1、I C S 6 5 . 0 2 0 . 2 0 C C S B 1 6 黑 龙 江 省 地 方 标 准 D B 2 3 / T 3 0 7 8 - 2 0 2 2 旱 晚 播 水 稻 稻 瘟 病 活 体 接 种 抗 病 性 鉴 定 技 术 规 程 2 0 2 2 - 0 1 - 2 9 发 布 2 0 2 2 - 0 2 - 2 8 实 施 黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB23D B 2 3 / T 3 0 7 8 - 2 0 2 2 I 前 言 本 文 件 按 照 G B / T 1 . 1 - 2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分 ： 标 准
2、化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定 起 草 。 请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利 。 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的 责 任 。 本 文 件 由 黑 龙 江 省 农 业 农 村 厅 提 出 。 本 文 件 起 草 单 位 ： 黑 龙 江 省 农 业 科 学 院 生 物 技 术 研 究 所 。 本 文 件 主 要 起 草 人 ： 张 国 民 、 马 军 韬 、 邓 凌 韦 、 宋 显 东 、 王 春 荣 、 司 兆 胜 、 胡 亚 军 、 王 永 力 、 张 齐 凤 、 高 洪 儒 、 张 君 、 王 南 博
3、、 任 洋 。D B 2 3 / T 3 0 7 8 - 2 0 2 2 1 旱 晚 播 水 稻 稻 瘟 病 活 体 接 种 抗 病 性 鉴 定 技 术 规 程 1 范 围 本 文 件 规 定 了 旱 晚 播 水 稻 稻 瘟 病 活 体 接 种 抗 病 性 鉴 定 技 术 的 相 关 术 语 和 定 义 、 环 境 条 件 、 鉴 定 方 法 、 评 价 标 准 和 技 术 档 案 。 本 文 件 适 用 于 水 稻 稻 瘟 病 田 间 抗 性 鉴 定 。 2 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可
4、 少 的 条 款 。 其 中 ， 注 日 期 的 引 用 性 文 件 ， 仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件 ； 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。 N Y / T 3 2 5 7 水 稻 稻 瘟 病 抗 性 室 内 离 体 叶 片 鉴 定 技 术 规 程 N Y / T 3 6 8 5 水 稻 稻 瘟 病 抗 性 田 间 监 测 技 术 规 程 D B 2 3 / T 2 7 3 5 水 稻 穗 颈 瘟 人 工 接 种 鉴 定 技 术 规 程 3 术 语 与 定 义 下 列 术
5、 语 与 定 义 适 用 于 本 文 件 。 3 . 1 旱 晚 播 用 于 繁 殖 病 原 菌 的 蒙 古 稻 或 其 他 易 感 病 水 稻 品 种 ， 采 取 晚 播 种 、 旱 育 苗 的 田 间 管 理 方 式 。 3 . 2 活 体 接 种 在 适 宜 条 件 下 ， 将 病 原 菌 接 种 至 水 稻 活 体 幼 苗 ， 并 以 发 病 的 水 稻 活 体 幼 苗 为 发 病 中 心 ， 自 然 传 染 供 试 水 稻 品 种 （ 材 料 ） 进 行 田 间 抗 病 性 鉴 定 的 操 作 方 式 。 4 环 境 条 件 田 间 平 均 温 度 在 2 2 2 8 之 间 ， 平
