，进 一步 提高 猪场的 生物 安全 水平。5 净化标 准 免疫净化 判定 标准 5.1 同时满 足下 列要 求，视为 达到免疫 净化：生产母 猪和 后备 种猪 按照 附录B 的要求 抽 检，gB 抗 体阳性 率大 于 90%；种公猪、生 产母 猪和 后备 种猪 按 照附 录 B 的要求 抽 检，gE 抗 体检 测均 为阴 性；所有存 栏生 猪
19、连 续两 年以 上无临 床病 例。非免疫 净化 判定 标准 5.2 同时满 足下 列要 求，视为 达到 非 免疫 净化：种公猪、生 产母 猪和 后备 种猪 按 照附 录 C 的要求 抽检，gB 抗 体检 测均 为阴 性；种公猪、生 产母 猪和 后备 种猪 按 照附 录 C 的要求 抽 检，gE 抗 体检 测均 为阴 性；所有存 栏生 猪 停 止免 疫两 年以上，且 连续 两年 以上 无临床 病例。DB51/T 2898 2022 6 A A 附录A（规范 性）规模场 猪伪 狂犬 病 净 化维 持阶段 常规 监测 方案 表A.1 为规 模场 猪伪 狂犬 病 净化维 持阶 段的 常规 监测 方案。
20、表A.1 规模场 猪伪 狂犬 病净 化维 持阶段 常规 监测 方案 猪的类别 抽样比例 监测频率 监测项目 监测结果处理 公猪 全群逐一检测 每年检测3 次 gE抗体 和gB 抗体检测 1）gE抗体阳性的建议转商品猪 2）gB抗体不合格的，加强免疫，连续两次加强免疫不合格的，转商品猪 后备 猪（公猪/母猪）全群逐一检测 1）4 月龄（引种）2）8 月龄（配种前20 天）生产母猪 全群的15%20%抽样 每年检测3 次 1）gE抗体结果用于分析猪群是否感染野毒 2）gB抗体结果用于本场免疫方案的调整或 免疫效果评估（免疫前检测就是抗体水平监测，免疫后检测就是免疫效果评估）育肥猪 30 头/次，每
21、次随机抽10栏，每栏随机抽3 头 77日龄、90 日龄、120 日龄 分别检测一次 仔猪 20头/次30头/次，每次随机抽10窝，每窝随机抽2 头3 头仔猪 35 日龄、49 日龄、63 日龄 分别检测一次 gB 抗体检测 监测仔猪体内猪伪狂犬病毒的母源抗体水平的消长规律，用于判断仔猪群的最佳免疫时间 DB51/T 2898 2022 7 B B 附录B（规范 性）规模场 猪伪 狂犬 病免 疫净化 标准 抽检 要求 表B.1 为规 模场 猪伪 狂犬 病 净化达 到免 疫净化 标 准的 抽检要 求。表B.1 规模场 猪伪 狂犬 病免 疫净化 标准 抽检 要求 检测项目 检测方法 抽样种群 抽样数
22、量 样本类型 抗体检测 gE-ELISA 种公猪 生产公猪存栏50 头以下，100%采样；生产公猪存栏50头以上，按照证明无疫的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：3%）血清 生产母猪 后备种猪 按照证明无疫的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：3%）；随机抽样，覆盖不 同猪群 血清 抗体检测 gB-ELISA 生产母猪 按照预估流行率的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：90%，可接受误差：10%）血清 后备种猪 按照预估流行率的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：90%，可接受误差：10%）血清 DB51/T 2898 2022 8 C C 附录C（规范 性）规模场 猪伪 狂犬 病 非 免疫 净化标 准抽 检要 求 表C.1 为规 模场 猪伪 狂犬 病 净化达 到 非 免疫 净化 标准 的抽检 要求。表C.1 规模猪 场伪 狂犬 病 非 免疫 净化标 准抽 检要 求 检测项目 检测方法 抽样种群 抽样数量 样本类型 抗体检测 gE-ELISA 和 gB-ELISA 种公猪 生产公猪存栏50头以下，100%采样；生产公猪存栏50头以上，按照证明无疫的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：3%）血清 生产母猪 后备种猪 按照证明无疫的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：3%）；随机抽样，覆盖不 同猪群 血清
