1、ICS 65.150 CCS B 52 DB32 江苏省 地 方 标 准 DB32/T 4207 2022 黑斑蛙繁 育技术规 范 Technical specifications for artificial breeding for Black-spotted Frog 2022-01-28 发布 2022-02-28 实施 江 苏 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB32/T 4207 2022 I 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第1 部 分：标 准化 文件 的结 构和 起草规 则 的规 定起草。本文件 由江 苏省 农业 农村 厅提出。本文件
2、 由江 苏省 渔业 产业 长江珍 稀鱼 类标 准化 技术 委员会 归口。本文件 起草 单位：江苏 中 洋集团 股份 有限 公司、南 通龙洋 水产 有限 公司、中 国水产 科学 研究 院淡 水渔业研 究中 心、海安 市水 产技术 推广 站。本文件 主要 起草 人：沈 李 元、涂翰 卿、徐 钢春、朱 新 鹏、贾晓 颖、邱 燕、黄丽 萍、李 全杰、朱芮 雅、支宇。DB32/T 4207 2022 1 黑 斑蛙繁 育技术规 范 1 范围 本文件 规定 了黑 斑蛙黑 斑 侧褶蛙（Pelophylax nigromaculata）繁殖 的术 语和 定义、环境 与设 施、人工繁 殖、蝌蚪 培育、幼 蛙 培育
3、、疾 病防 控。本 文件 适用 于黑 斑蛙 的繁 育。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期的 版本 适 用 于本 文件；不注 日期 的引 用文 件，其 最新 版本（包 括所 有 的修改 单）适用 于本 文 件。GB 11607 渔业 水质 标准 GB 13078 饲料 卫生 标准 NY 884 生 物有 机肥 农业农 村部 水 产养 殖用 药明白 纸 2020 年 1 号 农业农 村部 水 产养 殖用 药明白 纸 2020 年 2 号 3 术语和 定义 下列术 语与 定义 适
4、用 于本 文件。3.1 种蛙 broodstock 性成熟，用 于繁 殖后 代的 蛙。3.2 蝌蚪 tadpole 蛙受精 卵孵 化后 至完 全变 态前的 幼体。3.3 幼蛙 froglet 蝌蚪变 态发 育，尾部 消失，长成 四脚 蛙。3.4 变态期 metamorphosis stage 蝌蚪从 开始 长出 后肢、前肢，到 尾突 完全 消失 变成 幼蛙的 阶段。DB32/T 4207 2022 2 4 环境与 设施 4.1 环境条 件 繁育场 应距离 居民 区500 m 以上，四周安 静，水源充 足；进 排水方 便；水源水 质应符 合GB 11607 规定。4.2 繁育设 施 4.2.1
5、阶梯式 直沟 型蛙 池 种蛙池、蝌 蚪池、幼 蛙池 均采用 阶梯 式直 沟型 蛙池，宜长20 m、宽10 m，四周池 埂高0.2 m0.3 m，顶部宽1.0 m。蛙池 侧边 至 中央依 次为 第一 阶梯、第 二阶梯 及中 间水 沟。第一 阶梯为 斜坡 式，宽1.5 m，坡度10 为 宜；第二 阶梯 宽2 m，深0.15 m；中间 水 沟宽3 m，深0.3 m0.5 m。四周 设置 垂直 地面 的防逃网或 防逃 膜，地上 高度0.7 m 以上，地下 深度0.3 m。进水 口设 置在 蛙池 一端 中间高 于池 边0.3 m0.4 m处，排 水口 设置在 进水 口 对应的 另一端 蛙池 底部中 间，
6、进 水管直 径宜0.2 m 0.3 m，管口 加滤 袋，网目40 目 60 目为 宜；排水 管直径 宜0.2 m 0.4 m，管口加 防逃 网。4.2.2 孵化池 宜 为水 泥池,面积6 m212 m2、池深0.7 m 0.8 m、水深0.4 m 0.6 m，池 底设 置坡度：进 水端 高，排水端 低，坡 度15 20。进 水管口 高于 池顶部0.1 m，直径宜0.1 m 0.2 m，管口 加滤 袋，网 目60目80 目为 宜；排水 管直 径宜0.2 m 0.3 m，管口 加防逃 网。4.2.3 孵化网 箱 由木条 和绢布 构成，以长0.4 m0.5 m、宽0.3 m0.4 m、高0.05 m
