1、I C S 6 5 . 0 2 0 C C S B 1 5 22 吉 林 省 地 方 标 准 D B 2 2 / T 3 3 1 5 2 0 2 1 利 用 共 寄 生 繁 育 赤 眼 蜂 生 产 技 术 规 程 C o d e o f p r a c t i c e f o r T r i c h o g r a m m a b r e e d i n g b y S y m p a r a s i t i s m 2 0 2 1 - 1 1 - 2 6 发 布 2 0 2 1 - 1 2 - 1 5 实 施 吉 林 省 市 场 监 督 管 理 厅 发 布D B 2 2 / T 3 3 1
2、5 2 0 2 1 I 前 言 本 文 件 按 照 G B / T 1 . 1 2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分 ： 标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定 起 草 。 请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利 。 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的 责 任 。 本 文 件 由 吉 林 省 农 业 农 村 厅 提 出 并 归 口 。 本 文 件 起 草 单 位 ： 吉 林 农 业 大 学 （ 农 业 现 代 化 综 合 技 术 研 究 所 ） 。 本 文 件 主 要 起 草 人 ： 张 雪
3、、 张 俊 杰 、 杜 文 梅 、 阮 长 春 。D B 2 2 / T 3 3 1 5 2 0 2 1 1 利 用 共 寄 生 繁 育 赤 眼 蜂 生 产 技 术 规 程 1 范 围 本 文 件 确 立 了 利 用 柞 蚕 卵 共 寄 生 繁 育 螟 黄 赤 眼 蜂 和 松 毛 虫 赤 眼 蜂 的 工 艺 流 程 ， 规 定 了 生 产 计 划 、 工 厂 化 生 产 等 阶 段 的 操 作 指 示 ， 描 述 了 过 程 记 录 等 追 溯 方 法 。 本 文 件 适 用 于 工 厂 化 生 产 共 寄 生 赤 眼 蜂 。 2 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 中 的 内 容 通
4、 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款 。 其 中 ， 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件 ； 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。 本 文 件 没 有 规 范 性 引 用 文 件 。 3 术 语 和 定 义 下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件 。 3 . 1 共 寄 生 s y m p a r a s i t i s m 以 柞 蚕 卵 为 中 间 寄 主 ， 将 螟 黄 赤 眼
5、 蜂 和 松 毛 虫 赤 眼 蜂 同 时 寄 生 在 一 粒 柞 蚕 卵 内 的 寄 生 方 式 。 4 利 用 共 寄 生 繁 育 赤 眼 蜂 程 序 的 构 成 利 用 共 寄 生 繁 育 赤 眼 蜂 生 产 分 为 2 个 阶 段 ， 准 备 工 作 阶 段 分 为 6 个 步 骤 ， 工 厂 化 生 产 阶 段 分 为 7 个 步 骤 。 程 序 流 程 图 如 图 1 所 示 。 图 1 共 寄 生 繁 育 赤 眼 蜂 工 厂 化 生 产 流 程 5 准 备 工 作 阶 段 5 . 1 生 产 计 划 每 年 的 1 1 月 1 2 月 份 ， 根 据 虫 情 预 测 预 报 信 息
