1、DB53/T 1029 2021云 南 省 地 方 标 准 云 南 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 三 七 圆 斑 病 诊 断 与 防 控 2021 -05- 25发 布 2021- 08-25实 施 ICS 65.020CCS B 15 53 DB53/T 1029-2021 I 前 言本 文 件 按 照 GB/T 1.1 2020 标 准 化 工 作 导 则 第 1部 分 ： 标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定起 草 。请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利 。 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的
2、责 任 。本 文 件 由 云 南 省 三 七 标 准 化 技 术 创 新 战 略 联 盟 提 出本 文 件 由 云 南 省 农 业 标 准 化 技 术 委 员 会 （ YNTC07） 归 口 。本 文 件 起 草 单 位 ： 昆 明 理 工 大 学 、 文 山 学 院 、 云 南 崔 三 七 药 业 股 份 有 限 公 司 、 文 山 白 云 山 和 黄 三 七有 限 公 司 、 昆 药 集 团 股 份 有 限 公 司 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 朱 琳 、 崔 秀 明 、 杨 绪 旺 、 冯 光 泉 、 高 明 菊 、 刘 迪 秋 、 刘 源 。 DB53/T 1029-2021
3、1 三 七 圆 斑 病 诊 断 与 防 控1 范 围本 文 件 规 定 了 三 七 圆 斑 病 的 症 状 ， 病 原 ， 发 生 ， 诊 断 ， 防 控 等 。本 文 件 适 用 于 三 七 圆 斑 病 的 诊 断 及 防 控 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款 。 其 中 ， 注 日 期 的 引 用 文 件 ，仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件 ； 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ）
4、适 用 于 本文 件 。 GB/T8321.10 农 药 合 理 使 用 准 则DB53/T055.8 三 七 农 药 使 用 准 则DB53/T055.2 三 七 种 子DB53/T055.9 三 七 育 苗 技 术 规 程3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件 。3.1 圆 斑 病 roundspotofnotoginseng三 七 栽 培 过 程 中 ， 由 槭 菌 刺 孢 菌 Mycocentrospora acerina (Hartig)Deighton侵 染 叶 ， 同 时 也 可 侵 染 根 、茎 、 花 、 果 等 引 起 的 毁 灭 性 病
5、害 。3.2 中 心 病 株 primaryinfectionfocus田 间 零 星 出 现 的 具 有 极 强 传 染 性 的 病 株 。3.3 科 赫 氏 法 则 kochspostulates确 定 侵 染 性 病 害 病 原 物 的 规 范 性 操 作 程 序 ， 参 见 附 录 A。4 诊 断4.1 田 间 诊 断4.1.1 监 测 时 间一 年 生 苗 期 或 二 年 生 以 上 三 七 展 叶 期 开 展 圆 斑 病 监 测 直 至 植 株 落 棵 。 每 年 4 月 中 下 旬 ， 气 温 16 22 ， 相 对 湿 度 80%以 上 ， 连 续 2d 3d降 雨 ， 或 日
