1、 ICS 13.060.50 CCS Z 16 37 山东省地方标准 DB 37/T 4477 2021 水中双酰 胺类杀虫 剂残留量 的测定 液相色谱- 串联质谱 法 Determination of diamide insecticides residues in water Liquid chromatography-tandem mass spectrometry method 2021 - 12 - 29 发布 2022 - 01 - 29 实施 山东省市 场监督 管 理局 发 布 DB 37/T 4477 2021 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规 范性 引用
2、文件 . 1 3 术 语和 定义 . 1 4 原理 . 1 5 试 剂或 材料 . 1 6 仪 器设 备 . 2 7 样品 . 2 8 试 验步 骤 . 2 9 实 验数 据处 理 . 4 10 精 密度 . 4 11 定 量限 . 4 附录A （资 料性 ） 5 种 双 酰胺类 杀虫 剂中 英文 名称 、CAS 号及 分子 式信 息 . 5 附录B （资 料性 ） 质谱 仪参数 . 6 附录C （资 料性 ） 5 种 双 酰胺类 杀虫 剂监 测离 子对 、碰撞 电压 和保 留时 间 . 7 附录D （资 料性 ） 5 种 双 酰胺类 杀虫 剂多 反应 监测 （MRM ）色 谱及 质谱 图 .
3、 8 附录E （资 料性 ） 实验 室重复 性限 （r ）数 据表 . 10 附录F （资 料性 ） 实验 室再现 性限 （R ）数 据表 . 11 DB 37/T 4477 2021 II 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标准 化工 作导则 第1 部分： 标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定 起草。 请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。 本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任 。 本文件 由山 东省 农业 农村 厅提出 并组 织实 施。 本文件 由山 东省 农业 标准 化技术 委员 会种 植业 标准 化分技 术委 员会 归口 。 DB 37/
4、T 4477 2021 1 水 中双酰 胺类杀虫 剂残留 量的测定 液 相色谱- 串 联质谱 法 1 范围 本文件 规定 了水 中5 种双 酰 胺类杀 虫剂 残留 量的 液相 色谱- 串联 质谱 检测 方法 。 本文件 适用 于地 表水 和地 下水中 氯虫 苯甲 酰胺 、 溴 氰虫酰 胺、 环溴 虫酰 胺、 氟苯虫 酰胺 、 四 氯 虫 酰 胺残留 量的 测定 。 2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款 。 其 中 ， 注日 期的 引用 文件 ， 仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件； 不注 日期 的引 用文件 ，
5、 其 最新 版本 （包 括所有 的修 改单 ） 适 用 于 本 文件。 GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和试 验方 法 3 术语和 定义 本文件 没有 需要 界定 的术 语和定 义。 4 原理 水样中 残留的 双酰 胺类杀 虫剂经 聚合物 亲水 固相萃 取小柱 富集， 然后 用有机 溶剂洗 脱，浓 缩定 容 ， 用液相 色谱-串 联质 谱仪 检 测，外 标法 定量 。 5 试剂或 材料 除另有 规定 外， 所用 试剂 均为色 谱纯 ，水 为符 合GB/T 6682 中规 定的 一级 水。 试剂 5.1 5.1.1 甲醇（CH3OH ，65-56-1）。 5.1.2 甲酸（HCO