6、 和 实 际 情 况 ， 及 时 调 整 ， 主 要 内 容 包 括 ：D B 2 2 / T 3 3 1 5 2 0 2 1 2 a ) 所 需 厂 房 、 设 备 ； b ) 蜂 种 、 蚕 茧 等 生 产 资 料 ； c ) 用 工 数 量 和 时 间 ； d ) 组 织 生 产 及 应 急 保 障 措 施 。 5 . 2 厂 房 及 规 模 按 照 1 5 0 亿 头 共 寄 生 赤 眼 蜂 生 产 规 模 应 包 括 ： a ) 蜂 种 繁 育 室 不 低 于 4 0 m 2 ； b ) 暖 茧 车 间 不 低 于 3 0 0 m 2 ； c ) 采 卵 室 不 低 于 5 0 m
7、2 ； d ) 洗 卵 室 不 低 于 2 0 m 2 ； e ) 消 毒 室 不 低 于 1 0 m 2 ； f ) 接 种 室 不 低 于 1 0 m 2 ； g ) 暗 室 不 低 于 6 0 m 2 ； h ) 发 育 室 不 低 于 5 0 m 2 ； i ) 保 鲜 冷 藏 室 不 低 于 1 0 0 m 2 ； j ) 物 品 保 存 库 不 低 于 2 0 m 2 。 5 . 3 设 备 药 品 保 存 箱 、 搅 拌 器 、 脱 水 机 、 烘 干 机 、 柞 蚕 卵 色 选 机 、 空 调 、 排 风 机 、 点 暖 气 、 加 湿 器 、 温 湿 度 自 控 仪 、 电
8、脑 机 打 印 机 、 发 育 盘 架 、 手 推 运 输 车 。 5 . 4 常 用 药 品 及 材 料 5 . 4 . 1 2 5 g / L 3 0 g / L 苯 扎 溴 铵 溶 液 （ 新 洁 尔 灭 消 毒 液 ） 。 5 . 4 . 2 孔 径 为 0 . 1 5 m m 的 纱 网 。 5 . 4 . 3 孔 径 为 2 . 0 0 m m 的 纱 网 。 5 . 5 蜂 种 准 备 5 . 5 . 1 蜂 种 采 集 在 靶 标 害 虫 产 卵 季 节 ， 于 不 同 生 境 广 泛 采 集 被 赤 眼 蜂 寄 生 的 靶 标 害 虫 卵 ， 并 做 好 标 记 ， 经 室
9、内 培 养 ， 筛 选 出 寄 生 率 高 、 适 应 性 强 的 蜂 种 。 5 . 5 . 2 蜂 种 鉴 定 根 据 雄 性 赤 眼 蜂 外 生 殖 器 的 形 态 特 征 进 行 种 类 鉴 定 ， 参 照 附 录 A 执 行 。 5 . 5 . 3 蜂 种 纯 化 对 采 自 不 同 靶 标 害 虫 卵 内 的 赤 眼 蜂 进 行 如 下 筛 选 纯 化 ： a ) 在 规 格 1 0 m m 7 0 m m 试 管 中 投 放 米 蛾 卵 2 0 0 粒 ， 再 放 入 单 头 雌 蜂 ， 用 棉 球 或 纱 布 封 口 后 置 于 发 育 室 ； b ) 发 育 条 件 ： 光
10、照 1 6 h ， （ 2 5 1 ） 、 R H （ 7 5 5 ） % ； 黑 暗 8 h ， （ 2 0 1 ） 、 R H （ 7 5 5 ） % ；D B 2 2 / T 3 3 1 5 2 0 2 1 3 c ) 将 确 定 的 螟 黄 赤 眼 蜂 和 松 毛 虫 赤 眼 蜂 分 别 合 并 ， 继 续 繁 殖 。 5 . 5 . 4 蜂 种 保 存 纯 化 的 蜂 种 ， 经 3 代 5 代 筛 选 繁 殖 ， 建 立 实 验 种 群 后 按 下 列 方 法 保 存 ： a ) 将 发 育 到 幼 虫 中 期 的 蜂 种 ， 置 入 1 2 、 R H （ 7 5 5 ） % 的
