1、 ICS 65.020.20 CCS B 21 37 山东省地方标准 DB 37/T 4485 2021 玉米种子 活力测定 加速老化法 、 抗 冷法 、 冷浸法、 破裂法 Maize seed vigour test by accelerated ageing test, cold test, cold soaking test, rupture test 2021 - 12 - 29 发布 2022 - 01 - 29 实施 山东省市 场监督 管 理局 发 布 DB 37/T 4485 2021 I 目 次 前言 . III 1 范围 . 1 2 规 范性 引用 文件 . 1 3 术 语和
2、 定义 . 1 4 缩 略语 . 2 5 测 定原 理 . 2 加速 老化 法 . 2 5.1 抗冷 法 . 2 5.2 冷浸 法 . 2 5.3 破裂 法 . 3 5.4 6 测 定方 案 . 3 总则 . 3 6.1 样品 . 3 6.2 测定 平台 . 3 6.3 测定 条件 . 3 6.4 7 试 材和 设备 . 3 试材 . 3 7.1 设备 . 3 7.2 8 试 验步 骤 . 4 加速 老化 法 . 4 8.1 抗冷 法 . 5 8.2 冷浸 法 . 6 8.3 破裂 法 . 7 8.4 9 试 验数 据处 理 . 8 加速 老化 法 . 8 9.1 抗冷 法 . 8 9.2 冷
3、浸 法 . 8 9.3 破裂 法 . 9 9.4 重新 试验 . 9 9.5 10 结 果计 算和 表示 . 10 加速 老化 法、 抗冷 法、冷 浸法 . 10 10.1 破裂 法 . 11 10.2 11 结 果报 告 . 11 附录A （资 料性 ） 玉米 种子活 力测 定（ 加速 老化 法、抗 冷法 、冷 浸法 ）发 芽试验 原始 记录 表 . 12 附录B （资 料性 ） 玉米 种子活 力测 定（ 破裂 法） 发芽试 验原 始记 录表 . 13 附录C （资 料性 ） 玉米 种子活 力测 定结 果报 告单 . 14 DB 37/T 4485 2021 II 参考文 献 . 15 DB
4、 37/T 4485 2021 III 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标准 化工 作导则 第1 部分： 标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定 起草。 请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。 本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任 。 本文件 由山 东省 农业 农村 厅提出 并组 织实 施。 本文件 由山 东省 农业 标准 化技术 委员 会种 植业 分技 术委员 会归 口。 DB 37/T 4485 2021 1 玉 米种子 活力测定 加速 老化法、 抗冷法 、冷浸法 、破裂 法 1 范围 本文件 规定 了玉 米(Zea mays L.) 种子
5、活力 测定 加速 老化法 、 抗冷 法 、 冷 浸法 、 破裂法 的测 定原 则、 测定方 案、 测定 程序 和结 果报告 。 本文件 适用 于普 通玉 米品 种的种 子活 力测 定， 亦可 作为特 用玉 米品 种的 种子 活力测 定推 荐方 法。 2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款 。 其 中 ， 注日 期的 引用 文件 ， 仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件； 不注 日期 的引 用文件 ， 其 最新 版本 （包 括所有 的修 改单 ） 适 用 于 本 文件。 GB/T 3543.2 农作 物种 子 检验规