6、 均 相 对 湿 度 8 0 % ， 遮 住 太 阳 的 直 射 光 ， 以 散 射 光 为 主 。 5 鉴 定 方 法 5.1 建 立 病 原 菌 繁 殖 圃 5.1.1 病 原 菌 的 繁 殖 以 蒙 古 稻 或 其 他 当 地 易 感 水 稻 品 种 作 为 活 体 寄 主 品 种 ， 水 稻 稻 瘟 病 菌 （ P y r i c u l a r i a o r y z a e ） 的 分 离 、 培 养 按 照 N Y / T 3 2 5 7 的 规 定 执 行 。D B 2 3 / T 3 0 7 8 - 2 0 2 2 2 5.1.2 病 原 菌 繁 殖 圃 的 建 立 旱 育
7、： 选 择 土 质 肥 沃 、 具 有 喷 灌 和 遮 阴 设 施 的 地 点 建 立 病 原 菌 繁 殖 圃 ， 面 积 与 鉴 定 病 圃 比 例 为 1 ： 6 0 。 病 原 菌 繁 殖 圃 做 旱 床 ， 较 常 规 多 施 氮 肥 3 0 % ， 蒙 古 稻 播 种 量 约 芽 种 6 0 0 g / , 播 种 前 浇 透 底 水 ， 播 种 后 覆 土 、 覆 盖 地 膜 , 同 时 加 扣 纱 网 式 遮 阴 棚 。 晚 播 ： 叶 瘟 鉴 定 时 ， 病 原 菌 繁 殖 圃 和 叶 瘟 鉴 定 圃 播 种 时 间 一 致 ， 6 月 1 0 日 前 播 种 ； 穗 颈 瘟
8、鉴 定 时 ， 病 原 菌 繁 殖 圃 播 种 时 间 也 是 6 月 1 0 日 前 完 成 播 种 。 5.1.3 病 原 菌 繁 殖 圃 接 种 根 据 供 试 水 稻 品 种 （ 材 料 ） 的 生 育 特 性 ， 选 取 适 应 生 态 区 的 稻 瘟 病 优 势 菌 群 ， 配 制 成 分 生 孢 子 悬 浮 液 ， 现 用 现 配 。 当 蒙 古 稻 幼 苗 长 至 3 叶 1 心 期 时 追 施 硫 酸 铵 1 0 0 g / m 2 , 选 取 第 二 天 晴 天 的 傍 晚 时 分 采 用 喷 雾 法 进 行 全 株 接 种 ， 连 续 接 种 2 3 次 ， 每 次 间
9、隔 1 d 。 接 种 完 成 后 遮 荫 、 保 湿 ， 确 保 圃 内 平 均 温 度 介 于 2 2 2 8 ， 平 均 相 对 湿 度 8 0 % 。 分 生 孢 子 悬 浮 液 的 配 制 按 照 D B 2 3 / T 2 7 3 5 的 规 定 执 行 。 5.2 抗 病 性 鉴 定 5.2.1 鉴 定 圃 的 建 立 选 择 土 质 肥 沃 、 水 源 方 便 及 遮 阴 避 风 的 旱 地 作 为 抗 病 性 鉴 定 圃 ， 避 免 使 用 老 病 圃 。 鉴 定 圃 采 用 旱 种 水 管 , 畦 高 3 0 c m ， 外 围 种 植 玉 米 、 高 粱 等 髙 秆 作
10、物 ， 遮 阴 避 风 , 确 保 环 境 相 对 湿 度 高 于 8 0 % 。 在 鉴 定 圃 四 周 播 种 蒙 古 稻 ， 作 为 感 染 行 ， 每 粒 种 子 间 距 约 0 . 5 c m ， 每 1 0 份 供 试 水 稻 品 种 （ 材 料 ） 加 蒙 古 稻 和 抗 病 对 照 品 种 各 1 份 。 叶 瘟 鉴 定 的 水 稻 品 种 （ 材 料 ） 采 用 条 播 方 式 ， 条 深 2 c m 、 条 宽 2 c m 、 条 长 2 5 c m 、 条 距 8 c m ， 每 份 水 稻 品 种 （ 材 料 ） 播 干 种 5 0 粒 左 右 ， 播 种 期 和 病
11、原 菌 繁 殖 圃 蒙 古 稻 播 种 期 一 致 。 穗 颈 瘟 鉴 定 的 水 稻 品 种 （ 材 料 ） 采 用 插 秧 方 式 ， 具 体 操 作 同 大 田 生 产 ， 播 种 期 在 4 月 1 5 日 。 选 取 生 产 上 多 年 表 现 稳 定 的 抗 病 品 种 1 0 份 ， 感 病 品 种 1 0 份 随 机 加 在 穗 颈 瘟 鉴 定 圃 内 。 5.2.2 鉴 定 圃 的 施 肥 管 理 叶 瘟 鉴 定 ， 3 叶 期 追 施 硫 酸 铵 2 0 0 g / m 2 , 床 土 水 分 达 饱 和 状 态 。 穗 颈 瘟 鉴 定 ， 接 种 前 7 d 再 次 追
