1、ICS 67.120.30 CCS B 50 浙江省 地 方 标 准 DB33/T 2411 2021 渔业环境 中除草剂 农药多组 分残留量 测定 气相色谱- 质谱法 Determination of herbicides pesticide multiresidues in fishery environment by gas chromatography-mass spectrometry 2021 - 12 - 24 发布 2022 - 01 - 24 实施 浙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 33DB33/T 24112021 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1
2、2 规 范性 引用 文件 . 1 3 术 语和 定义 . 1 4 原理 . 1 5 试 剂或 材料 . 1 6 仪 器设 备 . 2 7 样品 . 2 8 试 验步 骤 . 2 9 试 验数 据分 析 . 4 10 方 法的 定量 限、 准确 度和精 密度 . 5 附录A （资 料性 ） 除草 剂特征 离子 . 6 附录B （资 料性 ） SIM 模 式下 8 种除 草剂 的总 离子 流图 . 7 DB33/T 24112021 II 前 言 本标准 按照GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第1 部分 ： 标准 化文件 的结 构和 起草规 则 的规定 起 草。 本标准 的某 些内
3、 容可 能涉 及专利 。本 标准 的发 布机 构不承 担识 别 专 利的 责任 。 本标准 由浙 江省 农业 农村 厅 提出 。 本标准 由浙 江省 水产 标准 化技术 委员 会归 口。 本标准 起草 单位 ：浙 江省 海洋水 产研 究所 。 本标准 主要 起草 人： 李铁 军、郝 青、 郭远 明、 孙秀 梅、金 衍健 、胡 红美 。 DB33/T 24112021 1 渔 业环境 中除草剂 农药多 组分残留 量测定 气 相色谱- 质 谱法 1 范围 本标准 规定 了 渔 业环 境中8 种除草 剂农 药多 组分 残留 量气相 色谱-质 谱法 测定 的 原理、 试剂 材料 、 仪 器设备 、样
4、品、 试验 步骤 、定量 分析 、定 量限 、准 确度和 精密 度 。 本 标准 适用 于渔 业环 境水 体和底泥 中 氟乐 灵、 二甲 戊灵、 甲草 胺、 乙 草胺、 丁草胺 、 西 玛津、 莠 去 津、扑 草净 等8 种除 草剂 残 留量的 定性 定量 分析 。 2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 标准 必 不可 少的 条款 。 其 中 ， 注日 期的 引用 文件 ， 仅该日 期对 应的 版本 适用 于 本标准 ； 不注 日期 的引 用文件 ， 其 最新 版本 （包 括所有 的修 改单 ） 适 用 于 本 标准。 GB/T 6682 20
5、08 分析 实 验室用 水规 格和 试验 方法 GB 17378.3 海 洋监 测规 范 第3部分:样 品采 集、 贮存与 运输 GB 17378.5 海 洋监 测规 范 第5部分:沉 积物 分析 HJ 493 水 质采 样 样品 的保存 和管 理技 术规 定 SC/T 9102.3 渔业 生态 环 境监测 规范 第3部分:淡水 3 术语和 定义 本标准 没有 需要 界定 的术 语和定 义。 4 原理 水体中 的除 草剂 残留 用二 氯甲烷 和正 己烷 萃取 ， 中 性氧化 铝固 相萃 取柱 净化 ； 底泥 中的 除草 剂 残 留 用正己烷和乙酸乙酯混合 溶剂超声提取，铜粉除去 硫化物，石墨化