6、 程 扦样 GB/T 3543.4 农作 物种 子 检验规 程 发芽 试验 GB/T 8170 数 值修 约规 则 与极限 数值 的表 示与 判定 GB/T 26462 种 子发 芽纸 3 术语和 定义 GB/T 3543.2 界 定的 以及 下 列术语 和定 义适 用于 本文 件。 3.1 种子活 力 seed vigour 在广泛 的田 间 条 件下 ，决 定种子 迅速 整齐 出苗 和长 成正常 幼苗 潜在 能力 的总 称。 3.2 种子批 seed lot 同一来 源、 同一 品种 、同 一年度 、同 一时 期收 获和 质量基 本一 致、 在规 定数 量之内 的种 子。 来源 ：GB/T
7、 3543.2 1995 ，3.1 3.3 送验样 品 submitted sample 送到种 子检 验机 构检 验、 规定数 量的 样品 。 来源 ：GB/T 3543.2 1995 ，3.4 3.4 试验样 品（ 简称 “试 样” ） working sample 在实验 室中 从送 验样 品中 分出的 部分 样品 ，供 测定 某一检 验项 目之 用。 来源 ：GB/T 3543.2 1995 ，3.5 3.5 加速老 化测 定 accelerated aging test 将试样 置于 高温 高湿 条件 下进行 人工 老化 处理 ， 处 理后进 行标 准发 芽试 验 ， 统计正 常幼
8、苗数 ， 计算 发芽率 。 DB 37/T 4485 2021 2 3.6 抗冷测 定 cold test 将试样 低温 发芽 一定 时间 后转适 温发 芽试 验， 定期 统计正 常幼 苗数 ，计 算发 芽率。 3.7 冷浸测 定 cold soaking test 将试样 低温 水浴 处理 后进 行标准 发芽 试验 ，统 计正 常幼苗 数， 计算 发芽 率。 3.8 破裂测 定 rupture test 在特定 发芽温 度下 ，定时 统计试 样种子 已发 生果种 皮破裂 和胚根 鞘破 裂的种 子粒数 ，计算 破裂 率 ， 包括果 种皮 破裂 率、 胚根 鞘破裂 率、 果种 皮胚 根鞘 破裂率
9、 和果 种皮 未破 裂率 。 4 缩略语 下列缩 略语 适用 于本 文件 。 AAT: 加速 老化 测定 （Accelerated Ageing Test ） CT: 抗 冷测 定（Cold Test ） CST: 冷浸 测定 （Cold Soaking Test ） RT: 破 裂测 定（Rupture Test ） TR: 果 种皮 破裂 （Testa-pericarp Rupture ） CR: 胚 根鞘 破裂 （coleorhiza Rupture ） TU: 果 种皮 破裂 （Testa-pericarp Unrupture ） TRP: 果种 皮破 裂率 （Testa-perica
10、rp Rupture Percentage ） CRP: 胚根 鞘破 裂率 （Coleorhiza Rupture Percentage ） TRCRP ：果 种皮 胚根 鞘破 裂 率（(Testa-pericarp Rupture+Coleorhiza rupture) Percentage ） TUP ： 果种 皮未 破裂 率（Testa-pericarp Unrupture Percentage ） 5 测定原 理 加速老 化法 5.1 采用高 温高 湿处 理种 子， 加速种 子老 化， 其劣 变程 度在几 天内 相当 于数 月或 数年之 久的 自然 劣 变 程 度。 高 活力 种子 经
