1、I C S 6 5.1 2 0C C S B 2 5DB50重 庆 市 地 方 标 准D B 5 0/T 1 2 5 1 2 0 2 2杂 交 狼 尾 草 青 贮 质 量 评 定2 0 2 2-0 6-0 1 发 布 2 0 2 2-0 9-0 1 实 施重 庆 市 市 场 监 督 管 理 局发 布D B 5 0/T 1 2 5 1 2 0 2 2I前 言本 文 件 按 照 G B/T 1.1-2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分：标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定 起草。请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利。本
2、文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的 责 任。本 文 件 由 重 庆 市 农 业 农 村 委 员 会 提 出 并 归 口。本 文 件 起 草 单 位：重 庆 市 畜 牧 科 学 院、西 南 民 族 大 学。本 文 件 主 要 起 草 人：何 玮、冉 启 凡、陈 静、关 皓、范 彦、徐 远 东、朱 瑞 芬、向 白 菊、何 德 超。D B 5 0/T 1 2 5 1 2 0 2 21杂 交 狼 尾 草 青 贮 质 量 评 定1 范 围本 文 件 规 定 了 杂 交 狼 尾 草（P e n n i s e t u m a m e r i c a n u m P.p u r p
3、u r e u m）青 贮 质 量 评 定 的 术 语 和 定义、技 术 要 求、检 测 方 法。本 文 件 适 用 于 杂 交 狼 尾 草 青 贮 饲 料 的 质 量 评 定。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款。其 中，注 日 期 的 引 用 文 件，仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件；不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改 单）适 用 于 本文 件。G B/T 6 4 3 2 饲 料 中 粗 蛋 白 的 测 定
4、 凯 氏 定 氮 法G B/T 6 4 3 5 饲 料 中 水 分 的 测 定G B 1 0 4 6 8 水 果 和 蔬 菜 产 品 p H 值 的 测 定 方 法G B 1 3 0 7 8 饲 料 卫 生 标 准N Y/T 2 1 2 9 饲 草 产 品 抽 样 技 术 规 程3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件。3.1杂 交 狼 尾 草 h y b r i d p e n n i s e t u m为 禾 本 科 狼 尾 草 属 暖 季 型 牧 草，由 二 倍 体 美 洲 狼 尾 草（P e n n i s e t u m a m e r i c a n
5、 u m）与 四 倍 体 象 草（P.p u r p u r e u m）杂 交 育 成 的 三 倍 体 种 间 杂 交 种。适 于 鲜 喂 牛 羊 或 青 贮 利 用。3.2青 贮 饲 料 s i l a g e将 新 鲜 的 青 绿 饲 料 切 短 后，在 密 闭 缺 氧 的 条 件 下 经 微 生 物 发 酵，制 成 的 一 种 具 有 特 殊 芳 香 气 味、营养 丰 富 的 多 汁 饲 料。来 源：D B 5 0/T 6 6 9，3.1 3.3水 分 m o i s t u r e按 照 G B/T 6 4 3 5 规 定 的 步 骤 干 燥 样 品 所 损 失 物 质（水 分 和
