1、ICS 65.020.01 CCS B 60 DB21 辽宁省 地 方 标 准 DB21/T 3554 2021 杨树花枝 控温盆栽 及人工杂 交技术规 程 Technical regulations for temperature-controlled potted and artificial hybridization of poplar floral cuttings 2021 - 12 - 30 发布 2022 - 01 - 30 实施 辽 宁 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB21/T 3554 2021 I 目 次 前 言 . II 1 范围 . 1 2 规 范性 引用
2、文件 . 1 3 术 语和 定义 . 1 4 雌 花枝 盆栽 温度 控制 . 2 5 人 工杂 交 . 2 6 种 子采 收与 保存 . 4 7 杂 交苗 培育 . 5 附 录A（ 资料 性） 雌花 枝盆栽 控制 室建 设要 求 . 7 附 录B（ 资料 性） 雌花 枝盆栽 控制 室建 设示 意图 . 8 附 录C（ 资料 性） 不同 杂交组 合授 粉情 况调 查表 . 9 附 录D（ 资料 性） 不同 杂交组 合种 子性 状调 查表 . 10 附 录E（ 资料 性） 不同 杂交组 合种 子出 苗情 况调 查表 . 11 DB21/T 3554 2021 II 前 言 本文件 按照GB/T 1
3、.1 2020 标 准化 工作 导则 第1 部 分：标 准化 文件 的结 构和 起草规则 给 出的 规 则编写 。 本文件 由辽 宁省 林业 和草 原局提 出并 归口 管理 。 本 文件 起草 单位 ：辽 宁省 杨树研 究所 。 本 文件 主要 起草 人： 彭儒 胜、 刘 巍、 蔄胜 军、 梁德 军、 尹 杰、 邢军 、 冯 连荣 、 赵鑫 闻、 林晓 峰 、 李 晓宇、 侯庚 、杨 成超 、倪 鹏跃、 庞忠 义、 吴建 军、 李亚楠 、 彭 彦辉 、 高 晓颖 、李立 功、 安云 全 、 杨 冰 。 本文件 发布 实施 后， 任何 单 位和个 人如 有问 题和 意见 建议， 均可 以通 过来
4、 电和 来 函等方 式进 行反 馈， 我们将 及时 答 复 并认 真处 理，根 据实 际情 况依 法进 行评估 及复 审。 归 口 管 理 部 门 通 讯 地 址 ： 辽 宁 省 林 业 和 草 原 局 （ 沈 阳 市 和 平 区 太 原 北 街2 号 ） ， 联 系 电 话 ： 024-23448927 。 本 文 件 起 草 单 位 通 讯 地 址 ： 辽 宁 省 杨 树 研 究 所 （ 辽 宁 省 盖 州 市 团 山 镇 任 屯 村 ） ， 联 系 电 话 ： 0417-7555835 。DB21/T 3554 2021 1 杨 树花枝 控温盆栽 及人工 杂交技术 规程 1 范围 本文件
5、 规定 了杨 树 （populus L. ） 雌花枝盆 栽温 度控 制、人 工杂 交、 种子 采收 与保存 和杂 交苗 培育 等方面 的技 术要 求。 本 文件 主要 适用 于 果 期长 、难生 根的 杨树 离体 花枝 盆栽人 工杂交 ， 其它 类型 杨树可 参考 执行 。 2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款 。 其 中 ， 注日 期的 引用 文件 ， 仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件； 不注 日期 的引 用文件 ， 其 最新 版本 （包 括所有 的修 改单 ） 适 用 于 本 文件。 GB/T 10016
6、 林 木种 子贮 藏 DB21/T 3109 杨树 扦插 育 苗技术 及苗 木质 量分 级 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。 3.1 杂交 hybridization 基因型 不同 的生 物体 间相 互交配 。在 林木 育种 中， 通常指 种间 、亚 种间 、品 种间、 变种 间 的 交 配 。 3.2 人工杂 交 artificial crossing 在 人为 控制 下的 杂交 。 3.3 亲本 parent 参与交 配过 程的 父本 和母 本的总 称。 3.4 杂交组 合 hybrid match 指杂交 双亲 的组 合与 配置 。 3.5 DB21/T 3554