11、一 定条 件 的老化 处理 后仍 能正 常发 芽， 低 活力 种子 则产 生不 正 常幼苗 甚至 丧失 生活 力。 因此， 加速 老化 法能 较好 地预测 田间 出苗 率和 种子 耐贮藏 性。 抗冷法 5.2 玉米为 春播 喜温 作物 ， 将 种子置 于低 温潮 湿环 境中 处理一 定时 间后 ， 移至 适 宜环境 下生 长 ， 模 拟早 春田间 逆境条 件， 观察种 子发芽 成苗的 能力 。高活 力种子 经一定 条件 的 低温 处理后 仍能形 成正 常幼 苗 ， 而低活 力种 子则 不能 形成 正常幼 苗甚 至丧 失生 活力 。因此 ，抗 冷法 能较 好地 预测田 间出 苗率 。 冷浸法 5
12、.3 玉米春 播常 遇冷 害 、 快 速 吸胀及 缺氧 伤害 等逆 境胁 迫。 将种 子浸 泡在 低温 水 中处理 一定 时间 后 ， 移 至适宜 环境 下生 长 ， 模 拟 早春田 间逆 境条 件 ， 观 察 种子发 芽成 苗的 能力 。 高 活力种 子由 于抗 逆性 强仍 能 保持发 芽力 ， 形 成正 常幼 苗， 而 低活 力种 子则 不能 形成正 常幼 苗甚 至丧 失生 活力。 因此 ， 冷 浸 法 能 较 好 地预测 田间 出苗 率。 DB 37/T 4485 2021 3 破裂法 5.4 玉米种 子发 芽中 伴随 着果 种皮破 裂 （胚 根鞘 伸长 突破 果种皮） 和胚 根鞘 破裂
13、 （ 胚 根伸长 突破 胚根 鞘 ） 两个连 续萌 发质 变事 件。 高活力 种子 萌发 事件 发生 速率快 ， 而 低活 力种 子发 生速率 慢甚 至不 能 完 成 上 述 萌发事 件。 因此 ，破 裂法 能快速 反映 种子 活力 状况 ，较好 地预 测田 间出 苗率 。 6 测定方 案 总则 6.1 在严格 控制 条件 下， 对试 样按模 拟逆 境处 理、 标准 发芽、 数据 分析 的程 序 （ 加速老 化测 定、 抗 冷 测 定、冷 浸测 定） 和低 温发 芽、萌 发事 件统 计、 数据 分析的 程序 （破 裂测 定） 进行测 定。 按规定 要求 填报 测定 结果 ，测定 报告 应注 明
14、测 定方 案所规 定的 条件 。 样品 6.2 送验样 品为 玉米 种子 ，重 量应不 低于1 000 g。 测定平 台 6.3 人工气 候箱 、光 照培 养箱 、发芽 室或 其它 能够 精准 控温的 发芽 环境 。 测定条 件 6.4 种子活 力测 定应 在有 利于 正确实 施测 定的 控制 条件 下进行 ，包 括但 不限 于下 列条件 ： 种子检 验员 具备 熟悉 所使 用测定 方法 的知 识和 技能 ； 所有仪 器与 使用 的技 术相 适应， 并已 经过 定期 维护 、验证 和校 准。 7 试材和 设备 试材 7.1 7.1.1 老化盒 ：100 mm 100 mm 30 mm 等规 格
15、。 7.1.2 尼龙网 袋：150 mm100 mm、400 mm 150 mm 等 规格 。 7.1.3 置种板 ：可 辅助 玉米 种子 置床， 每次 可平 行或 交错 置种 50 粒或 100 粒。 7.1.4 数种板 ：可 辅助 数取 一定 数目的 玉米 种子 。 7.1.5 塑料框 架： 外边 框尺 寸 为 350 mm 250 mm， 内边 框尺 寸为 300 mm 200 mm ， 厚 为 5 mm ， 辅 助砂 床 铺设。 7.1.6 自封袋 ：12 号（450 mm340 mm ）等 规格 。 7.1.7 发芽盒 （盘 ）：450 mm300 mm 90 mm 等 规格 。 7