6、其 他 挥 发 性 物 质）的 质 量。来 源：G B/T 6 4 3 5，3.1 4 技 术 要 求D B 5 0/T 1 2 5 1 2 0 2 224.1 感 官 评 定杂 交 狼 尾 草 青 贮 饲 料 感 官 分 级 指 标 包 括 色 泽、质 地、气 味、含 水 量，按 照 表 1 的 指 标 进 行 判 定。以 4 项 指 标 单 项 得 分 之 和 作 为 分 级 依 据，总 分 1 0 0 分。青 贮 饲 料 感 官 评 分 1 0 0 分 8 1 分 为 优 良，8 0分 6 1 分 为 中 等，6 0 分 4 1 分 为 较 差，4 0 分 0 分 为 差。表 1 杂 交
7、 狼 尾 草 青 贮 饲 料 感 官 评 分色泽（2 5 分）气味（3 0 分）质地（2 0 分）含水量（2 5 分）项目 得分 项目 得分 项目 得分 项目 得分黄 绿 色，有 光泽1 9 2 5 酸香味，舒适 2 3 3 0松 散 软，茎、叶分辨明显1 6 2 0抓握，松开后样品缓慢散开，手掌上有少量水分附着1 7 2 5黄色，有光泽 1 3 1 8醋 酸 味 强，酸香味弱1 4 2 2柔 软，茎、叶分辨明显8 1 5抓握，松开后样品成球状，可形成水滴9 1 6黄色，黄褐色，色泽暗1 1 2 刺鼻酸味 1 1 3茎、叶 略 能 分辨1 7抓握，松开后样品成球状，水分从指间流出1 8黑褐色
8、0酸 臭 腐 败 霉 烂味0茎、叶 黏 连 成团或干燥粗硬0样品黏连成团，滴水04.2 发 酵 评 定杂 交 狼 尾 草 青 贮 饲 料 发 酵 分 级 指 标 包 括 p H 值、氨 态 氮/总 氮、乳 酸/总 酸、乙 酸/总 酸、丁 酸/总 酸，按 照 表 2 的 指 标 设 定 进 行 判 定。以 5 项 指 标 单 项 得 分 之 和 作 为 分 级 依 据，总 分 1 0 0 分。评 分 1 0 0 分 8 1 分 为 优 良，8 0 分 6 1 分 为 中 等，6 0 分 4 1 分 为 较 差，4 0 分 0 分 为 差。表 2 杂 交 狼 尾 草 青 贮 饲 料 发 酵 评 分
9、p H 值（2 0 分）氨态氮/总氮%（3 0 分）乳酸/总酸%（2 5 分）乙酸/总酸%（1 5 分）丁酸/总酸%（1 0 分）项目 得分 项目 得分 项目 得分 项目 得分 项目 得分3.7 1 7 2 0 8 2 4 3 0 6 0 2 1 2 5 2 0 1 2 1 5 2 8 1 03.8 4.2 1 3 1 6 9 1 0 2 3 1 8 5 0 5 9 1 6 2 0 2 1 3 0 8 1 1 3 1 0 5 74.3 4.4 9 1 2 1 1 1 2 1 2 1 7 4 0 4 9 1 1 1 5 3 1 4 0 5 7 1 1 2 0 3 44.5 4.6 5 8 1 3
10、 1 4 6 1 1 3 0 3 9 6 1 0 4 1 5 0 2 4 2 1 3 0 0 24.7 0 4 1 5 0 5 2 9 0 5 5 1 0 1 3 1-1 0-14.2 发 酵 原 料 要 求杂 交 狼 尾 草 青 贮 饲 料 原 料 应 符 合 G B 1 3 0 7 8 的 规 定。D B 5 0/T 1 2 5 1 2 0 2 235 检 测 方 法5.1 取 样 方 法按 照 N Y/T 2 1 2 9 规 定 执 行。5.2 试 样 制 备称 取 2 0 g 鲜 样，加 入 1 8 0 m L 超 纯 水，4 浸 提 2 4 h，取 5 0 m L 浸 提 液，8 0