7、 2021 2 控制授 粉 controlled pollination 按预定 计划 将目 的花 粉授 予母本 的授 粉技 术。 4 雌花枝 盆栽 温度 控制 控制室 温度 要求3 0. 5 ； 花盆 加热 温度 要求22 28 。具 体建 设要 求 可参照 附录A、 附录 B。 5 人工杂 交 5.1 亲本选 配 5.1.1 亲本选 择 选择符 合育 种目 标， 具有 所需重 要性 状 （ 基因 型） 的生长 健壮 、 无 病虫 害、 花芽发 育良 好的 优 良 单 株作为 亲本 。 5.1.2 亲本选 配 根据育 种目 标， 选择 具有 优良性 状、 亲和 力较 强的 父母本 树种 （品
8、 种） 搭配 杂交组 合。 5.2 花枝采 集及 储藏 5.2.1 采集时 间 辽宁地 区雌 花枝 在2 月末 至3月初 采集 。 雄 花枝 在2月 末至4 月初 采集 ， 最 佳时 间 在雌花 枝生 根处 理结 束前3 d5 d 。 5.2.2 林分要 求 选择生 长健 康的 中龄 林、 近熟林 作为 花枝 采集 林分 。 5.2.3 花枝规 格 选择树 冠中 上部 花芽 较多 的健康 花枝 。雌 花枝 粗度1.5 cm2.5 cm ，长 度80 cm110 cm； 雄花 枝粗 度1.5 cm ，长 度60 cm150 cm 。 5.2.4 花枝储 藏 花枝采 集后 ，如 不立即 使用 ，应
9、 放入 地窖 或冷 库中 ， 温度 控制 在3 5 ， 花枝基 部培 湿沙 。 5.3 雌花枝 处理 5.3.1 雌花枝 盆栽 3 月上旬 ，以 沙壤 土和 腐 殖土（按 2：1 比例 混匀 ） 作为盆栽 基质 ， 将花 枝基 部剪成 新切 口后 直立 栽植于 上部 内口 径 20 cm 的塑料 花盆 中， 每盆 栽植 一个花 枝 ， 栽植 深度 为15 cm 以上 。 栽植 后浇 透水， 待多余 水分 从花 盆底 部 排 水孔 完 全渗 出后 ， 用 厚塑 料袋 从 花盆 底部 至外 沿包 住花盆 ， 然 后放 置 于恒温水 槽中。 5.3.2 低温处 理 DB21/T 3554 2021
10、3 雌花枝 放入 恒温 水槽 后， 控制室 温度 控制 在3 0 .5 ，抑 制花 芽萌 动 。 5.3.3 加温生 根处 理 恒温水槽 水 位 以 放 入 花 盆 后 液 面 低 于 水 槽 上 沿1 cm 左 右 为 宜 。 黑 杨 派 树 种 花 枝 温 度 设 定 为 25 1 ， 处理26 d 左 右； 青 杨派 树种 花枝 温度 设定为23 1 ，处理23 d左右 。 5.3.4 生根后 管理 雌 花 枝 生根 处 理结 束 后，移 入 温 室， 花 盆搬 运 过程中 要 避 免花 枝 晃动 损 坏根系 。 白 天室 温 控制 在 22 30 ，夜 间不 低于10 ，空 气相 对
11、湿 度控 制 在60 %80 % ， 根 据花 盆基质 湿度 情况 适时 补水。 5.4 雄花枝 处理 5.4.1 水培 在雌花 枝移 入温 室前3 d5 d ，将 雄花 枝基 部 剪 成斜 切口， 插入 水培 容器 中。 5.4.2 日常管 理 雄 花 枝水 培过 程中 ，采 用打 氧 泵每 天打 氧2 次3 次，每 次20 min左右 ， 每隔4 d5 d换 水一 次， 及 时清洗 掉花枝 基 部分 泌的 粘液，并 修 剪掉 基部 腐烂 部分 。 温湿 度管 理参照5.3.4 执行 。 5.4.3 花粉采 集 雄花开 放前 ， 将不 同父 本 花枝采 用分 室隔 离法 或套 袋隔离 法进
12、行隔 离 ， 避 免 花粉互 相污 染 ； 待 花药 开裂， 有少 量花 粉散 落时 即 可 采集 花粉 ， 采 集前 按不 同 父本分 别 准 备清 洁干 燥培 养皿 、 毛笔 和白纸 备 用； 采集时 用毛 笔轻 刷花 序 ， 将花粉 收集 到白 纸上 ， 清 除花粉 中的 杂物 后， 装入 培养皿 中 ， 标记 父 本名称及 采 集 时 间 ，采集时间为9 时至16 时；花粉采集 后 ， 将 盛 放 花 粉 的 培 养 皿 放 置 于 无 水CaCl2 干 燥 器 中 ， 在 20 25 环 境下 干燥24 h后， 盖上 皿盖 并用 医用 胶 布密封 ，保 存于4 冰箱 备用， 存放 时