16、.1.8 发芽纸 ：GB/T 26462 ，380 mm255 mm 等 规格 。 7.1.9 试剂药 品： 次氯 酸钠 溶液 等。 7.1.10 其它 ： 其 它发 芽装 置 、 温 湿度计 、 玻璃 棒 、 三 角瓶 、 镊 子 、 蒸 馏水 、 标签 纸 、 纱 布 、 油 性记 号 笔、酒 精、 砂子 、喷 壶等 。 设备 7.2 7.2.1 人工老 化处 理设 备： 种子 老化箱 等。 7.2.2 发芽设 备： 人工 气候 箱、 光照培 养箱 、发 芽室 、恒 温循环 槽或 其它 能够 精准 控温发 芽的 设备。 DB 37/T 4485 2021 4 7.2.3 消毒干 燥设 备：
17、 高压 蒸汽 灭菌锅 、电 热鼓 风干 燥箱 等。 8 试验步 骤 加速老 化法 8.1 8.1.1 试样准 备 启封后 ， 随机 数取 试样 净 种子100 粒，4 次重 复， 共400 粒。 种子老 化处 理前 用1.0 % 的 次氯 酸钠 溶液 浸泡消毒10 min ，消毒后用无菌蒸 馏水冲洗3遍 ，拭去种子表 面浮水，备用。包衣种子 可先柔性清洗 后 消毒， 或无 须消 毒处 理。 8.1.2 试验材 料准 备 发芽纸 ：将 发芽 纸121 1 高压 蒸汽 灭菌20 min 后，烘 干备 用； 发芽盒 （盘 ）： 将发 芽盒 （盘） 清洗 干净 后， 用75 %的酒 精溶 液擦 拭消
18、毒， 风 干备用 。 8.1.3 加速老 化测 定 按将种 子放 入老 化盒 或尼 龙网袋 中 ， 置 于种 子老 化 箱内 ， 控 制温 度在45 0.3 、 相 对湿 度不 低 于98 % 条件 下， 加 速老 化 处理72 h， 取 出， 薄 摊， 回 干 （自 然晾 干或 在不 高于60 的 条件 下烘 干） ， 备 用。 盖纸发 芽 ： 取2 张发 芽纸 （380 mm 255 mm ） ， 叠 放入 发芽盒 （ 盘） （450 mm 300 mm 90 mm ） 内， 加入蒸 馏水 ， 充 分润 湿， 用无菌 纱布 轻拭 床面 ， 除 去余液 和纸 间气 泡后 ， 置 种板辅 助平
19、 行置 种 ， 纸 边 距 2 cm 2.5 cm 。种 子置床 后 ，加盖1 张润 湿的发 芽纸 ， 盖上发 芽盒（ 盘） 盖，贴 好标签 并标注 品种 名称、 样品编 号、重 复次 数、置 床时间 等基本 信息 ，放入 人工气 候箱。 按照GB/T 3543.4 ，25 0.5 标 准 发芽7 d 统 计正 常幼 苗数 ， 计算发 芽率 。 卷纸发 芽： 用75 % 的酒 精 溶液消 毒操 作台 ， 将2 张发 芽纸 （380 mm 255 mm ） 叠 放好， 用油 性记 号笔 在发芽 纸一 角较 小区 域标 识样品 信息 （或 备样 品信 息防水 条） ， 如： 样 品名 称、 重 复
20、编 号等。 发 芽 纸 用 蒸馏水 充分 润湿 ， 用 无菌 纱 布轻拭 床面 ， 除 去余 液和 纸 间气泡 后， 置种 板辅 助交 错 置种， 种孔 朝向 一致 ， 纸边距5 cm 。 种子 置床 后加 盖1张 润湿 的发 芽纸 ， 将纸 床 （ 或夹 样品 信息 防水 条 ） 卷 起 ， 纸 卷两 端整 平， 并用皮 筋扣 住。 将纸 卷放 入自封 袋密 封好 （朝 向一 致） ， 在自 封袋 上粘 贴标 签纸或 用油 性记 号 笔 标 识 相 关信息 后， 垂直 放入 人工 气候箱 （纸 卷种 孔端 朝下 ）。按 照GB/T 3543.4 ，25 0.5 标准 发芽7 d 统 计正常
21、幼苗 数， 计算 发芽 率。 同时按 照GB/T 3543.4 ， 对 未老化 处理 种子 进行 标准 发芽测 定，25 0.5 标准发 芽7 d 统 计正 常 幼苗数 ，计 算发 芽率 。 8.1.4 检查管 理 在种子 老化 处理 和发 芽期 间， 应进 行适当 的检 查管 理， 以维 持原有 老化 处理 及发芽 条件 。 老 化36 h 和发芽4 d 时分 别检 查1次 老化和 发芽 环境 ，若 有问 题及时 进行 相应 维护 。 老化处 理： 温度 和湿 度检 测；温 度保 持在45 0.3 范 围， 相对 湿度 不低 于98 % 。 发芽床 检查 ：发 芽床 始终 保持湿 润。 发芽