6、OH ，64-18-6）。 溶液配 制 5.2 5.2.1 甲醇- 水溶 液（5+95 ）： 量 取10 mL 甲 醇， 加入190 mL 水中 ，混 匀。 5.2.2 0.1 % 甲酸 （5.1.2 ） 水溶 液：移 取 1.0 mL 甲 酸于 1 000 mL 容 量瓶 中， 用水定 容至刻 度， 现配 现 用。 标准品 5.3 5种双 酰胺 类杀 虫剂 标准 品 ：纯度 95 %， 化合 物中 英文名 称及CAS 号等 信息 见 附录A 。 标准溶 液配 制 5.4 DB 37/T 4477 2021 2 5.4.1 标准储 备溶 液 ： 分 别称 取 约 0.01 g （精 确至0.1
7、 mg ）5 种双 酰胺 类杀 虫剂 标准 品于 10 mL 容量 瓶 中，用 甲醇 溶解 并定 容至 刻度， 配制 成浓 度约 为 1 000 mg/L 的 标准 储备 溶液 ，0 4 保存 ，保 存期 为6 个 月。 5.4.2 中间标 准溶 液： 准 确吸 取 适量标 准储 备溶 液 （5.4.1 ） ， 用甲 醇稀 释配 制成 约 10 mg/L 的中 间标 准溶液 ，0 4 保存 ， 保存期 为 1 个月 。 5.4.3 混合标 准工 作溶 液： 准确 吸取适 量的 中间 标准 溶液 （5.4.2 ） ， 用 甲醇 稀释 配 制成所 需浓 度的 混 合标准 工作 溶液 ，现 配现 用
8、。 材料 5.5 5.5.1 有机滤 膜：0.22 m 。 5.5.2 聚合物 亲水 固相 萃取 小柱 （Hypersep Retain PEP 1) )，500 mg ，6 mL ）。 5.5.3 定性滤 纸。 5.5.4 聚四氟 乙烯 样桶 ：500 mL 。 6 仪器设 备 液相色 谱- 串联 质谱 仪： 配 有电喷 雾离 子源 （ESI）。 6.1 分析天 平： 感量 为0.1 mg 。 6.2 氮吹仪 。 6.3 固相萃 取装 置。 6.4 真空泵 。 6.5 量筒：50 mL 。 6.6 刻度离 心管 ：10 mL 。 6.7 7 样品 取水样 品约1 L ， 将 样品 通 过定性
9、 滤纸 过滤 ， 分三 份 倒入洁 净的 聚四 氟乙 烯样 桶中 ， 每 份约250 mL ， 密封并 做好 标识 ， 于-18 以下冷 冻保 存。 在试 样制 备过程 中 ， 应防 止样 品污 染或发 生残 留物 含量 的 变 化。 8 试验步 骤 提取和 净化 8.1 8.1.1 依次用 甲醇 和水 各 3 mL 对 固相萃 取小 柱 （5.5.2 ） 进 行预淋 ， 使每种 溶剂 在小 柱中停 留 3 min 4 min 。 8.1.2 准确量 取50.0 mL 水 样上 柱， 调 节固 相萃 取装 置 （6.4 ） 压力 控制 阀， 使水 样以 1 mL/min 2 mL/min 的流
10、速 通过 小柱 ，待 水样 全部通 过小 柱后 ，继 续抽 真空约 1 min ，然 后用 3 mL 甲醇水 溶液 （5.2.1 ）洗 涤小柱 ，再 抽真 空约 1 min ，弃去 上述 溶液 ，最 后用 10 mL 甲 醇淋 洗小 柱， 将淋 洗液收 集于 刻度 离心 管 （6.7 ）中 。 定容 8.2 1) Hypersep Retain PEP 柱是 Thermo Fisher 产品 的商 品名 称， 给出 这一 信 息是为 了方 便本 文件 的使 用者 ，并 不 是表示 对该 产品 的认 可。 如果其 他等 效产 品具 有相 同的 效果 ， 则可使 用这 些等 效产 品。 DB 37
11、/T 4477 2021 3 在50 水浴加热下 ，将淋洗液 以氮气吹干 ，用甲醇定容 至1.0 mL，经0.22 m滤膜 （5.5.1 ）过 滤 后供液 相色 谱- 串联 质谱 仪 测定。 测定 8.3 8.3.1 液相色 谱- 串联 质谱 仪参 考 条件 参考条 件如 下： a) 色谱柱 ：C18 液 相色 谱柱 2.0 mm（i.d ）75 mm ，1.6 m， 或相 当者 ； b) 流动相 及梯 度洗 脱条 件见 表 1； 表1 流动相 及梯 度洗 脱条 件 时间 min 流速 mL/min 流动相 A （甲醇） % 流动相 B （0.1% 甲酸） % 0.50 0.35 15 85