6、碳黑- 中性 氧化铝复合固相萃取柱净 化。气 相色 谱- 质谱 法测 定 ，外标 法定 量。 5 试剂或 材料 5.1 实验用 水： 符合 GB/T 6682 2008 一 级水 要求 。 5.2 除草剂 标准 溶液 ：氟 乐灵 、二甲 戊灵 、甲 草胺 、乙 草胺、 丁草 胺、 西玛 津、 莠去津 、扑 草净 标准 溶液均 为单 一成 分的 有证 标准溶 液， 浓度 均为 100 g/mL ， 或购 买纯 度97 % 的有证 标准 物质 ，进 行配 制。 5.3 除草剂 混合 标准 储备 溶液 ：准确 移取 适量 的氟 乐灵 、二甲 戊灵 、甲 草胺 、乙 草胺、 丁草 胺、 西玛 津、 莠
7、 去津、 扑草 净标准 储 备 溶 液， 用 正己 烷稀 释 成各组 分浓 度均 为1 g/ m L 的混 合标 准溶 液，-18 冰箱中 避光 保存 ，有 效期 为六个 月。 DB33/T 24112021 2 5.4 二氯甲 烷： 色谱 纯。 5.5 正己烷 ： 色 谱纯 。 5.6 丙酮： 色谱 纯。 5.7 正己烷-乙 酸乙 酯混 合溶 剂 （1+1 ）：取 1 体积 正己 烷 和 1 体 积乙 酸乙 酯混 合均 匀。 5.8 正己烷-二 氯甲 烷-丙 酮混 合溶剂 （2+1+1 ） ：取 2 体 积正己 烷，1 体积 二氯 甲 烷和 1 体积 丙酮 混 合 均匀。 5.9 无水硫 酸
8、钠 ： 分 析纯 ，650 灼烧 4 h ，置 于干 燥器 中冷却 后 ， 密闭 贮存 备用 。 5.10 盐酸： 优级 纯， 密 度 1.18 g/mL。 5.11 盐酸溶 液 （1+1 ）：将 1 体 积盐酸 和1 体积 水混 合均 匀， 冷 却备 用。 5.12 铜粉（200 目， 纯度99.7 %）： 盐酸 溶液 （1+1 ）浸泡 30 min ， 倾去 盐酸 溶液 ，去离 子水 洗至 中 性，再 用丙 酮 洗 涤三 次 ， 氮气吹 干， 充氮 气保 存于 具塞玻 璃瓶 中。 5.13 石墨化 碳黑 ：100 目200 目。 5.14 微孔滤 膜 ： 纤维 素滤 膜，0.45 m， 直
9、径6 cm 。 5.15 中性氧 化铝 固相 萃取 柱 ：1 000 mg ，6 mL， 或性 能相 当者。 5.16 石墨化 碳黑-中 性氧 化铝 复 合固相 萃取 柱： 称 取 20 mg 石墨化 碳黑 ，填 充于 中性 氧化铝 固相 萃取 柱中， 洗耳 球敲 打柱 身使 其紧实 ，再 加1 g 无 水硫 酸钠。 6 仪器设 备 6.1 气相色谱- 质谱 仪， 配有 电 子轰击 （EI ）源 。 6.2 电子 天 平： 最小 分度 值 分 别为0.1 mg 和0.01 g。 6.3 离心机：5 000 r/min 。 6.4 旋涡 混 合器 。 6.5 固相萃 取装 置。 6.6 旋转蒸
10、发仪 。 6.7 超声 清 洗机 ，40 kHz 。 6.8 氮吹仪 。 7 样品 7.1 水样采 集与 保存 按GB 17378.3 及SC/T 9102.3 规定 ，现 场采 集1 L水样 装入棕 色小 口玻 璃瓶 中， 盖紧， 避光 运回 实 验 室， 按HJ 493 规 定样 品 于2 8 冷 藏、 避光 保存 ，72 h 内完 成萃 取和 分析 测定 。 7.2 底泥的 采集 、制 备与 保存 按GB 17378.3 及SC/T 9102.3 规定 ，现场 采集底 泥样 品装入 棕色广 口玻璃 瓶中 ，密闭 ，避光 运回 实 验室。 剔除 砾石 和杂 物， 混合均 匀， 密闭 冷藏
11、保存 ， 样品 含水 率测 定按GB 17378.5 执行 ，30 d 内完 成 提 取和分 析测 定 。 8 试验步 骤 8.1 水体样 品全 处理 DB33/T 24112021 3 8.1.1 提取 若样品 混浊 ，预 先抽 滤过 微孔滤 膜。 量取 试样 上清 液200 mL， 移入500 mL分 液 漏斗中 ， 加20 mL 二氯 甲烷， 剧烈振 摇3 min （ 注 意放气） ，静 置，待 上层 水 相澄清 后，下 层有 机相过 装有10 g无水 硫酸 钠的小 漏斗 ， 收 集于 鸡心 瓶中 ； 用20 mL 正 己烷 ， 重 复萃 取1 次， 静置 分层 后， 弃去 下 层水相