12、施 硫 酸 铵 2 0 0 g / m 2 。 5.2.3 鉴 定 圃 接 种 当 病 原 菌 繁 殖 圃 的 蒙 古 稻 8 0 % 叶 片 产 生 典 型 病 斑 时 , 将 带 病 的 蒙 古 稻 连 根 带 土 移 植 到 鉴 定 圃 感 染 行 （ 蒙 古 稻 ） 中 间 , 形 成 对 感 染 行 的 再 次 侵 染 ， 然 后 自 然 传 染 供 试 水 稻 品 种 （ 材 料 ） 。 5 . 3 病 情 调 查 5 . 3 . 1 调 查 时 间 叶 瘟 鉴 定 在 接 种 后 7 d 9 d ， 感 染 行 蒙 古 稻 全 部 发 病 时 进 行 第 一 次 调 查 ， 连
13、续 调 查 2 次 ， 每 次 调 查 间 隔 7 d 。 穗 颈 瘟 鉴 定 在 接 种 后 1 4 d 1 8 d ， 感 染 行 蒙 古 稻 全 部 发 穗 颈 瘟 时 进 行 第 一 次 调 查 ， 连 续 调 查 2 次 ， 每 次 调 查 间 隔 1 0 d 。D B 2 3 / T 3 0 7 8 - 2 0 2 2 3 5 . 3 . 2 调 查 方 法 叶 瘟 按 病 情 分 级 标 准 进 行 调 查 、 记 录 。 同 株 水 稻 ， 只 记 录 发 病 最 严 重 叶 片 的 发 病 级 别 ； 同 一 水 稻 品 种 （ 材 料 ） ， 只 记 录 发 病 最 严 重
14、 植 株 的 发 病 级 别 ， 结 果 记 入 表 A . 1 中 。 穗 颈 瘟 按 病 情 分 级 标 准 进 行 调 查 、 记 录 ， 同 时 调 查 每 个 水 稻 品 种 （ 材 料 ） 和 所 有 对 照 品 种 的 抽 穗 期 。 同 株 水 稻 ， 只 记 录 穗 颈 瘟 发 病 最 严 重 分 蘖 的 发 病 级 别 ； 同 一 水 稻 品 种 （ 材 料 ） ， 只 记 录 穗 颈 瘟 发 病 最 严 重 植 株 的 发 病 级 别 ， 结 果 记 入 表 A . 1 中 。 5 . 3 . 3 病 情 分 级 标 准 叶 瘟 病 情 按 以 下 标 准 分 级 ： 0
15、 级 ： 全 叶 片 无 病 。 1 级 ： 叶 片 上 有 针 尖 大 小 的 褐 色 坏 死 斑 。 2 级 ： 叶 片 上 有 较 大 （ 直 径 1 m m 2 m m ） 的 褐 色 坏 死 斑 ， 但 无 典 型 的 病 斑 。 3 级 ： 有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑 ， 病 斑 面 积 比 例 2 % 。 4 级 ： 有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑 ， 2 % 病 斑 面 积 比 例 5 % 。 5 级 ： 有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑 ， 5 % 病 斑 面 积 比 例 1 0 % 。 6 级 ： 有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑 ， 1 0 % 病 斑 面
16、 积 比 例 2 5 % 。 7 级 ： 有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑 ， 2 5 % 病 斑 面 积 比 例 5 0 % 。 8 级 ： 有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑 ， 5 0 % 病 斑 面 积 比 例 7 5 % 。 9 级 ： 有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑 ， 病 斑 面 积 比 例 7 5 % 。 叶 瘟 病 情 分 级 按 照 N Y / T 3 6 8 5 的 规 定 执 行 。 穗 颈 瘟 病 情 按 以 下 标 准 分 级 ： 0 级 ： 整 穗 无 穗 颈 瘟 、 枝 梗 瘟 和 谷 粒 瘟 ； 1 级 ： 仅 有 谷 粒 瘟 ， 发 病 子 粒 比 例
