1、 ICS 65.020.20 CCS B 05 黑龙江省地方标准 DB23 DB23/T 3129 2022 欧石竹组 培育苗技 术规程 2022-03-03 发布 2022-04-02 实施 黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB23/T 31292022 I 前 言 本 文件 依据 GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第 1 部分 ：标 准化 文件 的 结构和 起草 规则 的 规 定起草 。 请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。 本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任 。 本文件 由 黑 龙江 省农 业农 村厅提 出。 本文件 起草
2、单位 ：东 北农 业大学 。 本文件 主要 起草 人： 王金 刚、张 海珍 、杨 雅涵 、钮 志勇、 乔坤 、周 爱民 、龚 束芳。 DB23/T 31292022 1 欧 石竹组 培育苗技 术规程 1 范围 本文件规定了欧石竹（Dianthus carthusianorum L. ） 组培育苗的 环境与设备消 毒、培养基配制、外 植体制 备、 培养 条件 、 初 代培养 、 继 代培 养、 壮苗 培养、 生根 培养 、 炼 苗、 温 室移栽 与管 理及 生产 档案 。 本文件 适用 于欧 石竹 的组 培育苗 。 2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的 。
3、凡 是注 日 期的引 用文 件， 仅注 日期 的 版本适 用于 本文 件。 凡是不 注日 期的 引用 文件 ，其最 新版 本（ 包括 所有 的修改 单） 适用 于本 文件 。 GB/T 8321 （所 有部 分） 农药 合理 使用 准则 LY/T 1882-2010 林木 组 织培养 育苗 技术 规程 NY/T 1276 农药 安全 使 用规范 总则 NY/T 2306-2013 花 卉种 苗组培 快繁 技术 规程 3 术语 和 定义 本文件 没有 需要 界定 的术 语和定 义。 4 环境 与 设备 消毒 4.1 接种 室消 毒 接种室 消毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.6 进行
4、 。 4.2 培养 室消 毒 培养室 消毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.7 进行 。 4.3 超净 工作 台消 毒 超净工 作台 消毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.5、8.6 进行 。 4.4 接种 器具 消毒 接种器 具消 毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.4 进 行。 5 培 养基 配制 5.1 母液 配制 培养基 母液 配制 按 NY/T 2306-2013 中 7.3 执行 。 DB23/T XXXX XXXX 2 5.2 培养 基配 制 5.2.1 培 养基 配方 培养基 配制 成分 如下 ： a) 初代 培养 基：MS 蔗糖30 g/L 琼脂
5、 粉8 g/L ，pH 值5.8 6.0 ； b) 继 代培 养基 ：MS 0.5 mg/L 6-BA 1.5 mg/L 2,4-D 0.1 mg/L NAA 蔗糖30 g/L 琼脂 8 g/L ，pH 值5.8 6.0 ； c) 壮苗 培养 基：1/2 MS 1.0 mg/L IBA 蔗糖30 g/L 琼脂粉8 g/L ，pH 值5.8 6.0 ； d) 生 根培 养基 ：1/2 MS 蔗糖30 g/L 琼脂 粉8 g/L ，pH 值5.8 6.0 。 5.2.2 培 养基 配制 方法 培养基 配制 方法 按 NY/T 2306-2013 中 7.4 执行 。 5.3 培养 基灭 菌 及 保
6、存 培养基 灭菌 及保 存方 法 按 LY/T 1882-2010 中 4.2 进行 。 6 外 植体 制备 6.1 外植 体选 择 选取当 年生 的嫩 茎作 为外 植体， 宜晴 天剪 取。 6.2 外植 体处 理 取 10 cm 的茎 段， 流水 冲洗 3 h， 在超 净工 作台 中，先 用 75% 乙 醇溶 液消 毒 10 s 后 ，用 无菌 水 冲洗 3 次 ，加 2% 次 氯酸 钠溶液 消 毒 5 min ，再用 无 菌水冲 洗 4 5 次， 用滤 纸 吸干 外植 体表 面水 分 。 7 培 养条 件 无菌 培 养室 温度 控制 在21 25 ， 相 对空 气 湿度控 制在60% 80
7、% ， 光 照强度 为2000 Lux 3000 Lux ，光照时 间为12 h/d 14 h/d 。 8 初 代培 养 将 消毒 后的 外植 体 切 成 1 cm 2 cm 的茎段， 每段 至 少带 有 1 个2 个 叶芽 ， 将切好 的外 植体 接种 到初代 培养 基中 ，培 养 21 d28 d。 9 继 代培 养 将分化 的不 定芽 转接 入继 代培养 基中 ，6 个/ 瓶 10 个/ 瓶 ，培 养 28 d35 d ，分割 新长 出的 不定 芽，可 按需 求重 复继 代。 10 壮 苗培 养 切取继 代培 养高 度 1.0 cm 的不定芽， 转接 至壮 苗 培养基 中， 6 个/ 瓶
8、8 个/瓶， 培 养 14 d21 d 。 DB23/T 31292022 3 11 生 根培 养 壮苗培 养基 中组 培苗 高度 2.0 cm 时， 将小 苗转 入 生根培 养基 中 8 株/ 瓶 10 株/ 瓶。 当 小苗 基部 长出健 壮的 3 条不 定根 ，根长 为 0.5 cm 2.0 cm 时，可 进行 炼苗 。 12 炼苗 将生根 培养 组培 苗转 移到 过渡培 养间 ，半 开瓶 口1 d 2 d 后， 敞开 瓶口 炼苗2 d 3 d 后可 移栽 。 13 温 室移 栽与 管理 13.1 基质 制备 将草炭 土和 蛭石 按体 积比 为1:1 混 合， 装入50 孔的 穴盘中 。
9、栽植 前用 多菌 灵 可湿粉 剂0.5 g/L 溶液浇 透消毒24 h 。农 药使 用 应 符合GB/T 8321 和NY/T 1276 的规 定执 行。 13.2 组培 苗移 栽 炼苗后 取出幼 苗, 用清水 洗净根 部培养 基,将 幼苗栽 入淋透 水的基 质中 ，压实 小苗周 围的基 质， 浇 透水， 覆70% 遮 阳网 。 13.3 移栽 苗管 理 适时浇 水 ， 保 持基 质湿 润； 移栽5 d7 d 后 ， 去 掉遮 阳 网， 浇1/2 MS 营养 液1 次； 温度控 制在20 28 ，空 气相 对湿 度60% 80% 。 14 生 产档 案 应建立 生产 档案 ， 内 容包 括： 环 境与 设备 消毒、 培 养基配 制、 外植 体制 备、 培养条 件、 初代 培养、 继代培 养、 壮苗 培养 、生 根培养 、 炼 苗、 温室 移栽 与管理 等。