11、 0 0 r p m，4 离 心1 5 m i n，取 上 清 液 2 m l，1 2 0 0 0 r p m，4 离 心 2 m i n，取 上 清 液 用 0.2 2 m 微 孔 滤 膜 过 滤，即 为 待测 样 品。5.3 感 官 评 定 方 法称 取 5 0 0 g 青 贮 饲 料 样 品，均 匀 放 置 在 不 透 明 的 白 色 瓷 盘 中，并 保 持 室 内 空 气 的 流 通，通 过 嗅 觉和 视 觉 等 感 官 器 官 进 行 辨 别。5.4 p H 值 测 定按 照 G B/T 1 0 4 6 8 规 定 执 行。5.5 水 分 测 定按 照 G B/T 6 4 3 5 规
12、 定 执 行。5.6 有 机 酸 含 量 测 定液 相 色 谱 法 测 定 青 贮 饲 料 中 有 机 酸 含 量，参 见 附 录 A。5.7 氨 态 氮/总 氮 含 量 测 定苯 酚-次 氯 酸 盐 显 色 法 测 定 青 贮 饲 料 中 氨 态 氮/总 氮 含 量，参 见 附 录 B。D B 5 0/T 1 2 5 1 2 0 2 24A A附 录 A（资 料 性）液 相 色 谱 法 测 定 青 贮 饲 料 中 有 机 酸 含 量A.1 试 剂 和 材 料乳 酸、乙 酸、丙 酸、丁 酸 标 准 品，超 纯 水，磷 酸 为 分 析 纯。A.2 仪 器 与 设 备高 效 液 相 色 谱 仪，电
13、 子 天 平，超 声 波 振 荡 器。A.3 试 剂 配 制A.3.1 混 合 标 准 溶 液 配 制分 别 准 确 称 取 4 种 物 质 的 标 准 品，用 去 离 子 水 溶 解 并 定 容 于 容 量 瓶 中，配 制 成 混 合 母 液，然 后 准 确量 取 0.6 2 5 m L、1.2 5 m L、2.5 m L、5 m L 标 准 混 合 母 液 用 超 纯 水 定 容 于 1 0 m L 容 量 瓶 中，即 为 梯 度 混合 标 准 溶 液，4 冰 箱 中 保 存 备 用。A.3.2 流 动 相 配 制准 确 称 取 磷 酸 3.0 0 0 0 g，用 去 超 纯 水 溶 解，
14、调 节 p H 值 至 2.7，并 定 容 于 1 0 0 0 m L 的 容 量 瓶 中，然 后 用 0.2 2 m 水 相 滤 膜 过 滤，超 声 波 振 荡 器 中 脱 气 3 0 m i n 后 使 用。A.4 测 定 程 序A.4.1 色 谱 条 件色 谱 柱；流 动 相：0.3%磷 酸；流 速：1.0 m L/m i n；柱 温：5 0；进 样 量：5 L；检 测 器 波 长：2 1 0 n m。A.4.2 色 谱 测 定取 A.3.1 中 配 制 的 梯 度 混 合 标 准 溶 液 进 样，以 峰 面 积（响 应 值，Y，A U）为 纵 坐 标，以 标 准 品 浓 度（X，m g
15、/m L）为 横 坐 标，绘 制 4 种 标 准 品 的 标 准 曲 线，得 到 保 留 时 间、线 性 范 围、回 归 方 程、相 关 系 数、检 出 限 信 息。A.4.3 空 白 试 验将 5.2 制 备 的 青 贮 饲 料 试 样 浸 提 液，采 用 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 乳 酸、乙 酸、丙 酸、丁 酸 含 量，总酸 为 乳 酸、乙 酸、丙 酸、丁 酸 之 和。A.4.4 结 果 计 算用 色 谱 工 作 站 计 算 试 样 浸 提 液 被 测 物 的 含 量，计 算 中 扣 除 空 白 值。再 通 过 换 算 浸 提 液 制 备 过 程 中 对应 的 样 品 量，获 得
16、 乳 酸、乙 酸、丙 酸、丁 酸 在 样 品 中 的 比 例。有 机 酸 的 含 量 按 式（1）进 行 计 算：11 1 1 1180 CWmD m N（1）D B 5 0/T 1 2 5 1 2 0 2 25式 中：W-乳 酸、乙 酸、丙 酸、丁 酸 含 量，单 位 为 m g/g；C1-样 液 的 浓 度（m g/g)，根 据 标 曲 算 得；N1-稀 释 倍 数；D1-样 品 的 水 分 含 量（%）；m1-制 取 青 贮 液 时 样 品 重 量（g）。D B 5 0/T 1 2 5 1 2 0 2 26附 录 B（资 料 性）氨 态 氮/总 氮 含 量 的 测 定B.1 试 剂B.1