11、 条 件 下 ， 诱 导 滞 育 3 0 d ； b ) 置 入 （ 3 1 ） 、 R H （ 7 5 5 ） % 的 条 件 下 ， 进 行 解 除 滞 育 6 0 d 9 0 d ； c ) 经 1 0 2 d 、 1 5 1 d 过 渡 后 ， 按 5 . 5 . 3 b ) 变 温 发 育 至 出 蜂 。 5 . 6 柞 蚕 茧 准 备 5 . 6 . 1 备 茧 5 . 6 . 1 . 1 备 茧 时 期 在 生 产 前 1 年 的 1 1 月 1 2 月 份 开 始 按 预 定 计 划 备 茧 。 5 . 6 . 1 . 2 茧 质 量 茧 质 量 要 求 如 下 ： a ) 健
12、 康 雌 茧 率 9 0 % ； b ) 雄 茧 率 7 % ； c ) 死 伤 茧 率 3 % ； d ) 割 口 茧 率 8 % ； e ) 发 育 蛹 和 嫩 蛹 5 % ； f ) 茧 层 率 1 0 % ， 无 薄 皮 茧 、 瘪 茧 ； g ) 茧 干 燥 ， 未 在 - 3 一 下 低 温 储 存 。 5 . 6 . 1 . 3 备 茧 数 量 按 每 繁 1 5 0 亿 头 共 寄 生 赤 眼 蜂 用 茧 1 8 0 0 0 k g 计 算 。 5 . 6 . 2 蚕 茧 保 存 5 . 6 . 2 . 1 保 存 温 度 ： （ 3 1 ） 、 R H （ 6 0 5 ） %
13、 。 5 . 6 . 2 . 2 适 当 通 风 换 气 ， 保 持 空 气 含 氧 量 。 5 . 6 . 2 . 3 防 止 接 触 有 毒 有 害 物 质 。 5 . 6 . 2 . 4 储 存 时 间 不 低 于 4 5 d 。 6 工 厂 化 生 产 6 . 1 灭 菌 消 毒 在 生 产 前 1 周 ， 将 所 有 繁 蜂 车 间 及 繁 蜂 工 具 ， 进 行 集 中 消 毒 。 消 毒 方 法 为 如 下 ： a ) 首 先 对 消 毒 对 象 进 行 清 水 或 0 . 5 % 1 % 氢 氧 化 钠 、 1 % 的 漂 白 粉 水 冲 洗 ； b ) 用 生 石 灰 或 石
14、 灰 水 对 繁 蜂 车 间 喷 刷 覆 盖 ； c ) 将 繁 蜂 工 具 等 置 于 繁 蜂 车 间 内 ， 用 毒 消 散 或 硫 磺 等 熏 蒸 消 毒 。 保 持 室 温 2 4 以 上 ， R H 7 5 % 以 上 ， 时 间 2 4 h 。D B 2 2 / T 3 3 1 5 2 0 2 1 4 6 . 2 种 蜂 准 备 6 . 2 . 1 种 蜂 复 壮 根 据 生 产 计 划 ， 定 期 对 螟 黄 赤 眼 蜂 和 松 毛 虫 赤 眼 蜂 种 蜂 以 米 蛾 卵 和 柞 蚕 卵 交 替 繁 育 复 壮 ： a ) 螟 黄 赤 眼 蜂 ： 1 ) 接 蜂 比 例 ： 米
15、蛾 卵 蜂 卵 比 未 1 ： 8 0 ， 柞 蚕 卵 蜂 卵 比 为 1 ： 1 ； 2 ) 接 蜂 时 间 ： 1 d 2 d ； 3 ) 发 育 条 件 ： 同 5 . 5 . 3 b ) ； 4 ) 复 壮 周 期 ： 3 0 d 4 0 d 。 b ) 松 毛 虫 赤 眼 蜂 ： 1 ) 接 蜂 比 例 ： 米 蛾 卵 蜂 卵 比 未 1 ： 2 0 0 ， 柞 蚕 卵 蜂 卵 比 为 1 ： 1 ； 2 ) 接 蜂 时 间 ： 1 d 2 d ； 3 ) 发 育 条 件 ： 同 5 . 5 . 3 b ) ； 4 ) 复 壮 周 期 ： 3 0 d 4 0 d 。 6 . 2 .