12、， 将 正 己烷 相过 无 水硫酸 钠 ， 与 二氯 甲烷 相 合并 收 集于 鸡心 瓶中 ， 在 萃取过 程中 出现 乳化 现象 时， 采用 玻璃 棉过 滤方 法 破 乳。 8.1.2 净化 将8.1.1 的提 取液 于40 水浴减 压浓缩 至近 干，加 入0.5 mL 正己 烷 溶 解残渣 ， 使用 中性氧 化铝 固 相 萃取柱 对提 取液 进行 净化 ： 用5 mL 正己 烷活 化萃 取柱 ， 待 正己 烷液 面与 萃取 柱 填料相 平时 ， 将 复 溶液 全 部转移 至萃取 柱上 ，再 用4 mL二氯 甲烷- 正己 烷-丙酮 混合溶 剂 按1 mL、1 mL、2 mL的顺 序 分3 次
13、洗涤 鸡心 瓶，洗涤 液一并上柱 ，收集流出液 ；将流出液氮吹至近干， 残渣用正已烷溶解 并定容 至1.00 mL ，转 移 至进样 瓶中 供气 相色 谱- 质谱分析 。 8.2 底泥样 品前 处理 8.2.1 提取 称取试 样（湿样）10 g 于50 mL 具塞离心管中，加20 mL 正已烷 乙酸乙酯 混合溶剂，涡 旋混合，浸 泡30 min ， 超 声萃 取30 min ；5 000 r/min 离心5 min ， 上层有 机相 过无 水硫 酸钠 （约5 g） 收集 于鸡 心瓶 中； 再加入20 mL 正 已烷- 乙酸 乙酯混 合液 ，重 复提 取1 次 ，合并 提取 液。 8.2.2 净
14、化 在8.2.1 的提 取液 中加入3 g5 g 铜 粉， 充分涡 旋混 合脱硫 ，静置1 h2 h， 期 间多次 充分涡 旋后 ， 按照8.1.2 的步 骤， 使用 石 墨化炭 黑- 中性 氧化 铝复 合 固相萃 取柱 进行 后续 净化 。 8.3 样品测 定 8.3.1 色谱柱 ：DB-35 MS 毛细 管 气相色 谱柱 ，30 m 0.25 mm 0.25 m； 或性 能相 当 者。 8.3.2 进样口 温度 ：260 。 8.3.3 载气： 高纯 氦气 （纯 度 99.999 %） ，流速 1.0 mL/min 。 8.3.4 升温程 序： 初 始温 度 80 ，以 10 /min 的
15、 速率 升至120 ， 再以 15 /min 的速 率升 至210 ， 最后 以7 /min 的 速率 升 至 270 ，保持 5 min 。 8.3.5 进样方 式： 不分 流进 样。 8.3.6 进样量 ：1 L 。 8.3.7 离子源 ：EI 源 ，电 离能 量 为 70 eV 。 8.3.8 离子源 温度 ：260 。 8.3.9 传输线 温度 ：260 。 8.3.10 检测方 式： 选择 离子 监测 模式（SIM ）。 8.3.11 溶剂延 迟时 间：5 min 。 8.3.12 驻留时 间：100 ms 。 8.4 标准工作 曲 线的 绘制 准确吸 取适 量的 除草 剂混 合标准
16、 储备 溶 液 ，用 净化 过的空 白样 品提 取液 稀释 成5 g/L ，10 g / L ， 20 g/L ，50 g/L ，100 g/L ，200 g/L ，500 g/L 系 列的 除草 剂标 准工 作 溶液。 按8.3的 样品 测定DB33/T 24112021 4 条件 ， 分 别取 上述 标准 工 作溶液 和试 样溶 液进 样 ， 以峰面 积为 纵坐 标 ， 以 对 应浓度 为横 坐标 绘制 标准 工 作曲线 ， 用 该标 准工作 曲 线对样 品中 的除 草剂 进行 定 量分 析， 标准 溶液 及试 样溶液 中 各 待测 组 分 的 响应 值均应 在仪器 检测 的线性 范围之
17、内，否 则需 稀释后 进样。8 种除 草剂的 特征 离 子和标 准溶液 总离 子流 图 参见附 录A 、附 录B。 8.5 空白试 验 除不加 试样 外， 均按8.1 8.4进 行。 8.6 平行试 验 按8.1 8.4 ，对 同一 试样 进行平 行试 验测 定。 9 试验数 据分 析 9.1 定性分 析 以保留 时间 进行 定性 分析 ， 在相 同的 仪器 条件 下， 样 品中目 标化 合物 和标 准工 作 溶液 中目 标化 合 物 色谱峰的 保留时间相比较 ， 偏差在 5 % 以内，则可判断试样 中存在对应的待测物。若 有阳性样品 ， 可 全扫描 定性 。 9.2 定量分 析 9.2.1