7、0.10m 为 宜，绢 布以80 目为宜，可 根据 孵化 池的 大小 调整孵 化网 箱 的 大小 和数 量。4.2.4 食台 由木条 和网 片组 成，以长1.0 m1.2 m、宽0.4 m0.5 m为 宜，网片 规格40 目 为 宜，放置 种 蛙池 和幼蛙池 两侧 的第 一阶 梯。4.2.5 防鸟设 施 应架设 距离 地面2.2 m 2.5 m 的 防鸟 网。5 人工繁殖 5.1 种蛙选 择 经人工 选育 的健 康 种 蛙，雄蛙2 龄3 龄，体重50 g 以上；雌蛙2龄 4龄，体 重60 g 以上。5.2 种蛙培 育 5.2.1 消毒 种蛙入池 前15 d 20 d，用生石灰 按120g/m2
8、的剂量全池泼洒 消毒，3 d 5 d 后冲洗1次2次。放养前用2%4%食 盐溶 液 对 种蛙浸浴3 min 5 min。DB32/T 4207 2022 3 5.2.2 放养比 例 雌、雄 比例 以2:1 为 宜。5.2.3 强化培 育 以 投喂 蚯蚓、黄粉 虫 等 动 物性饵 料为 主，补 充投 喂 蛋白含 量为38%42%的人 工配合 饲料，饲料 卫生应符合GB 13078 的规 定。5.3 催产 采取人 工催 产，自然 产卵 受 精，催产 时间4月 下旬 至5月上 旬，水温20 25 为宜。每只 种蛙 一次性注射 催产药 液1.0 mL 1.5 mL，按有 效成分 剂量 计，每公 斤雌蛙
9、 用催 产剂绒 毛膜促 性腺激 素（HCG）2000 IU 5000 IU；或 用 促黄体 释放激 素类 似物（LRH-A2）50 ug 150 ug；雄蛙用 药量为 雌蛙 用药量的1/2，混 合用 药 时 剂量 为 单一药 物使 用剂 量的1/2 1/3，效应 时间 为40 h 60 h。5.4 产卵孵 化 5.4.1 产卵 水温20 25，人 工催 产后按 雌雄1：1 配比，每 平方米 放养2对 3对。催 产40 h 60 h后，种蛙抱对产 卵 受 精。5.4.2 收卵 宜 在上 午8时 至9时，下午2 时至3时各 收卵 一次，宜 在l h内完 成。蛙卵产 出l h 2 h内 不要 搅动，
10、产出3 h 4 h 后 及时 用光 滑的捞 勺捞 出，分散 卵块，放入 孵化 网箱，密 度1 万粒/m22万粒/m2。5.4.3 孵化 5.4.3.2 孵化池 消毒 使用0.5 g/m30.8 g/m3的 聚维酮 碘进 行消 毒。5.4.3.3 孵化用 水 含盐量 不高 于2，pH 6 8，溶 氧量 保持 在4 mg/L 以 上，进 水口 套三 层过 滤绢 网，绢 网从 内到 外分别为20 目、40目、80 目。5.4.3.4 孵化管理 微流水 孵化，及时 清 除死 卵。2 d 3 d蝌蚪 出 膜，及时将 蝌蚪 带水 转移 到 培 育池。6 蝌蚪培 育 6.1 蝌蚪池 消毒 使用10 g/m3
11、 20 g/m3的 强氯精 进行 消毒，用药3 d 后换水，水 位加 至第 一阶 梯。6.2 生物饵 料培 养 放养前10 d 向池 内泼洒 生 物有机 肥10 g/m215 g/m2，肥料 符合NY 884 规 定。引入小 球藻 藻种，培养浮游 动物 密度 至5 个/mL 以上。DB32/T 4207 2022 4 6.3 放养密 度 300 尾/m2500 尾/m2为宜。6.4 投喂管理 早期摄 食水 体 中 的浮 游生 物，10 d 后 开始 投喂 蛋白 含量42%的 蝌蚪 粉料，泡 水后全 池投 喂，每天投喂2次，日投 喂量为 蝌蚪 体 重2%3%。17 d后 粉料加 水和成 面团进
12、行定 点投喂，35 d 后开始 投 喂 蛋白 含量 40%42%膨化 颗粒 料。6.5 变态期 管理 蝌蚪养 殖40 d 50 d 进入 变态期，逐渐 长 出后 肢。60 d70 d 逐渐 长出 前肢，尾部开 始萎 缩，此时将水位 降低 至恰 好漫 过 第 二阶梯。7 幼蛙培育 7.1 投喂管理 80%以上 的蝌 蚪完 全变 态 成幼蛙 后，先在 食台 上投喂 黄粉 虫等 活饵2 d 3 d，再逐渐 添加 蛋白 含量38%40%的颗 粒饲 料、减少活 饵投 喂量，5 d 7 d 后完全 投喂 颗粒 饲 料。投 料量 以1 h 内摄 食完 为宜，根据摄 食情 况进 行适 当增 减，每 天早 晚各
13、 投喂1次。7.2 日常管 理 每日巡池2次 3次，观察 蛙池的 水温、水质 和光照 情况。每7 d 10 d 进行 食台 清污 消毒 及 中间 沟消毒，换水20%30%，同 时使 用 过硫 酸氢 钾0.3 mg/L 0.5 mg/L 改 底解 毒。及 时捞出 病死 蛙，进行 深埋等无害 化处 理。进入 养殖 场人员 应消 毒。做好 防逃、防敌 害等 日常 管理。当 水温超 过30 时，需 遮 荫，同时加 大换 水量 或使 用地 下水降 温 及 补水。做 好养 殖记录。8 疾病防 控 常见蝌 蚪及 幼成 蛙疾 病防 治参见 附录A。药物 使用 应 符合农 业农 村部 水 产养 殖用药 明白 纸