16、2 种 蜂 扩 繁 以 柞 蚕 卵 为 中 间 寄 主 ， 将 种 蜂 扩 繁 2 代 3 代 ： a ) 接 蜂 比 例 ： 螟 黄 赤 眼 蜂 为 1 ： 2 5 ， 松 毛 虫 赤 眼 蜂 为 1 ： 3 0 （ 种 蜂 寄 生 柞 蚕 卵 ： 新 鲜 柞 蚕 卵 ） ； b ) 接 蜂 时 间 ： 1 d ； c ) 接 蜂 条 件 ： 全 黑 暗 ， （ 2 5 1 ） 、 R H （ 7 5 5 ） % ； d ) 发 育 条 件 ： 同 5 . 5 . 3 b ) ； e ) 将 末 一 代 种 蜂 发 育 至 幼 虫 中 后 期 置 于 （ 3 1 ） 、 R H （ 7 5
17、5 ） % 条 件 下 冷 藏 ； f ) 冷 藏 时 间 螟 黄 赤 眼 蜂 不 超 过 1 0 d ， 松 毛 虫 赤 眼 蜂 不 超 过 1 5 d 。 6 . 3 柞 蚕 卵 准 备 6 . 3 . 1 暖 茧 发 蛾 暖 茧 室 保 持 1 8 2 2 、 R H （ 7 0 5 ） % ， 2 0 d 2 5 d 后 柞 蚕 茧 羽 化 出 蛾 。 6 . 3 . 2 收 蛾 在 柞 蚕 蛾 羽 化 期 内 ， 随 时 采 收 杠 羽 化 （ 展 翅 前 ） 雄 蛾 ， 避 免 交 尾 ， 次 日 清 晨 人 工 收 雌 蛾 ， 用 于 当 天 繁 蜂 或 储 存 在 （ 3 1
18、） 的 冷 库 中 备 用 。 6 . 3 . 3 剖 腹 取 卵 用 人 工 方 法 将 柞 蚕 雌 蛾 腹 部 与 头 胸 部 分 离 ， 剖 腹 取 卵 。 6 . 3 . 4 洗 卵 及 消 毒 6 . 3 . 4 . 1 用 搅 拌 器 将 卵 与 蛾 腹 内 杂 物 搅 拌 分 离 ， 加 入 清 水 反 复 漂 洗 数 次 ， 除 去 杂 物 ， 留 下 蛾 卵 。 6 . 3 . 4 . 2 将 清 洗 干 净 的 新 鲜 卵 用 0 . 1 % 的 苯 扎 溴 铵 溶 液 （ 新 洁 尔 灭 消 毒 液 ） 浸 泡 5 m i n 。 6 . 3 . 5 脱 水 晾 卵D B
19、 2 2 / T 3 3 1 5 2 0 2 1 5 消 毒 后 的 新 鲜 卵 用 纱 网 袋 装 好 ， 用 脱 水 机 进 行 初 步 脱 水 ， 然 后 用 烘 干 机 烘 干 ， 温 度 不 超 过 2 5 2 8 。 6 . 3 . 6 清 除 绿 卵 烘 干 的 新 鲜 卵 用 色 选 机 等 专 用 设 备 清 除 绿 卵 后 ， 再 用 于 接 蜂 ， 绿 卵 率 4 % 。 6 . 4 接 蜂 6 . 4 . 1 比 例 松 毛 虫 赤 眼 蜂 寄 生 卵 、 螟 黄 赤 眼 蜂 寄 生 卵 、 新 鲜 柞 蚕 卵 比 例 为 3 ： 7 ： 2 1 0 。 6 . 4 .
20、 2 时 间 当 种 蜂 羽 化 率 达 到 2 5 % 3 0 % 时 ， 将 两 种 赤 眼 蜂 种 蜂 卵 均 匀 撒 在 接 蜂 盘 中 ， 铺 上 2 m m 孔 径 的 纱 网 ， 再 将 定 量 的 新 鲜 柞 蚕 卵 平 铺 到 纱 网 上 ， 送 入 （ 2 5 1 ） 、 R H （ 7 5 5 ） % 的 暗 室 内 产 卵 寄 生 ， 接 蜂 4 8 h 后 ， 去 除 种 蜂 ， 标 明 日 期 送 入 发 育 室 。 6 . 5 培 养 发 育 在 （ 2 5 1 ） 、 R H （ 7 5 5 ） % 条 件 下 继 续 发 育 2 4 h 至 幼 虫 后 期 。