6、 平 均 降 雨 量 达 15mm以 上 时 ， 至 10月 中 旬 结 束 。 DB53/T 1029-2021 2 4.1.2 发 病 中 心带 菌 种 苗 或 带 菌 土 壤 作 为 初 侵 染 源 ， 遇 适 宜 的 环 境 条 件 ， 所 发 生 的 中 心 病 株 或 病 窝 点 。4.1.3 症 状 、 发 生 特 点病 害 症 状 与 发 生 特 点 见 附 录 B。4.1.4 病 样 采 集对 取 样 现 场 和 病 害 症 状 拍 照 后 采 样 。采 集 典 型 的 新 鲜 单 病 斑 病 样 ， 用 吸 水 纸 包 裹 ， 标 识 采 集 人 ， 时 间 ， 地 点 ，
7、 采 集 部 位 等 。4.2 室 内 诊 断4.2.1 病 原 分 离 、 纯 化 按 以 下 要 求 分 离 、 纯 化 病 原 ：a) 选 取 具 有 明 显 症 状 的 新 鲜 单 病 斑 ， 自 来 水 冲 洗 ， 灭 菌 吸 水 纸 吸 去 多 余 的 水 分 ；b) 剪 取 病 健 交 界 处 2mm3mm小 块 ， 于 75%的 酒 精 中 表 面 消 毒 1min， 再 放 入 0.1%升 汞 中 消 毒30S， 之 后 用 灭 菌 水 清 洗 3 次 ；c) 接 种 于 PDA培 养 基 中 ， 置 于 20 恒 温 培 养 箱 中 培 养 2d 3d；d) 选 取 边 缘
8、 菌 丝 反 复 纯 化 3 次 以 上 ， 用 无 菌 打 孔 器 （ =5mm） 打 取 菌 饼 ， 反 接 种 于 PDA 培 养基 中 ， 全 光 照 ， 18 恒 温 培 养 15d；e) 产 生 大 量 的 分 生 孢 子 和 厚 垣 孢 子 后 ， 参 照 附 录 B.2进 行 验 证 ， 并 按 4.2.2的 方 法 进 行 病 原 菌 的致 病 性 测 定 。4.2.2 病 原 物 致 病 性 测 定采 用 柯 赫 氏 法 则 测 定 病 原 物 致 病 性 ， 参 见 附 录 A.1。 4.2.3 确 诊根 据 病 原 菌 形 态 学 、 致 病 性 测 定 ， 确 诊 三
9、 七 圆 斑 病 。5 防 控5.1 防 控 原 则遵 循 以 下 防 控 原 则 ：a) 预 防 为 主 ， 综 合 防 治 ；b) 结 合 气 象 条 件 进 行 病 情 监 测 ；c) 一 旦 出 现 发 病 中 心 ， 立 即 采 用 治 疗 性 药 剂 予 以 控 制 。5.2 病 情 调 查 病 情 调 查 方 法 参 见 附 录 C， 调 查 记 录 表 参 见 用 附 录 A.2。5.3 防 控 措 施 DB53/T 1029-2021 3 5.3.1 农 业 措 施5.3.1.1 选 地 与 整 地选 择 PH值 为 5.6 7， 质 地 疏 松 的 土 壤 或 沙 壤 土
10、。 深 翻 犁 ， 晒 垡 ， 挖 沟 起 垄 ， 采 用 符 合 DB53/T055.8三 七 农 药 使 用 准 则 要 求 的 生 石 灰 或 药 剂 进 行 土 壤 处 理 。5.3.1.2 种 子 与 育 苗种 子 应 符 合 DB53/T055.2 三 七 种 子 要 求 。按 DB53/T055.9 三 七 育 苗 技 术 规 程 要 求 育 苗 。5.3.1.3 轮 作 与 林 下 栽 培选 择 前 作 为 玉 米 、 陆 稻 、 荞 麦 等 的 地 块 种 植 三 七 ， 轮 作 年 限 为 8年 以 上 ， 经 物 理 、 化 学 消 毒 剂 处 理的 土 壤 可 减 少
11、轮 作 年 限 。 在 未 种 植 过 三 七 的 冬 瓜 树 林 、 栎 树 林 等 阔 叶 林 或 混 交 林 下 栽 培 。5.3.1.4 水 肥土 壤 含 水 量 保 持 在 25% 30%左 右 ， 七 园 湿 度 以 80%左 右 为 宜 。施 肥 应 以 有 机 肥 为 主 ， 少 施 氮 肥 ， 磷 钾 比 例 适 中 ， 多 施 底 肥 ， 适 时 追 肥 。5.3.1.5 海 拔宜 选 择 海 拔 1400m 1600m， 年 平 均 气 温 15 17 ， 最 冷 月 均 温 8 10， 最 热 月 均 温 20 22 ， 大 于 等 于 10 年 积 温 4500 55