12、5.00 0.35 95 5 7.00 0.35 95 5 7.50 0.35 15 85 c) 柱温：40 ； d) 进样量 ：1.0 L； e) 质谱仪 参数 ：见 附 录 B； f) 监测离 子对 、碰 撞电 压： 见附 录 C。 8.3.2 定性测 定 在相同 实验条件下进行 样品测定 时，如果检出的 色谱峰的 保留时间与标准 样品相对 误差在2.5 % 之内 ， 并 且在 扣除 背景 后 的样品 质谱 图中 ， 目标 化 合物的 质谱 定量 和定 性离 子均出 现 ， 而 且同 一检 测 批 次， 对 同一 化合 物， 样品 中 目标化 合物 的定 性离 子和 定量离 子的 相对 丰
13、度 比与 质量浓 度相 当的 基质 标 准 溶液相 比， 偏差 不超 过表2 规定的 范围 ，则 可判 断样 品中存 在目 标农 药。 表2 定性测 定时 相对 离子 丰度 的最大 允许 偏差 相对离子丰度 50 % 20 % 至50 % 10 % 至20 % 10 % 允许的相对偏差 20 % 25 % 30 % 50 % 8.3.3 定量测 定 本文件 采用 外标 法定 量测 定， 以待 测物 峰面 积为 纵 坐标 、 混 合标 准工 作溶 液 浓度为 横坐 标 ， 绘 制标 准工作 曲线 对样 品进 行定 量。 样 品溶 液中 待测 物的 响应值 均应 在标 准工 作曲 线的线 性范 围
14、以 内 ； 如 果 超 出线性 范围， 应用 甲醇（5.1.1 ） 进行 适当稀 释后 测 定。5种 农药 标准物 质的 参 考保留 时间见 附录C ，多 反应监 测（MRM ）色 谱及 质 谱图见 附录D。 平行试 验 8.4 按上述 步骤 对同 一试 样进 行平行 试验 。 空白试 验 8.5 DB 37/T 4477 2021 4 用符合GB/T 6682 中 规定 的 三级水 作为 空白 试样 ，按 上述步 骤进 行试 验。 9 实验数 据处 理 采用标 准工 作曲 线法 定量 ，试样 中每 种被 测组 分含 量按式 （1 ）计 算： = 1000 1000 (1) 式中： Xi 试
15、样中 每种 被测 组 分含量 ，单 位为 微克 每升 （g/L）； VS 试 样溶 液最 终定 容 体积， 单位 为毫 升（mL）； Ci 从 标准 工作 曲线 得 到的试 样溶 液中 每种 被测 组分浓 度， 单位 为微 克每 升（g/L ）； V 样 品溶 液所 代表 的 试样体 积， 单位 为毫 升（mL ）； 计算结 果应 扣除 空白 值， 测定结 果用 平行 测定 的算 术平均 值表 示， 保留 两位 有效数 字。 10 精密度 在重复 性条件 下获 得的两 次独立 测试结 果的 绝对差 值不大 于重复 性限 （r） ， 大于重 复性限 （r ） 10.1 的情况 不超 过5 %，
16、重复 性 限（r ）按 附录E 数 据采 用 线性内 插法 求得 。 在再现 性条件 下获 得的两 次独立 测试结 果的 绝对差 值不大 于再现 性限 （R） ， 大于再 现性限 （R ） 10.2 的情况 不超 过5 %， 再现 性 限（R ）按 附录F 数 据采 用 线性内 插法 求得 。 11 定量限 本方法 中氯虫苯甲酰胺 、溴氰虫 酰胺、氟苯虫酰 胺在水中 定量限均为0.1 g/L ，环 溴虫酰胺、四 氯虫酰 胺在 水中 定量 限均 为0.5 g/L 。 DB 37/T 4477 2021 5 A A 附录A （资料 性） 5 种双 酰胺 类杀 虫剂 中英 文名称 、CAS 号 及分
17、 子式 信息 5种双 酰胺 类杀 虫剂 中英 文 名称、CAS 号及 分子 式信 息 见表A.1 。 表A.1 5 种双 酰胺 类杀 虫剂 中英 文名称 、CAS 号 及分 子式 信息 序号 附录 B E 中序号 农药中文名称 农药英文名称 CAS 号 分子式 1 2 氯虫苯甲酰胺 chlorantraniliprole 500008-45-7 C18H14N5O2Cl2Br 2 1 溴氰虫酰胺 cyantraniliprole 736994-63-1 C19H14BrClN6O2 3 4 环溴虫酰胺 cyclaniliprole 1031756-98-5 C21H17Br2Cl2N5O2 4