21、 6 . 6 寄 生 卵 冷 藏 将 发 育 至 幼 虫 后 期 的 螟 黄 赤 眼 蜂 和 松 毛 虫 赤 眼 蜂 的 共 寄 生 卵 ， 平 铺 到 卵 盘 中 置 于 冷 库 内 货 架 上 冷 藏 ： a ) 铺 卵 厚 度 3 m m 4 m m ； b ) 冷 藏 温 度 （ 3 1 ） 、 R H （ 7 5 5 ） % ， 全 黑 暗 ； c ) 冷 藏 时 间 不 应 超 过 2 4 d 。 6 . 7 发 育 与 精 选 6 . 7 . 1 发 育 根 据 害 虫 发 生 时 间 将 冷 藏 共 寄 生 卵 按 如 下 步 骤 发 育 ： a ) 在 （ 1 5 1 ） 、
22、 R H （ 7 5 5 ） % ， 全 安 条 件 下 加 温 1 d ； b ) 按 5 . 5 . 3 b ) 变 温 发 育 至 预 蛹 期 。 6 . 7 . 2 精 选 用 绿 卵 色 选 机 除 去 未 寄 生 卵 、 劣 质 卵 、 绿 卵 及 其 它 杂 质 。 6 . 7 . 3 再 发 育 将 精 选 后 的 寄 生 卵 ， 置 于 发 育 室 按 5 . 5 . 3 b ) 变 温 发 育 至 蛹 后 期 。 根 据 田 间 放 蜂 时 间 ， 必 要 时 再 按 6 . 6 的 方 法 冷 藏 ， 冷 藏 时 间 不 应 超 过 3 d 。 7 过 程 记 录D B
23、2 2 / T 3 3 1 5 2 0 2 1 6 建 立 共 寄 生 繁 育 松 毛 虫 赤 眼 蜂 和 螟 黄 赤 眼 蜂 工 厂 化 生 产 档 案 ， 对 整 个 生 产 过 程 进 行 详 实 记 录 ， 保 存 2 年 以 上 ， 做 到 可 追 溯 ， 记 录 并 保 持 一 下 内 容 ： a ) 执 行 各 个 阶 段 程 序 的 人 员 姓 名 ； b ) 执 行 各 个 阶 段 程 序 的 时 间 ； c ) 执 行 各 个 阶 段 程 序 的 地 点 ； d ) 执 行 的 具 体 操 作 内 容 ； e ) 记 录 执 行 的 结 果 或 观 察 到 的 现 象 ；
24、f ) 其 它 。D B 2 2 / T 3 3 1 5 2 0 2 1 7 A A 附 录 A （ 资 料 性 ） 螟 黄 赤 眼 蜂 及 松 毛 虫 赤 眼 蜂 形 态 学 鉴 定 方 法 A . 1 制 作 鉴 定 拨 片 及 观 察 测 量 将 用 浓 度 7 5 % 9 5 % 酒 精 浸 泡 的 雄 性 赤 眼 蜂 标 本 按 下 列 方 法 制 作 为 玻 片 ： a ) 在 5 % 的 K O H 溶 液 中 浸 泡 8 h 1 5 h ， 并 用 水 清 洗 干 净 ， 置 于 载 玻 片 上 ； b ) 在 解 剖 镜 下 ， 用 昆 虫 针 挑 取 雄 蜂 的 外 生 殖
25、 器 ， 清 除 其 他 组 织 ， 盖 好 盖 玻 片 ； c ) 在 显 微 镜 下 观 察 并 测 量 阳 基 背 突 、 腹 中 突 及 D 值 。 A . 2 鉴 定 a ) 螟 黄 赤 眼 蜂 在 显 微 镜 下 观 察 赤 眼 蜂 雄 性 外 生 殖 器 并 测 量 其 阳 基 背 突 、 腹 中 突 及 D 值 ， 符 合 下 列 特 征 的 属 于 螟 黄 赤 眼 蜂 ： 1 ) 有 明 显 的 半 圆 形 的 侧 叶 ， 末 端 达 D 值 的 1 / 2 ； 2 ) 腹 中 突 的 长 度 约 等 于 D 值 的 1 / 3 ， 略 成 锥 形 ； 3 ) 钩 爪 末 端 伸 达 D 值 的 1 / 2 。 b ) 松 毛 虫 赤 眼 蜂 在 显 微 镜 下 观 察 赤 眼 蜂 雄 性 外 生 殖 器 并 测 量 其 阳 基 背 突 、 腹 中 突 及 D 值 ， 符 合 下 列 特 征 的 属 于 松 毛 虫 赤 眼 蜂 ： 1 ) 阳 基 背 突 有 明 显 的 宽 圆 的 侧 叶 ， 末 端 达 D 值 的 3 / 4 ； 2 ) 腹 中 突 的 长 度 约 等 于 D 值 的 3 / 5 3 / 4 ； 3 ) 钩 爪 末 端 伸 达 D 值 的 3 / 4 。