22、温 度检 查： 温度 保持 在25 0.5 范围 内。 种子检 查：发霉的种子应及时取 出洗涤去霉。当发霉种子 超过5 %时，应更换发芽床 ，以免霉菌 因 素影响 测定 结果 。如 发现 腐烂无 生活 力的 种子 ，应 及时去 除并 做好 相应 记载 。 8.1.5 数据记 录 DB 37/T 4485 2021 5 按照GB/T 3543.4 中正常 幼 苗、新 鲜不发 芽种 子、硬 实、不 正常幼 苗和 死种子 的鉴定 标准进 行数 据 统计， 根据 正常 幼苗 数， 计算发 芽率 。 抗冷法 8.2 8.2.1 试样准 备 启封后 ， 随机 数取 试样 净 种子100 粒，4 次重 复，
23、 共400 粒。 种子低 温发 芽前 用1.0 % 的 次氯 酸钠 溶液 浸泡消毒10 min ，消毒后用无菌蒸 馏水冲洗3遍 ，拭去种子表 面浮水后，备用。包衣种 子可先柔性清 洗 表面包 衣后 消毒 ，或 无须 消毒处 理。 8.2.2 试验材 料准 备 发芽纸 ：将 发芽 纸121 1 高压 蒸汽 灭菌20 min 后，烘 干备 用。 发芽盒 （盘 ）： 将发 芽盒 （盘） 清洗 干净 后， 用75 %的酒 精溶 液擦 拭消 毒， 风 干备用 。 砂子 ： 砂 子清洗 后 ， 平 铺 于搪瓷 盘内 放入 电热 鼓风 干燥箱130 3 高温 烘 干灭菌4 h ， 冷 却后 用 孔径2.0
24、mm 筛子 过筛 ，除 杂质， 备用 。 8.2.3 抗冷测 定 按采取 卷纸 、纸 砂上 或纸 砂间置 床方 式对 玉米 种子 进行抗 冷测 定。 卷纸发 芽： 用75 % 的酒 精 溶液消 毒操 作台 ， 将2 张发 芽纸 （380 mm 255 mm ） 叠 放好， 用油 性记 号笔 在发芽 纸一 角较 小区 域标 识样品 信息 （或 备样 品信 息防水 条） ， 如： 样 品名 称、 重 复编 号等。 用 蒸 馏 水 充分润 湿， 用无 菌纱 布轻 拭床面 ， 除 去余 液和 纸间 气泡后 ， 置 种板 辅助 交错 置种， 种孔 朝向 一 致 ， 纸 边 距5 cm 。 种子 置床 后
25、加 盖1 张润湿 的发 芽纸 ， 将纸 床 （或 夹样 品信 息防 水条 ） 疏松卷 起 ， 纸 卷两 端整 平 ， 并用皮 筋扣 住。 将纸 卷放 入自封 袋密 封好 （朝 向一 致） ， 在自 封袋 上粘 贴标 签纸或 用油 性记 号 笔 标 识 相 关信息 后 ， 垂 直放 入人 工 气候箱 中 （纸 卷种 孔端 朝 下） ，10 0.5 避光 发芽7 d 后 ， 转25 0.5 发芽4 d （12 h光 暗交 替） 统计正 常幼 苗数 ，计 算发 芽率。 纸砂上 ： 取2张 发芽 纸 （380 mm255 mm ） ， 叠 放入 发 芽盒 （ 盘） （450 mm 300 mm90 m
26、m ） 内 ， 加 入蒸馏 水， 充分 润湿 ， 用 无菌纱 布轻 拭床 面， 除去 余液和 纸间 气泡 后， 塑料 框架辅 助砂 床铺 设 （ 取 湿 砂 置塑料框 架内，整平床面），床厚5 mm ，置种 板辅助平行置 种，种胚与砂床紧密接触 ，种孔朝向一致 ， 纸边距5 cm ， 种子 置床 后 加盖湿 砂， 整平 床面， 盖 上发芽 盒 （ 盘） 盖， 放入 人工气 候箱 ，10 0.5 避光发 芽7 d后 ，转25 0.5 发芽4 d（12 h 光暗 交替） 统计 正常 幼苗 数， 计算发 芽率 。 纸砂间 ： 用75 %的 酒精 溶 液消毒 操作 台， 将2张 发芽 纸 （380 m
