1、 ICS 65.020.30 CCS B 40 1507 呼伦贝尔市 地方 标准 DB 1507/T 63 2021 高寒地区绵羊人工授精技术操作规程 Sheep in alpine region artificial fertilization technical manual 2021 - 07 - 15 发布 2021 - 10 - 15 实施 呼伦贝尔市市场监督管理局 发 布 DB 1507/T 63 2021 I 前 言 本文件依据 GB/T 1.1 2020 标准化工作导则 第 1部分 :标准化文件的结构和起草规则的规定起 草。 本文件由呼伦贝尔市农牧业局提出并归口。 本文件起草单
2、位：呼伦贝尔市农牧科学研究所。 本文件主要起草人：王景顺、罗保华、格格、多乐、董淑霞、许忠霞、柴局、张凤茹、孙志红、高 荣 、王国军、吉亚、德擎音、祁航、车曼青、查干巴拉、其力格尔、炜霞。 DB 1507/T 63 2021 1 高寒地区绵羊人工授精技术操作规程 1 范围 本文件规定了高寒地区绵羊人工授精的术语和定义、消毒、采精、精液品质检查、稀释与保存、发 情鉴定和输精等内容。 本文件适用于呼伦贝尔等高寒地区绵羊人工授精。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 消毒 器械消毒 4.1 假阴道要用清水冲洗，然后用 75 %的酒精消
3、毒，使用前用生理盐水冲洗。金属制品中的开膣器、镊 子、盘子、集精杯、输精枪等，用清水冲洗，擦干后用 75%的酒精或高压灭菌的方式消毒。 配种操作室消毒 4.2 日常消毒用 1 %高锰酸钾溶液进行喷洒消毒，每日于采精前和采精后各进行 1次。 5 采精 采精前的准备 5.1 5.1.1 器械的准备 假阴道、集精杯、镊子、开膣器、输精器等要提前清洗、干燥、消毒，存放于消毒柜内备用。 5.1.2 种公羊的准备 种公羊第一次采精的年龄应在 1.5周岁，膘情中等；初次参加采精的公羊，先进行采精训练，用发 情母羊刺激性欲，采精调教训练成功后，进行正式操作。 5.1.3 采精器准备 将事先清洗和消毒后的假阴道
4、与集精杯按要求组装好，从假阴道注水孔注入 50 55 温水 100 ml，调节好调节阀钮，通过气体活塞吹入气体，气体的量以内胎 表面呈三角形合拢而不向外鼓出为宜。 DB 1507/T 63 2021 2 在假阴道内胎的前三分之一处用玻璃棒涂抹少许灭菌凡士林，采精时用温度计测试假阴道内温度应保持 在 38 41 。 采精方法 5.2 采精前用温水洗净种公羊阴茎的包皮，并擦干净；将台羊固定后，引公羊到台羊处，采精时采精员 站立在公羊的一侧，使假阴道靠在母羊臀部，其角度与母羊的阴道的位置相一致（与地面成 35 o 45 o 角）。当种公羊爬跨时，迅速上前，用手轻托阴茎包皮，迅速将阴茎导入假阴道中，种
5、公羊有向前冲的 动作时，即为射精，迅速把装有集精杯的一端向下倾斜，并竖起集精杯，送精液到处理室， 放气后取下 集精杯，盖好盖，待精液品质检查。 采精频率 5.3 种公羊每天可采精二、三次，第一、二次采精后休息两小时方可进行第三次采精，每隔五天休息一 天。采精后做好采精记录。 6 精液品质检查 外观检查 6.1 6.1.1 颜色 呈乳白色，肉眼可看到乳白色云雾状。 6.1.2 气味 无味或略带腥味。 6.1.3 精液量 一次采集量平均为 0.8 ml 1.4 ml。 6.1.4 初检 经外观检查，凡带有腐败臭味，出现红色、褐色、绿色的精液判为劣质精液，应弃掉不用，一般情 况下不再做显微镜检查。
6、显微镜检查 6.2 6.2.1 精子活力 以灭菌玻璃棒蘸取 1滴精液，放在载玻片上加盖玻片，在 400倍 600倍显微镜下观察。全部精子都 做直线运动评为 1级， 90 %的精子做直线前进运动为 0.9级，以此类推。 6.2.2 精子密度 取 1滴新鲜的精液在显微镜下观察，根据视野内精子多少分为密、中、稀三级。“密”是指视野中 的精子数量多，精子之间距离小于 1个精子的长度；“中”是指精子之间的距离大约为 1个精子的长度； “稀”为精子之间距离大于 1个精子的长度。每毫升精液中含精子 25亿以上者为密， 20亿 25亿个为中， 20亿以下为稀。 DB 1507/T 63 2021 3 6.2.