18、 5 氟苯虫酰胺 flubendiamide 272451-65-7 C23H22F7IN2O4S 5 3 四氯虫酰胺 tetrachlorantraniliprole 1104384-14-6 C17H10BrCl4N5O2 DB 37/T 4477 2021 6 B B 附录B （资料 性） 质谱仪 参数 液相色 谱- 串联 质谱 仪的 质 谱仪参 数： a) 扫描方 式： 正/ 负离 子扫 描 ； b) 检测方 式： 多反 应监 测； c) 离子源 ：电 喷雾 离子 源（ESI ）； d) 电离电 压：4.0 kV ； e) 加热块 温度 ：400 ； f) DL 管 温度 ：250 ；
19、 g) 检测器 电压 ：1.74 kV ； h) 碰撞气 ：氩 气； i) 碰撞气 压力 ：0.23 MPa j) 雾化气 流速 ：3.0 L/min ； k) 干燥气 流速 ：10.0 L/min ； l) 加热气 流速 ：10.0 L/min 。 DB 37/T 4477 2021 7 C C 附录C （资料 性） 5 种双 酰胺 类杀 虫剂 监测 离子对 、碰 撞电 压和 保留 时间 5种双 酰胺 类杀 虫剂 监测 离 子对、 碰撞 电压 和保 留时 间见表C.1 。 表C.1 5 种双 酰胺 类杀 虫剂 监测 离子对 、碰 撞电 压和 保留 时间 序号 中文名称 保留时间 min 扫描
20、方式 定量离子 碰撞电压 V 定性离子 碰撞电压 (V) 1 溴氰虫酰胺 4.473 正离子 474.70/285.85 -18 474.70/443.95 -18 2 氯虫苯甲酰胺 4.849 正离子 483.90/452.90 -19 483.90/285.90 -17 3 四氯虫酰胺 5.260 正离子 539.00/507.80 -20 539.00/319.90 -15 4 环溴虫酰胺 5.320 正离子 603.10/286.00 -20 603.10/284.85 -25 5 氟苯虫酰胺 5.318 负离子 681.00/254.05 28 681.00/273.80 16 DB
21、 37/T 4477 2021 8 D D 附录D （资料 性） 5 种双 酰胺 类杀 虫剂 多反 应监测 （MRM ） 色谱 及质 谱 图 5种双 酰胺 类杀 虫剂 多反 应 监测（MRM ）色 谱及 质谱 见 图D.1 D.5 。 图D.1 溴氰虫 酰胺 图D.2 氯虫苯 甲酰 胺 图D.3 四氯虫 酰胺 DB 37/T 4477 2021 9 图D.4 环溴虫 酰胺 图D.5 氟苯虫 酰胺 DB 37/T 4477 2021 10 E E 附录E （资料 性） 实验室 重复 性限 （r ）数 据 表 实验室 重复 性限 （r ）数 据 表见表E.1 。 表E.1 实验室 重复 性限 （r
22、 ）数 据 表 序号 农药名称 含量 g / L 重复性限 含量 g / L 重复性限 含量 g / L 重复性限 含量 g / L 重复性限 1 溴氰虫酰胺 0.1 0.020 0.5 0.092 1.0 0.17 5.0 0.65 2 氯虫苯甲酰胺 0.1 0.017 0.5 0.074 1.0 0.25 5.0 0.77 3 四氯虫酰胺 0.5 0.12 1.0 0.15 5.0 0.76 4 环溴虫酰胺 0.5 0.096 1.0 0.11 5.0 0.67 5 氟苯虫酰胺 0.1 0.011 0.5 0.061 1.0 0.14 5.0 0.53 DB 37/T 4477 2021
23、11 F F 附录F （资料 性） 实验室 再现 性限 （R ）数 据 表 实验室 再现 性限 （R ）数 据 表见表F.1 。 表F.1 实验室 再现 性限 （R ）数 据 表 序号 农药名称 含量 g / L 再现性限 含量 g / L 再现性限 含量 g / L 再现性限 含量 g / L 再现性限 1 溴氰虫酰胺 0.1 0.031 0.5 0.11 1.0 0.19 5.0 0.66 2 氯虫苯甲酰胺 0.1 0.027 0.5 0.10 1.0 0.28 5.0 1.1 3 四氯虫酰胺 0.5 0.14 1.0 0.34 5.0 0.75 4 环溴虫酰胺 0.5 0.11 1.0 0.13 5.0 1.2 5 氟苯虫酰胺 0.1 0.015 0.5 0.077 1.0 0.17 5.0 0.93