14、2020 年1号 水产 养殖 用药 明白 纸2020 年2 号 的规 定。DB32/T 4207 2022 5 A A 附 录 A（资料 性附 录）常见黑 斑蛙 疾病 及防 治方 法 常见黑 斑蛙 疾病 及防 治方 法 见表A.1 表A.1 常 见黑 斑蛙 疾病 及 防治方 法 病名 发病季节 症状 防治方法 红腿病 5 月9 月 发病个体精神不振、活动能力减弱，腹部膨胀，口和肛门有带血的黏液。发病初期后肢趾尖红肿，有出血点，很快蔓延到整个后肢。胃肠充血肝、脾、肾肿大并有出血。预防时，每10 d 15 d 使用聚 维酮碘 对养殖水体进行消毒，用量为0.5 mL/m31.0 mL/m3水体；按5
15、%投饵率计，每7 d 10 d在饲料中 添加黄芷多糖2 g/kg 饲料、复合维生素3 g/kg 饲料，连用5 d 7 d，以提高蛙体免 疫力。治疗时，按5%投饵率计，拌料内 服10%氟苯尼考粉2 g/kg 4g/kg饲料,复合维生素3 g/kg 5 g/kg 饲料,连续使用5 d 7 do 外用聚维酮碘0.5 mL/m31.0 mL/m3水体。腐皮病 4 月6 月、9 月10月 初期蛙头、背、四肢等处皮肤失去光泽，随后出现白斑、表皮脱落、腐烂，露出红色肌肉，蔓延较快。预防时，应减少人为干扰，饲料中长期拌加鱼肝油2 g/kg 饲料和复合维生素3 g/kg 饲料。治疗时，按5%投饵率计，拌料 内服
16、10%盐酸多西环素粉4 g/kg8 g/kg 饲料,双黄连溶液3 g/kg 5 g/kg 饲料,复合维生素3 g/kg 5 g/kg 饲料,连续投喂5 d 7 d；同时外用0.5 mL/m3的20%戊二醛溶液等消毒，连用3 d 5 d。肠胃炎 4 月10月 病蛙食量明显下降或停止摄食，在池中瘫软无力，捕起时缩头弓背，解剖可见胃外表有树枝状充血，胃粘膜出血，肠道外表发红，胃肠空。预防时，可长期在饲料中添加EM 菌、酵母菌等进行预防，按活菌数10 亿CFU/g 计，用量为3 g/kg 5 g/kg 饲料。治疗时，按5%投饵率计，拌料 内服10%氟苯尼考粉2 g/kg 4 g/kg 饲料,或10%恩
17、诺沙星粉4 g/kg8 g/kg 饲料,连用3 d 5 d。脑膜炎 7 月10月 病体精神不振，行动迟缓，食欲减退，发病蝌蚪后肢、腹部和口周围有明显的出血斑点。部分蝌蚪腹部膨大，仰浮于水面打转，有时又恢复正常。解剖可见腹腔大量积水，肝脏发黑肿大并有出血斑点，脾脏缩小，肠道充血。“歪头 和眼球“白内障 是其典型症状。预防时，养殖过程中应勤换水，合理规划养殖密度；每10 d 15 d 使用聚维酮碘对养殖水体 进行消毒，用量为0.5 mL/m31.0 mL/m3水体。治疗时，按5%投饵率计，拌料 内服10%氟苯尼考粉2 g/kg 4 g/kg 饲料,10%复方磺胺嘧啶2 g/kg 4 g/kg饲料（
18、首日剂量加倍）,连用3 d 5 d。外用聚维 酮碘0.5 mL/m31.0 mL/m3水体，连用3 d。肝肿大病 全年 病蛙外观瘦削，后肢粗大，肌肉生硬，皮肤呈现大小不规则的表皮溃疡斑，解剖内脏发现肝脏极度肿大，呈灰白色、土黄色或青灰色，胆囊肿大 预防时，应保证饲料新鲜，防止饲料霉变，保持水质清新。治疗时，按5%投饵率计，拌料 内服保肝中药（川芎，五味子，甘草等）3 g/kg5 g/kg 饲料，复合维生素3 g/kg5 g/kg 饲料，连用5 d 为一个疗程，连续2 个 3 个疗程，每个疗程间隔5 d 7 d。出血病 5 月7 月 多为蝌蚪期发病，发病蝌蚪多浮在水面或腹部朝上漂在水面，腹部和头部有出血点，肠道有积液，局部红肿。预防时，养殖过程中应勤换水，合理规划养殖密度；每10d 15d 使用聚维酮碘对养殖水体进 行消毒，用量为0.5 mL/m31.0 mL/m3水体。治疗时，先用有机酸溶液进行水体解毒，用量为0.5 mL/m31.0 mL/m3水体；再按5%投饵率计，拌料 内服10%恩诺沙星粉4g 8g/kg饲料,复合维生素3g 5g/kg 饲料,双黄连溶液4g 8g/kg饲料,连用3d 5d；外用聚维酮 碘0.5 mL/m31.0 mL/m3水体，大黄提取液0.2 mL/m30.4 mL/m3水体。_