7、3 精子质量 精子活力在 0.6级以上，密度在中等 以上，畸形精子率不超过 20 %，为优质。 7 稀释与保存 稀释 7.1 7.1.1 稀释液 稀释液的配方选择易于精子活动，减少能量消耗，延长精子寿命的弱酸性稀释液。常用的稀释液为 维生素 B12（成份要求为纯维生素 B12,无其它辅料）。 7.1.2 稀释倍数 要根据精子密度、活力而定稀释比例，稀释后的精液，每毫升有效精子数不少于 7亿个。目前，一 般以 1： 4 1： 7为宜。 7.1.3 稀释步骤 根据镜检得出精子密度确定稀释倍数，根据稀释倍数计算出应加入的稀释液的量，用移液管量取应 加的稀释液。稀释前将两种液体置于同一温水中，然后将稀
8、释液沿着精液瓶缓缓倒入，用输精枪 反复抽 取混合液使之混合均匀，稀释完毕后，立即进行活力镜检，并将镜检结果填入采精登记表。 精液保存 7.2 7.2.1 常温保存 精液稀释后，保存在 20 以下的室温环境中，一般可有效保存 24 h。 7.2.2 低温保存 在常温保存的基础上，温度进一步缓慢降至 0 5 之间。可将精液装入小试管内，直接放入温 度为 2 4 的恒温箱中，低温下一般可有效保存 48 h 72 h。 8 发情鉴定 用试情公羊与母羊接触，母羊表现温驯，并将后躯转向公羊或接受试情公羊爬跨而静立不动视为发 情母羊。 9 输精 输精前准备 9.1 9.1.1 人员 输精人员 应穿工作服，用
9、肥皂水洗手、擦干，再用生理盐水冲洗。 9.1.2 器械 DB 1507/T 63 2021 4 把洗涤消毒好的开膣器、输精枪、镊子用纱布包好，待用。 9.1.3 输精室 一般面积为 30 m2，室温为 20 25 。要求地面平整，光线充足，宽敞、平坦、清洁、安静。 9.1.4 母羊 对发情母羊输精时，应对外阴部进行消毒和清洗，待干燥后再用生理盐水棉球擦拭。 输精方法 9.2 用生理盐水擦拭后的开膣器插入阴道深部，触及子宫颈后，稍向后拉，以使子宫颈处于正常位置之 后，轻轻转动开膣器 90 o，打开开膣器，开张度在不影响观察子宫颈口的情况下，开张的愈小愈好（ 2 cm）； 输精枪应慢慢插入到子宫颈
10、内 0.5 cm 1.0 cm处，插入到位后应缩小开膣器开张度，并向外拉出 1/3， 然后将精液缓缓注入；输精完毕后，让羊保持原姿势片刻，放开母羊，原地站立 5 min 10 min，再将 羊赶走。 输精次数和输精量 9.3 输精次数：母羊 1个情期应输精 2次，发现发情时输精 1次，间隔 8 h 10 h应进行第 2次输精。输精 量：每只每次的输精量，原精液为 0.05 ml 0.10 ml，稀释后精液应为 0.1 ml 0.2 ml。 其它要求 9.4 输精人员应遵守操作规程，输精员输精时应切记做到深部、慢插、轻 注、稍停。对个别阴道狭窄的 青年母羊，开膣器无法充分打开，很难找到子宫颈口，可采用阴道内输精，但输精量需增加 1倍。输精 后立即做好母羊配种记录。每输完一只羊要对输精器、开膣器及时清洗消毒后才能重复使用，有条件的 建议用一次性器具。