18、水样结 果计 算 水体 中 待测 除草 剂 含 量按 （1） 式计 算 ， 计算 结果 需 扣除空 白值 。 s 0 V n V C C X ） - （ . (1) 式中： X 试 样中 各待 测组 分 含量 ， g/L ； C 根 据标 准工作 曲 线 得到的 试样 提取 液中 待测 组分的 含量 ， g/L ； C 0 根据 标准 工作 曲线 得到的 空白 试样 提取 液中 待测组 分的 含量 ， g/L ； V 试 样定 容体积 ，L ； n 稀释 倍数 ； V s 取 样量 ，L 。 9.2.2 沉积物 结果 计算 沉积物 中待测 除 草剂 含量 按（2 ）式 计算 ，计 算结 果 需
19、扣除 空白 值。 ） - 1 （ ） - （ W M n V C C X 0 . (2) 式中： X 试 样中 各待 测组 分 含量， g/kg ； C 根 据标 准工作 曲 线 得到的 试样 提取 液中 待测 组分的 含量 ， g/L ； C 0 根据 标准 工作 曲线 得到的 空白 试样 提取 液中 待测组 分的 含量 ， g/L ； V 试 样定 容体 积，L ； n 稀释 倍数 ； W 含水 率，% ； DB33/T 24112021 5 M 取样 量，kg 。 10 方法的 定量 限、 准确 度和 精密度 10.1 定量限 取样量 为200 mL ， 最终 定容 体积为1.00 mL
20、 时， 水体 中 氟乐灵 、 二甲 戊灵 、 甲草 胺、 乙草 胺 、 丁 草胺、 西玛津、 莠去津 、扑草 净 的定量限 均为0.05 g/L； 称样量为10 g，最 终定容 体积为1.00 mL 时，底 泥中 氟乐灵 、二 甲戊 灵、 甲草 胺、乙 草胺 、丁 草胺 、西 玛津、 莠去 津、 扑草 净 的 定量限 均为1.0 g/kg。 10.2 准确度 水 体中8 种除 草 剂添加浓 度 为0.05 g/L2 g/L时， 回收率为70 % 120 %； 底 泥中8种除草剂 添加 浓度2 g/kg80 g/kg 时 ，回收 率为70 % 120 %。 10.3 精密度 除草剂 各组 分的
21、两次 独立 测定结 果绝 对差 值不 得超 过算术 平均 值 的15 % 。 DB33/T 24112021 6 A A 附 录 A （资料 性） 除草剂 特征 离子 表A.1 给出 了8种 除草 剂特 征离子 。 表A.1 8 种除 草剂 特征 离子 中文名称 英文名称 CAS 号 特征离子（m/z） 保留时间 (min) 定量离子 定性离子 氟乐灵 trifluralin 1582-09-8 306.1 264.0 9.737 二甲戊灵 pendimethalin 40487-42-1 252.1 162.1 14.310 甲草胺 alachlor 15972-60-8 160.1 188
22、.2 12.715 乙草胺 acetochior 34256-82-1 146.1 162.1 12.484 丁草胺 butachlor 23184-66-9 176.1 160.1 14.689 莠去津 artrazine 1912-24-9 200.1 215.1 11.544 西玛津 simazine 122-34-9 201.1 186.1 11.648 扑草 净 prometryn 7287-19-6 241.1 184.0 13.007 B C DB33/T 24112021 7 D B 附 录 B （资料 性） SIM 模 式下8 种 除草 剂的 总离子 流图 图B.1 给出 了SIM 模式 下8 种 除草剂 的总 离子 流图 。 标引序号 说明： 1 氟乐灵；2 莠去津；3 西玛津； 4 乙草胺； 5 甲草胺；6 扑草净；7 二甲戊灵；8 丁草胺。 图B.1 SIM 模 式下8 种 除草 剂的 总离子 流图 _