17、.1 亚 硝 基 铁 氰 化 钠（N a2 F e(C N)5 N O 2 H2O)。B.1.2 结 晶 苯 酚（C6H5O)。B.1.3 氢 氧 化 钠（N a O H)。B.1.4 磷 酸 氢 二 钠（N a2H P O 6.7 H2O)。B.1.5 次 氯 酸 钠（N a C l O)：含 活 性 氯 5.2 5%。B.1.6 氯 化 铵(N H4C l)。B.1.7 苯 酚 显 色 剂：将 取 0.1 g 亚 硝 基 铁 氰 化 钠、2 0 g 结 晶 苯 酚，蒸 馏 水 定 容 至 2 L，溶 液 放 入 棕 色瓶 中 2 1 0 避 光 保 存，保 质 期 6 个 月。B.1.8
18、次 氯 酸 钠 试 剂：称 取 1 0 g 氢 氧 化 钠、7 5.7 g 磷 酸 氢 二 钠 溶 于 蒸 馏 水 中。待 冷 却 后，加 1 0 0 m L次 氯 酸 钠 混 匀 后 定 容 于 2 L，溶 液 使 用 滤 纸 过 滤 后 2 1 0 避 光 保 存，保 质 期 6 个 月。B.1.9 标 准 铵 贮 备 液：准 确 称 取 1.0 0 4 5 g 氯 化 铵 溶 于 适 量 蒸 馏 水 中，用 稀 盐 酸 调 节 p H 值 至 2.0，用蒸 馏 水 定 容 至 1 L，得 到 含 氨 浓 度 为 3 2 m g/d L 的 标 准 储 备 液。B.2 仪 器 与 设 备试
19、 验 用 仪 器 包 括：分 光 光 度 计；水 浴 锅；移 液 枪：1 0 L，1 m L，5 m L。B.3 测 定 步 骤B.3.1 标 准 曲 线 的 建 立用 蒸 馏 水 稀 释 氨 标 准 储 备 溶 液，得 到 氨 态 氮 浓 度 分 别 为：3 2 m g/d L、1 6 m g/d L、8 m g/d L、4 m g/d L、2 m g/d L、1 m g/d L 和 0 m g/d L 的 系 列 标 准 液。取 系 列 标 准 工 作 液 各 4 0 m L 至 贴 好 标 签 的 试 管 中，依 次加 入 2.5 m L 苯 酚 显 色 液、2 m L 次 氯 酸 盐
20、试 剂。注 意 加 入 每 种 试 剂 后 均 要 混 匀。将 样 品 放 置 3 7 水 浴中 发 色 3 0 m i n。冷 却 后，使 用 分 光 光 度 计 在 波 长 5 5 0 n m 测 定 吸 光 度。以 吸 光 度 和 标 准 液 浓 度 为 坐 标轴 建 立 标 准 曲 线。B.3.2 样 品 的 检 测向 每 支 试 管 中 加 入 4 0 L 正 文 中 所 述 制 备 青 贮 浸 出 液，按 检 测 步 骤 测 定 样 本 液 的 吸 光 度。B.3.3 水 分 测 定按 G B/T 6 4 3 5 的 规 定 执 行。B.3.4 总 氮 的 检 测按 G B/T 6
21、 4 3 2 的 规 定 执 行。B.3.5 结 果 计 算D B 5 0/T 1 2 5 1 2 0 2 27氨 态 氮 的 含 量 按 式（2）进 行 计 算：1 11 1 1 1180 CWM mD m N（2）式 中：W-氨 态 氮 含 量，单 位 为 占 总 氮 的 质 量 百 分 比（总 氮%）；C1-样 液 的 浓 度（m g/d L)；N1-稀 释 倍 数；D1-样 品 的 水 分 含 量（%）；M1-试 样 的 总 氮 含 量（鲜 样%）；m1-制 取 青 贮 液 时 样 品 重 量（g）。_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