12、00 ， 年 降 水 量 1000mm 1300mm， 无 霜 期 300d以 上 的 区 域 。5.3.1.6 透 光 率二 年 生 三 七 适 宜 的 光 照 强 度 12% 15%， 三 年 生 三 七 适 宜 的 光 照 强 度 15% 20%。 5.3.2 生 物 防 控5.3.2.1 生 防 菌 剂用 木 霉 （ Trichoderma spp.） 、 枯 草 芽 孢 杆 菌 (Bacillus subtilis)或 解 淀 粉 芽 孢 杆 菌 (Bacillusamyloliquefaciens)生 防 菌 剂 对 三 七 种 苗 （ 子 ） 进 行 浸 泡 ， 在 植 株 展
13、叶 期 时 进 行 喷 施 ， 药 剂 施 用 方 法 参 照使 用 说 明 书 。5.3.2.2 施 用 时 间 和 次 数移 栽 时 或 出 苗 后 进 行 第 1次 施 药 ， 之 后 每 隔 5d 7d施 药 1 次 ， 连 续 施 药 3 次 4 次 。施 用 过 生 防 菌 剂 的 田 块 不 得 施 用 杀 菌 剂 。5.3.3 化 学 防 控5.3.3.1 种 子 （ 苗 ） 处 理 对 疑 是 带 病 种 子 或 种 苗 按 以 下 要 求 进 行 处 理 ： DB53/T 1029-2021 4 a) 用 40%菌 核 净 可 湿 性 粉 剂 400倍 液 、 58%瑞 毒
14、 霉 锰 锌 可 湿 性 粉 剂 500倍 液 浸 种 或 处 理 种 苗 15Min 20Min；b) 或 用 65%代 森 锰 锌 可 湿 性 粉 剂 按 种 子 重 量 0.2% 0.5%拌 种 、 拌 苗 后 播 种 、 移 栽 ；5.3.3.2 农 药 使 用使 用 农 药 应 符 合 GB/T8321.10和 DB53/T 三 七 农 药 使 用 准 则 的 规 定 ， 并 交 替 轮 换 用 药 ， 每 隔 7d喷 1 次 ， 连 喷 3 次 。5.3.3.3 中 心 病 株 处 理发 现 中 心 病 株 时 ， 连 根 挖 出 ， 带 出 七 园 外 销 毁 ， 病 塘 用 生
15、 石 灰 处 理 。对 病 株 周 围 50m范 围 内 喷 施 58%瑞 毒 霉 锰 锌 和 65%代 森 锰 锌 等 药 剂 ， 每 隔 7d喷 1 次 ， 连 喷 3 次 。5.3.3.4 保 护 性 药 剂 防 控 当 病 情 指 数 在 5 以 下 时 ， 可 采 用 以 药 剂 下 配 方 进 行 防 治 ：a) 65%代 森 锰 锌 可 湿 性 粉 剂 500倍 液 ；b) 50%福 美 双 可 湿 性 粉 剂 500倍 700倍 液 ；c) 75%百 菌 清 可 湿 性 粉 剂 400倍 600倍 液 ；d) 50%异 菌 脲 可 湿 性 粉 剂 800倍 1000倍 液 。5
16、.3.3.5 治 疗 性 药 剂 防 控当 病 情 指 数 大 于 5 时 ， 应 采 用 以 下 药 剂 单 独 使 用 或 两 种 药 剂 混 合 使 用 ：a) 10%宝 丽 安 （ 多 氧 霉 素 ） 可 湿 性 粉 剂 1000 倍 1500 倍 液 ；b) 3%多 抗 霉 素 可 湿 性 粉 剂 100 倍 200 倍 液 ；c) 30%爱 苗 乳 油 2500 倍 液 ；d) 10 世 高 (10%苯 醚 甲 环 唑 )水 散 性 颗 粒 剂 2000 倍 液 ；e) 50%速 克 灵 (50%腐 霉 利 )可 湿 性 粉 剂 1200 倍 液 ； f) 58%瑞 毒 霉 锰 锌