27、m255 mm ） 叠 放 好， 用 油性 记号 笔在 发芽纸 一角 较小 区域 标识 样品信 息 （ 或备 样品 信息 防 水条） ， 用 蒸馏 水充 分润 湿 ， 用无 菌纱 布轻 拭床 面， 除去余 液和 纸间 气泡 后， 塑料框 架辅 助砂 床铺 设 （ 取湿砂 置塑 料框 架内 ， 整 平床面 ） ， 床厚5 mm ， 置 种 板辅助交 错置种，种孔朝向一致， 纸边距5 cm 。种子置床后 加盖1张润湿的发芽纸，将 纸床（或夹样 品 信息防 水条 ） 疏 松卷 起， 纸卷两 端整 平， 并用 皮筋 扣住。 将纸 卷放 入自 封袋 密封好 （朝 向一 致） ， 在 自 封袋上 粘贴 标
28、签 纸或 用油 性记号 笔标 识相 关信 息后 ， 垂 直放 入人 工气 候箱 中 （ 纸卷种 孔端 朝下 ） ，10 0.5 避 光发 芽7 d 后， 转25 0.5 发芽4 d （12 h光 暗交 替） 统计 正常 幼苗数 ，计 算发 芽率 。 8.2.4 检查管 理 在种子 发芽 期间 ，应 进行 适当的 检查 管理 ，以 维持 原有发 芽条 件。10 0.5 发 芽4 d 和25 0.5 发芽2 d分 别检 查1 次 发芽环 境， 若有 问题 及时 进行相 应维 护。 发芽床 检查 ：发 芽床 始终 保持发 芽床 湿润 。 发芽温 度检 查： 低温 发芽 温度保 持在10 0.5 范围
29、内 ， 适 温发 芽温 度保 持在25 0.5 范围 内。 DB 37/T 4485 2021 6 种子检 查： 适温 发芽 期间 发霉的 种子 应及 时取 出洗 涤去霉 。 当 发霉 种子 超过5 % 时， 应 更换 发芽 床 ， 以免霉 菌因 素影 响检 测结 果。如 发现 腐烂 死亡 种子 ，应及 时去 除并 做好 相应 记载。 8.2.5 数据记 录 按照GB/T 3543.4 中正常 幼 苗、新 鲜不发 芽种 子、硬 实、不 正常幼 苗和 死种子 的鉴定 标准进 行数 据 统计， 根据 正常 幼苗 数， 计算发 芽率 。 冷浸法 8.3 8.3.1 试样准 备 启封后 ， 随机 数取
30、 试样 净 种子100 粒，4 次重 复， 共400 粒。 种子冷 浸处 理前 用1.0 % 的 次氯 酸钠 溶液 浸泡消 毒10 min ， 消毒 后 用无菌 蒸馏水 冲洗3 遍， 拭 去种子 表面浮 水后 ，备用 。包衣 种子可 先柔 性清 洗 表面包 衣然 后消 毒， 或无 须消毒 处理 。 8.3.2 试验材 料准 备 发芽纸 ：将 发芽 纸121 1 高压 蒸汽 灭菌20 min 后，烘 干备 用。 发芽盒 （盘 ）： 将发 芽盒 （盘） 清洗 干净 后， 用75 %的酒 精溶 液擦 拭消 毒， 风 干备用 。 8.3.3 冷浸测 定 采取纸 间（ 卷纸 ）置 床方 式对玉 米种 子
31、进 行冷 浸测 定。可 以选 择置 床前 冷浸 或置床 后冷 浸。 置床前 冷浸 处理 ： 将试 样 装入尼 龙网 袋 ， 并 在信 息 牌上用 油性 记号 笔标 识信 息后 ， 放 入恒 温循 环槽 或塑料 箱 （加 入足 量蒸 馏 水提前 放入 人工 气候 箱） 在4 0.5 冷浸 处理3 d 。 处理 结束 后取 出， 拭 去 种子表 面浮 水后 ， 备 用。 将2张 发芽 纸 （380 mm 255 mm ） 叠放 好， 用油 性记 号 笔在发 芽纸 一角 较小 区域 标识样 品信 息 （ 或备 样品 信息防 水条 ） ， 用蒸 馏水 充分 润 湿， 用无 菌纱 布轻 拭床面 ， 除