17、 2 % ； 2 级 ： 仅 有 谷 粒 瘟 ， 2 % 发 病 子 粒 比 例 5 % ； 3 级 ： 有 谷 粒 瘟 和 枝 梗 瘟 ， 5 % 产 量 损 失 率 1 0 % ； 4 级 ： 有 谷 粒 瘟 和 枝 梗 瘟 ， 1 0 % 产 量 损 失 率 2 0 % ； 5 级 ： 有 谷 粒 瘟 和 枝 梗 瘟 ， 2 0 % 产 量 损 失 率 3 0 % ； 6 级 ： 有 谷 粒 瘟 和 枝 梗 瘟 ， 或 穗 颈 瘟 ， 3 0 % 产 量 损 失 率 5 0 % ； 7 级 ： 有 谷 粒 瘟 和 枝 梗 瘟 ， 或 穗 颈 瘟 ， 5 0 % 产 量 损 失 率 6 0
18、 % ； 8 级 ： 仅 有 穗 颈 瘟 ， 6 0 % 产 量 损 失 率 7 0 % ； 9 级 ： 仅 有 穗 颈 瘟 ， 产 量 损 失 率 7 0 % 。 穗 颈 瘟 病 情 分 级 按 照 D B 2 3 / T 2 7 3 5 的 规 定 执 行 。 6 评 价 标 准 6 . 1 接 种 有 效 性 评 价 当 感 病 对 照 品 种 蒙 古 稻 的 叶 瘟 或 穗 颈 瘟 发 病 典 型 且 完 全 时 ， 视 为 接 种 有 效 。 6 . 2 调 查 数 据 登 记 与 计 算 将 2 次 田 间 调 查 数 据 取 最 高 值 ， 确 定 每 个 水 稻 品 种 （ 材
19、 料 ） 叶 瘟 或 穗 颈 瘟 的 最 终 发 病 级 别 ， 登 记 到 表 A.1 中 。D B 2 3 / T 3 0 7 8 - 2 0 2 2 4 6 . 3 抗 病 性 评 价 抗 叶 瘟 潜 力 评 价 ： 将 供 试 水 稻 品 种 （ 材 料 ） 最 高 发 病 级 别 与 对 照 品 种 最 高 发 病 级 别 的 比 值 作 为 评 价 抗 叶 瘟 能 力 的 标 准 ， 比 值 越 低 ， 抗 病 性 越 强 。 抗 穗 颈 瘟 能 力 评 价 ： 以 抽 穗 期 为 横 坐 标 （ X 轴 ） ， 发 病 级 别 为 纵 坐 标 （ Y 轴 ） ， 1 0 个 抗
20、病 对 照 品 种 的 坐 标 在 X - Y 平 面 上 形 成 点 状 分 布 ， 连 接 各 点 形 成 抗 病 标 准 曲 线 ， 依 此 原 理 形 成 感 病 标 准 曲 线 。 如 果 供 试 水 稻 品 种 （ 材 料 ） 的 坐 标 位 于 抗 病 标 准 曲 线 之 下 ， 判 断 为 抗 病 材 料 （ R ） ； 如 果 坐 标 位 于 感 病 标 准 曲 线 之 上 ， 判 断 为 感 病 材 料 （ S ） ； 如 果 坐 标 位 于 两 条 标 准 曲 线 之 间 ， 判 断 为 中 抗 材 料 （ M R ） 。 7 技 术 档 案 建 立 旱 晚 播 水 稻
21、稻 瘟 病 活 体 接 种 抗 病 性 鉴 定 技 术 档 案 ， 包 括 环 境 条 件 、 鉴 定 方 法 、 评 价 标 准 及 试 验 数 据 等 。D B 2 3 / T 3 0 7 8 - 2 0 2 2 5 附 录 A 资 料 性 附 录 水 稻 稻 瘟 病 田 间 调 查 A . 1 水 稻 稻 瘟 病 田 间 调 查 见 表 A.1 和 A.2 。 表 A . 1 水 稻 稻 瘟 病 田 间 调 查 记 录 表 调 查 时 间 ： 水 稻 品 种 （ 材 料 ） 名 称 ： 生 育 期 ： 重复 叶瘟发病级别 穗颈瘟发病级别 第一次调查 第二次调查 最高值 第一次调查 第二次调查 最高值 重复 I 重复 I I 重复 I I I