13、间 不超 过7 d。 5.5 控制授 粉 5.5.1 隔离 按照所 授花 粉的 父本 类型 对雌花 枝进 行分 区隔 离， 避免授 粉时 花粉 飘散 到其 它雌花 枝花 序上 。 5.5.2 疏花 授粉前 进行 疏花 处理 ， 每 个花枝 保留10个 以下 花芽 。 5.5.3 花粉活 力测 定 采用培 养基培 养法 进行花 粉活力 测定。 培养 基配方 为：0.7 %琼脂+20 %蔗糖+100 mg/L 硼 酸，pH 值 5.8。取2滴培 养基 于凹玻 片上， 用毛笔 蘸取 少量花 粉均匀 散于培 养基 上，在25 的 培养箱 中培 养24 h 后进行 花粉 萌发 率 （ 萌发 率= （ 萌
14、发 的花 粉数/100 ） 100 %） 计算 ， 萌 发率 80 %用 于授 粉。 5.5.4 控制授 粉 待雌花 开放， 柱头 发亮并 有汁液 分泌时 即可 授粉， 授粉时 间选择 在9时至11 或14时至16 时。 用毛 笔 蘸取少 量花 粉 ， 用 手指 轻 轻弹动 毛笔 ， 使花 粉散 落 在待授 柱头 上 ， 花 序下 面 授粉时 可用 手轻 轻将 花序 直DB21/T 3554 2021 4 立或翻 转后 再授 粉， 授粉 时要避 免毛 笔触 及柱 头， 也可 采 用授 粉器 授粉 ， 授 粉量不 宜过 大。 同一授粉工 具一次 只能 用于 同种 父本 的 授粉 。 5.5.5
15、标记与 记录 授粉后 及时 挂牌 标记 并做 好记录 ，详 见附 录C 。 5.6 授粉后 管理 授粉后 果穗 生长 过程 中疏 掉发育 不良 的果 穗。 其它 管理事 项参 照5.3.4.2执行 。 6 种子采 收与 保存 6.1 种子采 收 待蒴果 变黄 欲开 裂时 ， 用 带有透 明窗 的羊 皮纸 袋套住 果穗 ， 蒴果 开始 飞絮 时 采收种子 。 调 查结 实情 况和种 子性 状 ， 详见 附录D 。 6.2 种子保 存 种子采 收后 及时 播种 。如 需贮藏 ，参 照GB/T 10016 规定执 行。 7 杂交苗 培育 7.1 播种 7.1.1 播种容 器 采用72 孔或128 孔
16、塑料 穴盘， 规格 为54 cm 28 cm， 高 度 3.6 cm 。 7.1.2 基质准 备 将筛细 的 沙壤 土 、 河砂和 腐殖土按2：1 ：2比 例混 匀 ，经高 温 灭菌 后分 装于穴 盘 ，轻 轻压实 至离 穴 盘孔口2 mm3 mm ，喷 水润 湿后用 于播 种 。 7.1.3 播种方法 在温室 内进 行播 种育 苗 ， 用镊子 将种 子夹 起 ， 轻轻 按 压在 穴盘 孔中心 基 质表 面后， 覆土2 mm 左右， 或用镊 子将 种子 按压 至2 mm3 mm 深 ，填 平播 种穴 ， 每 孔播1粒 种子 。播 种后 再 次喷水 ，并 盖上 空穴盘 。 7.1.4 标记 播种
17、后 及时 挂牌 标记 。 7.2 出苗期 管理 根据 土 壤湿 度情 况每 天喷 水1次2 次， 待种 子发 芽露 出土壤 表面 后， 撤掉 空穴盘 。温 湿度 管理 参 照 5.3.4.2执行 。 7.3 记录 苗木管 理期 间做 好记 录 ， 详见附 录E 。 DB21/T 3554 2021 5 7.4 炼苗 待小苗 高度 达到5 cm 后移 至室外 半遮 阴处 炼苗 ，并 根据湿 度情 况适当 浇水 。 7.5 移栽 待小苗 高度 达12 cm 以 上时 移栽到 大田 ，株 行距20 cm25 cm 50 cm60 cm 。 栽 植前翻 耙土 壤， 深 度20 cm 以上 。移栽 前将
18、 穴 盘基质 润湿， 用小 扁铲（ 铲宽度 小于穴 盘孔 径）轻 轻将小 苗连同 基质 挖出 ， 确保土 坨基 本完 整、 不散 ， 栽植 深度 没过 土坨2 cm3 cm， 栽植 后浇 透水 并覆 土3 cm5 cm 。 7.6 苗期管 理 7.6.1 平茬 翌年春 季苗 木叶 芽萌 动前 进行平 茬 ， 用锋 利的 树木 剪刀或 镰刀 截条 ， 截 口要 光滑、 不劈 裂， 平 茬 高 度与地 面相 平。 7.6.2 定干 当萌条 长到30 cm40 cm 高 时，保 留一 个粗 壮萌 条为 主干， 其余 萌条 全部 去除 。 7.6.3 灌溉与 排水 生长季 节如 遇干 旱， 及时 补足