17、 可 湿 性 粉 剂 500 倍 液 。6 采 收用 药 后 间 隔 30d以 上 采 收 。 DB53/T 1029-2021 5 附 录 A（ 资 料 性 ）柯 赫 氏 法 则 和 中 心 病 株 调 查 表A.1 柯 赫 氏 法 则确 定 某 种 生 物 是 否 是 病 原 生 物 应 遵 循 的 原 则 与 操 作 程 序 ： （ 1） 在 病 植 物 上 常 伴 随 一 种 病 原 生 物 存在 ； （ 2） 该 生 物 可 在 离 体 或 人 工 培 养 基 上 分 离 和 纯 化 ； （ 3） 将 该 纯 培 养 物 接 种 到 相 同 品 种 的 健 康 植 株上 ， 表 现
18、出 与 原 来 相 同 的 症 状 ； （ 4） 从 接 种 发 病 的 植 物 上 再 次 分 离 到 该 生 物 的 纯 培 养 ， 性 状 与 原 来 记录 的 相 同 。A.2 中 心 病 株 调 查中 心 病 株 调 查 表 见 表 A.1。 表 A.1 三 七 圆 斑 病 中 心 病 株 调 查 表单 位 ： 日 期 ： 年 月面 积 /m2 地 势 土 壤 海 拔 /m 温 度 / 湿 度 /% 降 雨 /mm 遮 阴 棚 材料 遮 阴 棚 透光 率 /%前 茬 作 物 有 无 病 史 七 龄 有 无 病 害中 心 调 查 株 数 /株 发 病 株 数 /株 发 病 率 /% 病
19、 情 分 级 病 情 指 数/% DB53/T 1029-2021 6 附 录 B（ 资 料 性 ）三 七 圆 斑 病 症 状 、 病 原 及 发 生 特 点B.1 三 七 圆 斑 病 症 状三 七 根 、 根 茎 、 芽 、 茎 、 叶 、 叶 柄 、 花 、 花 轴 、 果 实 、 果 柄 等 均 能 被 侵 染 ， 但 以 茎 、 叶 受 害 严 重 。叶 片 病 斑 初 期 呈 水 渍 状 ， 而 后 变 为 黑 褐 色 圆 形 ， 有 明 显 轮 纹 ， 病 健 交 界 处 可 见 黄 色 晕 圈 ， 最 后 病 斑 合 并脱 落 或 腐 烂 。 叶 柄 和 枝 柄 受 害 则 呈
20、暗 褐 色 水 渍 状 缢 缩 ， 脱 落 ； 茎 杆 受 害 后 病 斑 变 褐 折 垂 ， 潮 湿 环 境 下 病斑 表 面 生 稀 疏 白 色 霉 层 即 孢 子 层 ， 见 图 B.1。B.2 三 七 圆 斑 病 病 原三 七 圆 斑 病 的 病 原 为 半 知 菌 亚 门 ， 丝 孢 纲 ， 暗 色 菌 科 ， 菌 剌 孢 属 槭 菌 刺 孢 Mycocentrospora acerina (Hartig)Deighton。 病 菌 在 PDA培 养 基 上 初 期 菌 落 疏 展 、 无 色 ， 后 变 绿 色 、 灰 色 或 紫 红 色 , 最 后 变 成 黑 色 。光 照 条
21、件 下 产 生 明 显 的 玫 瑰 红 色 ， 菌 落 呈 同 心 轮 纹 状 扩 展 。 菌 丝 有 隔 ， 宽 4m 7m。 菌 落 中 心 常 形成 念 珠 状 串 生 的 膨 大 菌 丝 细 胞 ， 厚 壁 、 深 褐 色 ， 即 厚 垣 抱 子 。 厚 垣 孢 子 深 褐 色 ， 长 椭 圆 形 或 矩 圆 形 ， 大小 为 15m 30m15m 20m。 将 培 养 基 上 菌 落 切 割 后 ， 加 入 无 菌 水 ， 于 18光 照 培 养 1d 2d，可 产 生 大 量 分 生 孢 子 梗 和 分 生 孢 子 。 分 生 孢 子 梗 短 菌 丝 状 ， 淡 褐 色 ， 分 枝
22、 ， 有 隔 膜 ， 合 轴 式 延 伸 ， 7m24m4m 7m。 产 孢 细 胞 合 生 ， 圆 桶 形 ， 孢 痕 平 截 。 分 生 孢 子 单 生 、 顶 侧 生 ， 倒 棍 棒 形 ， 具 长 喙 ，基 部 平 截 ， 淡 褐 色 ， 大 小 为 54m 250m7.7m 14m， 4 个 16 个 隔 膜 ， 隔 膜 处 微 突 起 。 少 数 孢子 具 有 一 个 从 基 部 细 胞 侧 生 出 的 刺 状 附 属 丝 ， 大 小 为 25m 124m2m 3m,见 图 B.1。B.3 三 七 圆 斑 病 发 生 特 点三 七 圆 斑 病 的 发 生 与 温 度 和 湿 度 的