32、去余 液 和 纸 间 气 泡后，置 种板辅助交错置种，种孔 朝向一致，纸边距5 cm。种子置床后 加盖1张润湿的 发芽纸，将纸 床 （或夹 样品 信息 防水 条） 疏松卷 起， 纸卷 两端 整平 ， 并用 皮筋 扣住 。 将 纸卷 放入自 封袋 密封 好 （ 朝 向 一 致） ， 在自 封袋 上粘 贴标 签 纸或用 油性 记号 笔标 识相 关信息 后， 垂直 放入 人工 气 候箱 （ 纸卷 种孔 端朝 下） ， 25 0.5 发 芽7 d（12 h光暗 交替 ）统 计正 常幼 苗 数，计 算发 芽率 。 置床后 冷浸 处理 ： 将2 张 发 芽纸 （380 mm255 mm ） 叠 放好， 用
33、油 性记 号笔 在发 芽纸一 角较 小区 域标 识样品 信息 （ 或 备样 品信 息防水 条） ， 用 蒸馏 水充 分润湿 ， 用 无菌 纱布 轻拭 床面， 除去 余液 和 纸 间 气 泡 后， 置种 板辅 助交 错置 种 ， 种 孔朝 向一 致 ， 纸 边距5 cm。 种子 置床 后加 盖1张 润 湿的发 芽纸 ， 将纸 床 （或 夹样品 信息 防水 条） 疏松 卷起， 纸卷 两端 整平 ， 并 用皮筋 扣住 ， 放 入尼 龙网 袋中， 封口 放入 恒 温 循 环 槽 或塑料 箱 （加 入足 量蒸 馏 水提前 放入 人工 气候 箱） 内4 0.5 冷浸 处理3 d 。 处理 结束 后， 将
34、纸卷 除 去余液 后放 入自 封袋 密封 好 （朝 向一 致） ， 在 自封 袋 上粘贴 标签 纸或 用油 性记 号笔标 识相 关信 息后 ， 垂 直放入 人工 气候 箱 （ 纸卷 种孔端 朝下 ） ，25 0.5 发 芽7 d （12 h 光暗 交替 ） 统计 正常 幼苗 数， 计 算 发芽率 。 8.3.4 检查管 理 在种子 冷浸 和发 芽期 间， 应进行 适当 的检 查管 理， 以维持 原有 冷浸 和发 芽条 件。冷 浸1 d和 发芽4 d 分别检 查1 次冷 浸和 发芽 环 境，若 有问 题及 时进 行相 应维护 。 发芽床 检查 ：发 芽床 始终 保持湿 润。 发芽温 度检 查：
35、冷浸 温度 保持在4 0.5 范围 内 ，发芽 温度 保持 在25 0.5 范围 内。 种子检 查：发霉的种子应及时取 出洗涤去霉。当发霉种子 超过5 %时，应更换发芽床 ，以免霉菌 因 素影响 测定 结果 。如 发现 腐烂无 生活 力的 种子 ，应 及时去 除并 做好 相应 记载 。 DB 37/T 4485 2021 7 8.3.5 数据记 录 按照GB/T 3543.4 中正常 幼 苗、新 鲜不发 芽种 子、硬 实、不 正常幼 苗和 死种子 的鉴定 标准进 行数 据 统计， 根据 正常 幼苗 数， 计算发 芽率 。 破裂法 8.4 8.4.1 试样准 备 启封后 ， 随机 数取 试样 净
36、 种子100 粒，4 次重 复， 共400 粒。 种子低 温发 芽前 用1.0 % 的 次氯 酸钠 溶液 浸泡消毒10 min ，消毒后用无菌蒸 馏水冲洗3遍 ，拭去种子表 面浮水后，备用。包衣种 子可先柔性清 洗 表面包 衣然 后消 毒， 或无 须消毒 处理 。 8.4.2 试验材 料准 备 发芽纸 ：将 发芽 纸121 1 高压 蒸汽 灭菌20 min 后，烘 干备 用； 发芽盒 （盘 ）： 将发 芽盒 （盘） 清洗 干净 后， 用75 %的酒 精溶 液擦 拭消 毒， 风 干备用 。 8.4.3 破裂测 定 采取纸 间 （ 盖纸 和卷 纸） 置床方 式对 玉米 种子 进行 破裂测 定。 破
