1、ICS 65.020.01CCS B 05 DB23黑 龙 江 省 地 方 标 准DB23/T2922 -2021 注 ：注 ：水 曲 柳 腋 芽 微 繁 技 术 规 程 2021-06-29 发 布 2021-07-28实 施黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB23/T 2922 -2021 I 前 言本 文 件 按 照 GB/T1.12020 标 准 化 工 作 导 则 第 1部 分 ： 标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定起 草 。本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利 。 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别
2、专 利 的 责 任 。本 文 件 由 黑 龙 江 省 林 业 和 草 原 管 理 局 提 出 。本 文 件 起 草 单 位 ： 东 北 林 业 大 学 、 巴 彦 县 双 鸭 山 林 场 、 绥 棱 县 国 有 林 场 三 吉 台 林 场 、 黑 龙 江 省 山 河屯 林 业 局 黑 龙 江 省 苇 河 林 业 局 、 哈 尔 滨 市 林 业 工 作 管 理 总 站 、 黑 龙 江 省 庆 安 国 有 林 场 管 理 局 、 哈 尔 滨 市呼 兰 区 黄 土 山 林 场 、 黑 龙 江 省 应 急 救 援 保 障 中 心 、 黑 龙 江 省 林 业 和 草 原 第 二 调 查 规 划 设 计
3、院 、 五 常 市 森林 病 虫 防 治 检 疫 站 、 五 常 市 林 业 工 作 总 站 、 五 常 市 胜 利 林 场 。本 文 件 主 要 起 草 人 ： 詹 亚 光 、 齐 凤 慧 、 于 磊 、 车 德 军 、 林 显 峰 、 曾 凡 锁 、 薛 文 辉 、 刘 林 、 何 利 明 、 谢 春 风 、 赵 晓 军 、 张 连 生 、 李 云 庆 、 冯 丹 、 代 文 栋 、 王 培 强 、 郑 宏 、 王 丽 娜 、 李 轶 男 、 高 群 、 夏 晨 、 于航 、 高 航 、 李 晓 彬 。 DB23/T 2922 -2021 1 水 曲 柳 腋 芽 微 繁 技 术 规 程1
4、范 围本 文 件 规 定 了 水 曲 柳 （ Fraxinus mandshurica Rupr.） 腋 芽 微 繁 的 外 植 体 采 集 与 表 面 消 毒 、 培 养 基 选择 及 配 制 、 组 织 培 养 程 序 、 组 培 苗 移 栽 、 苗 期 管 理 和 生 产 档 案 。本 文 件 适 用 于 水 曲 柳 腋 芽 微 繁 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款 。 其 中 ， 注 日 期 的 引 用 文件 ， 仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本
5、文 件 ； 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。LY/T1000 容 器 育 苗 技 术LY/T1671 水 曲 柳 林 人 工 培 育 技 术 规 程LY/T1882 林 木 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程3 术 语 和 定 义本 文 件 没 有 需 要 界 定 的 术 语 和 定 义 。4 外 植 体 采 集 与 表 面 消 毒4.1 外 植 体 采 集 水 曲 柳 优 树 当 年 生 穗 条 上 带 有 顶 芽 或 者 腋 芽 的 茎 段 作 为 组 织 培 养 的 外 植 体 。4.2 消
6、 毒按 LY/T 1882的 规 定 执 行 。5 培 养 基 选 择 及 配 制5.1 初 代 培 养 基WPM固 体 培 养 基 ， 附 加 20gL -1蔗 糖 、 7gL-1琼 脂 和 1mgL-1 6-BA（ 6-苄 基 腺 嘌 呤 ） ， pH=5.86.0。5.2 继 代 和 分 化 培 养 基继 代 培 养 基 1为 WPM液 体 培 养 基 ， 附 加 30gL-1蔗 糖 和 0.6mg/LTDZ（ 噻 苯 隆 ） （ pH=5.86.0） ；继 代 培 养 基 2为 WPM固 体 培 养 基 ， 附 加 30gL-1蔗 糖 、 0.05mg L-1 TDZ、 0.6mgL-
7、1 BA和 7gL-1琼脂 （ pH=5.86.0） ； DB23/T 2922-2021 2 芽 分 化 增 殖 培 养 基 为 WPM固 体 培 养 基 ， 附 加 30gL-1蔗 糖 、 1.0mgL-1 ZT（ 玉 米 素 ） 和 7gL-1琼 脂（ pH=6.06.5） 。5.3 生 根 培 养 基生 根 培 养 为 WPM固 体 培 养 基 ， 附 加 20gL-1蔗 糖 、 1.4mgL-1 IBA（ 吲 哚 丁 酸 ） 、 0.7mgL-1NAA（ 萘乙 酸 ） 和 7gL-1琼 脂 （ pH=5.86.0） 。5.4 培 养 基 母 液 的 配 制 及 保 存按 LY/T 1
8、882的 规 定 执 行 。5.5 培 养 基 的 灭 菌按 LY/T1882的 规 定 执 行 。 6 组 织 培 养6.1 条 件温 度 25 2 ， 湿 度 60%70%， 光 照 16h无 光 8h交 替 培 养 ， 光 照 强 度 40molm-2s-1 80molm-2s-1；在 无 光 条 件 下 液 体 培 养 时 ， 摇 床 转 速 60rpmmin-1。6.2 初 代 培 养取 灭 菌 （ 121 灭 菌 20min） 的 刀 具 、 镊 子 、 培 养 皿 ， 将 消 毒 的 茎 段 放 入 培 养 皿 中 ， 切 去 茎 节 两 端变 褐 部 分 露 出 新 鲜 组 织
9、 ， 接 入 初 代 培 养 基 中 光 照 培 养 20d30d， 至 芽 萌 发 和 生 长 。6.3 继 代 和 分 化 增 殖 培 养萌 发 芽 接 种 到 继 代 培 养 基 1中 液 体 培 养 20 d30d， 转 入 继 代 培 养 基 2中 ， 光 照 培 养 20d30 d， 再 转 入 芽 分 化 增 殖 培 养 基 ， 在 光 照 条 件 下 培 养 25d35d， 直 至 新 芽 分 化 。6.4 壮 苗 生 根 培 养新 芽 转 接 到 生 根 培 养 基 中 ， 培 养 20d30d后 ， 待 芽 长 至 3cm5cm长 ， 基 部 形 成 不 定 根 时 ， 切
10、 下 单个 芽 再 转 入 生 根 培 养 基 中 ， 培 养 至 根 长 约 1cm。7 组 培 苗 移 栽7.1 基 质 配 置按 LY/T 1000的 规 定 执 行 。7.2 环 境 要 求 温 度 23 27 、 湿 度 60%90%的 温 室 内 自 然 光 照 。7.3 移 栽将 灭 菌 的 基 质 ， 装 入 口 径 6cm8cm的 无 纺 布 育 苗 袋 中 ， 用 不 含 蔗 糖 和 琼 脂 的 生 根 培 养 基 浇 透 。 将带 有 3个 以 上 根 的 组 培 苗 栽 植 于 育 苗 袋 ， 空 气 湿 度 80%90%； 移 栽 7 d后 湿 度 控 制 在 60%70%。 DB23/T 2922-2021 3 8 苗 期 管 理按 LY/T 1671的 规 定 执 行 。9 生 产 档 案应 建 立 生 产 档 案 ， 内 容 包 括 ： 外 植 体 采 集 与 表 面 消 毒 、 培 养 基 选 择 及 配 制 、 组 织 培 养 程 序 、 组 培 苗移 栽 和 苗 期 管 理 等 。