19、水 分。 雨后 渍涝 ，及 时排水 。 7.6.4 除草与 松土 除草应 遵循 除早 、除 小、 除净、 不伤 苗的 原则 。采 用人工 除草 ，整 个生 长季 需除草3次4 次； 采 用 化学除 草， 应选 择适 宜除 草剂。 7.6.5 病虫害 防治 杨树苗 期常 见病 虫害 种类 及防治 方法 参照DB21/T 3109 中4.4 执 行。 DB21/T 3554 2021 6 附 录 A （资料 性） 雌花枝 盆栽 控制 室建 设要 求 A.1 保温 系统 雌花枝 生根 控制 室底 层地 面、 外部 墙体 和顶 层须 做 防潮 、 防 水和 防渗 处理 。 内 部墙体 和顶 层 镶 保
20、温 板，保 温 板 厚度 为 8 cm 。 A.2 制冷 系统 要求满 足室 内温 度控 制 在3 0.5 ， 不同 面积 所需制 冷机 数量 及单 机功 率见 表 A.1 。 A.3 恒温 水槽 由一 体 式白 钢板 制成 ， 下 设排水 口， 水 槽高 度 为20 cm 左右 。 水 槽宽 度不 宜过 大， 一 般以放 置两 排 花盆为 宜 ， 可制 作 成75 cm78 cm ， 便于 操作 。恒温 水槽上 部开 圆形 孔， 开孔 直径与 花盆 规格 相符 ， 为 25 cm 左右 ， 孔间 距为 8 cm12 cm 。 恒温 水槽 上面 及 侧面 包 橡塑 棉保 温， 厚度 3 cm，
21、 上面 橡塑 棉开孔 直径与 水槽 开孔 直径 一致 ，孔与 孔相 对应 。 不 同数 量雌花 枝所 需恒 温水 槽总 长度见 表A.1 。 A.4 自动 控制 系统 A.4.1 室 内温 度自 动控 制 系统 由主机 、 恒温 探头 、 故障 报 警器三 体接 线式 组成 。 由 安装在 生根 控制 室内 的可 调接电 水银 计做 恒温 探头， 监测 室内 温度 ， 利 用接电 水银 柱的 通断 ， 驱 使低压 中间 继电 器， 导通 制冷机 的交 流接 触 器 ， 使 制 冷机停 、启 自动 化， 实现 室内恒 温的 目的 。 A.4.2 恒 温水 槽水 温自 动 控制系 统 恒温水 槽水
22、 温采 用电 加热 棒加热 ， 水槽 内安 装 水 温 自动监 测系 统 ， 带 有水 温 自动控 制功 能 ， 根 据水 温设定 ，使 电加 热棒 停、 启自动 化， 实现 水温 恒定 。 表A.1 雌花枝 生根 控制 室所 需面 积、制 冷机 数量 及恒 温水 槽长度 设计 要求 花枝数量 （盆） 面积（m 2 ） 制冷机数量（个） 单机功率 （匹） 水槽总长度 （cm） 36 12 1 3 660 72 24 2 3 1320 108 36 3 3 1980 DB21/T 3554 2021 7 A B 附 录 B （资料 性） 雌花枝 盆栽 控制 室建 设示 意图 图B.1 雌 花枝
23、盆栽 控制 室 建设示 意图 DB21/T 3554 2021 8 B C 附 录 C （资料 性） 不同杂 交组 合授 粉情 况调 查表 表C.1 不 同杂 交组 合授 粉 情况调 查表 序号 杂交组合 授粉日期（月/ 日） 授粉株数（株） 蒴果数量（个） 调查 人： 调查 时间： DB21/T 3554 2021 9 C D 附 录 D （资料 性） 不同杂 交组 合种 子性 状调 查表 表D.1 不 同杂 交组 合种 子 性状调 查表 序 号 杂交组合 产种株数 （株） 产种果 穗数 （个） 果穗平均 果粒数 （个） 种子总数 （粒 ） 平均每个果 粒种子数 （粒） 种子长宽 （m m m m ） 千粒重 （g ） 调查 人： 调查时 间： DB21/T 3554 2021 10 D E 附 录 E （资料 性） 不同杂 交组 合种 子出 苗情 况调查 表 表E.1 不 同杂 交组 合种 子 出苗情 况调 查表 序号 杂交组合 播种数量 （个） 发芽数量 （个） 发芽率 （% ） 成苗数量 （株） 成苗率 （% ） 调 查人 ： 调 查 时间： _