37、裂 测定 发芽 温度：15 0.5 或 20 0.5 。 15 ： 置床120 h15 min （5 d 15 min ）统 计果 种 皮破裂 种子数 、胚 根鞘破 裂种子 数和果 种皮 未 破裂种 子数 。 20 ： 置床72 h15 min （3 d15 min） 统计 果种 皮 破裂种 子数、 胚根 鞘破 裂 种子数 和果 种皮 未破 裂种子 数。 盖纸发 芽 ： 取2 张发 芽纸 （380 mm 255 mm ） ， 叠 放入 发芽盒 （ 盘） （450 mm 300 mm90 mm ） 内， 加入蒸 馏水 ， 充 分润 湿， 用无菌 纱布 轻拭 床面 ， 除 去余液 和纸 间气 泡后
38、 ， 置 种板辅 助平 行置 种 ， 纸 边 距 2 cm 2.5 cm 。 种 子置 床后 加盖1 张润 湿的 发芽 纸， 盖 上发芽 盒 （ 盘） 盖， 贴好 标签并 标注 品种 名称 、 样 品编号 、 重 复次 数、 置床 时间等 基本 信息 ， 放 入人 工气候 箱， 根据 所选 发芽 温度， 定时 统计 各 重 复 果 种 皮破裂 种子 数 、 胚 根鞘 破 裂种子 数和 果种 皮未 破裂 种子数 ， 计算 果种 皮破 裂 率、 胚根 鞘破 裂率 和果 种 皮 胚根鞘 破裂 率。 卷纸发 芽： 用75 % 的酒 精 溶液消 毒操 作台 ， 将2 张发 芽纸 （380 mm 255
39、mm） 叠 放好， 用油 性记 号 笔 在发芽 纸一 角较 小区 域标 识样品 信息 （或 备样 品信 息防水 条） ， 用 蒸馏 水充 分润湿 ， 用 无菌 纱 布 轻 拭 床 面，除去 余液和纸间气泡后，置种 板辅助交错置种，种孔朝 向一致，纸边距5 cm。种子置床 后加盖1 张 润湿的 发芽 纸， 将纸 床 （ 或夹样 品信 息防 水条 ） 疏 松卷起 ， 纸 卷两 端整 平， 并用皮 筋扣 住。 将纸 卷放 入 自封袋 密封 好 （ 朝向 一致 ） ， 在 自封 袋上 粘贴 标签 纸或用 油性 记号 笔标 识相 关信息 后， 垂直 放 入 人 工 气 候箱 （ 纸卷 种孔 端朝 下）
40、， 根据 所选 发芽 温度 ， 定 时统计 各重 复果 种皮 破裂 种子数 、 胚 根鞘 破 裂 种 子 数 和果种 皮未 破裂 种子 数， 计算果 种皮 破裂 率、 胚根 鞘破裂 率、 果 种 皮胚 根鞘 破裂率 和果 种皮 未破 裂率。 8.4.4 检查管 理 在种子 发芽 期间， 应进 行 适当的 检查 管理， 以维 持 原有发 芽条 件。 发 芽2 d检查1次 发芽 环境， 若有 问题及 时进 行相 应维 护。 发芽床 检查 ：发 芽床 始终 保持湿 润。 发芽温 度检 查： 发芽 温度 保持在 选定 测定 温度 （15 0.5 或20 0.5 ）范 围内 。 种子检 查：发霉的种子应
41、及时取 出洗涤去霉。当发霉种子 超过5 %时，应更换发芽床 ，以免霉菌 因 素影响 测定 结果 。如 发现 腐烂无 生活 力的 种子 ，应 及时去 除并 做好 相应 记载 。 DB 37/T 4485 2021 8 8.4.5 数据记 录 按照表1 玉米 种子活 力测 定 破裂法 鉴定标 准对 果种皮 破裂、 胚 根鞘 破裂 和果种 皮未破 裂事件 进行 鉴 定， 定时 统计 各重 复果 种皮 破裂种 子数、 胚根 鞘破 裂种 子数和 果种 皮未 破裂 种子 数， 计算 果种 皮破 裂 率 、 胚根鞘 破裂 率、 果种 皮胚 根鞘破 裂率 和果 种皮 未破 裂率。 表1 玉米种 子活 力测 定破 裂法 鉴定标 准 萌发事件类型 表型 果种皮破裂 果种皮发生破裂（主要归因于胚根鞘膨胀伸长生长，突破果种皮束缚） 。 胚根鞘破裂 胚根鞘破裂和胚根伸出（主要归因于胚根鞘弱化或胚根伸长生长；胚根鞘侧面有明显 V 型 开裂） 。 果种皮未破裂 种子吸胀，伴随覆胚果种皮凸起，但果种皮未发生破裂。 9 试验数 据处 理 加速老 化法 9.1 分别计 算加速 老化 测定各 重复（100 粒 种子）