23、 关 系 较 为 密 切 ， 低 温 高 湿 多 发 病 ， 且 发 病 率 随 产 区 海 拔 的 升 高 而增 加 。 当 日 均 温 在 21以 下 时 ， 空 气 相 对 湿 度 达 80%以 上 ， 持 续 2d 3d小 雨 天 气 或 日 降 雨 量 达 15 以上 时 ， 圆 斑 病 即 可 发 生 ， 且 发 病 率 随 产 区 海 拔 的 升 高 而 增 加 ， 主 要 集 中 于 海 拔 1700m以 上 的 高 山 地 区 ， 海 拔 1400m 1600m的 地 区 零 星 发 生 ， 其 发 病 早 、 持 续 时 间 长 、 危 害 重 。 该 病 害 发 病 初
24、期 ， 病 株 零 星发 生 ， 而 到 中 后 期 则 具 有 明 显 的 发 病 中 心 。 DB53/T 1029-2021 7 图 B.1 三 七 圆 斑 病 的 症 状 与 病 原注 ： A： 叶 部 病 斑 ； B： 叶 柄 症 状 ； C： 茎 杆 症 状 ； D:中 心 病 株 ； E： 田 间 病 害 ； F： 槭 菌 刺 孢 分 生孢 子 ； G:槭 菌 刺 孢 产 孢 结 构 及 分 生 孢 子 ； H:槭 菌 刺 孢 厚 垣 孢 子 DB53/T 1029-2021 8 附 录 C（ 资 料 性 ）病 情 分 级 、 危 害 程 度 、 调 查 表 格 和 统 计 方
25、法C.1 病 情 分 级圆 斑 病 病 情 分 级 标 准 见 表 C.1。 表 C.1 三 七 圆 斑 病 病 情 分 级 标 准级 别 症 状0 级 植 株 无 病1 级 植 株 个 别 叶 片 发 病 ， 叶 片 不 脱 落 2 级 植 株 1 /3 叶 片 发 病 ， 有 1 小 叶 2 小 叶 脱 落3 级 1 个 复 叶 柄 发 病 或 仅 花 序 和 花 轴 发 病 或 植 株 叶 片 总 数 1 /2 脱 落4 级 茎 秆 发 病 ， 或 2 /3 叶 片 脱 落5 级 地 上 部 分 枯 死 或 仅 剩 茎 秆C.2 病 害 危 害 程 度病 害 危 害 程 度 划 分 标
26、准 见 表 C.2。 表 C.2 病 害 危 害 程 度 划 分 标 准危 害 程 度 病 情 指 数 1 轻 发 生 52 中 等 偏 轻 5 1 03 中 等 1 0 1 54 中 等 偏 重 1 5 2 55 大 发 生 2 5C.3 病 情 调 查圆 斑 病 病 情 系 统 调 查 表 见 表 C.3。 DB53/T 1029-2021 9 表 C.3 三 七 圆 斑 病 病 情 系 统 调 查 表单 位 ： 日 期 ： 年 月 日地点 田块类型 七龄 生育期 调查株数 发病株数 病株率（% ） 发 病 级 别 病情指数 备注0级 1级 2级 3级 4级 5级C.4 发 病 率 、 病
27、 情 指 数 、 防 治 效 果 计 算C.4.1 发 病 率发 病 率 计 算 公 式 见 式 （ C.1） 。 I = ZP 100(C.1)式 中 ：I发 病 率 ， %；P发 病 株 （ 叶 ） 数 ；Z调 查 总 株 （ 叶 ） 数 。C.4.2 病 情 指 数病 情 指 数 计 算 公 式 见 式 （ C.2） 。 R = Dm DPiP 100(C.2) 式 中 ：R病 情 指 数 ， %；Pi各 级 发 病 数 ；D各 级 代 表 值 ；P调 查 总 株 （ 叶 ） 数 ；Dm最 高 级 代 表 值 。C.4.3 防 治 效 果防 治 效 果 计 算 公 式 见 式 （ C.3） 。 F = GHG 100(C.3) DB53/T 1029-2021 10 式 中 ：F发 病 率 ， %；G对 照 的 病 情 指 数 ；H防 控 的 病 情 指 数 。 _ DB53/T10292021
