1、ICS 65.020.01 B 16 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1964 2020 欧洲樱桃实蝇监测技术指南 Requirement for Rhagoletis cerasi (L.) monitoring 2020-08-28 发布 2020-09-28 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发布 DB15/T 1964 2020 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 “请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。” 本标准有中华人民共和国满洲里海关提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和
2、国满洲里海关、中华人民共和国阿拉山口海关、中华人民共和国 兰 州海关、中华人民共和国二连海关。 本标准主要起草人 ：刘玮琦、李兰、陈超、王溪桥、杨东来、刘振伟、任立新、袁淑珍、王旭。 DB15/T 1964 2020 1 欧洲樱桃实蝇监测技术指南 1 范围 本标准规定了检疫性有害生物欧洲樱桃实蝇 (Rhagoletis cerasi (L.) 的监测准备、监测区域、监 测寄主、监测时期、监测用品、监测方法、疫情诊断和监测报告等要求。 本标准适用于进出境口岸和田间欧洲樱桃实蝇 (Rhagoletis cerasi (L.) 的监测。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 诱剂 a
3、ttractant 引起昆虫向该物质源作定向运动的化学物质。 2.2 监测 survey 在一个地区内为确定某种有害生物的种群特征或存在的品种而在一定时期采取的行动。 3 原理 欧洲樱桃实蝇 (Rhagoletis cerasi (L.)隶属于双翅目 Diptera， 实蝇科 Tephritidae，绕实蝇属 Rhagoletis。 本标准借助欧洲樱桃实蝇成虫对特定诱剂具有较强趋性的特点，辅助于特定的装置捕捉 目标成虫，并按相应的技术要求进行操作 。 4 仪器及用具 4.1 仪器 体视显微镜、干燥箱、冰箱。 4.2 用具 诱捕器 (参见附录 A)、 手持放大镜、小型干燥器、解剖刀、解剖针、标签
4、纸、养虫箱、 40 目 （孔 径 0.425 mm） 防虫网罩、白瓷盘、 镊子、指形管、昆虫针、医用剪刀、脱脂棉 。 5 试剂 5.1 除非另有说明，在检验中仅使用确认的分析纯试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。 DB15/T 1964 2020 2 5.2 二甲苯（ C8H10）、碳酸铵（ (NH)CO）、乙酸铵（ CH3COONH4）、乙醇（ C2H6O）、乙酸丁酯（ C6H12O2）、 福尔马林（ CH2O）和冰醋酸（ CH3COOH）。 6 虫情监测 6.1 成虫监测 6.1.1 监测准备 收集当地与欧洲樱桃实蝇及其寄主状况相关的信息并进行 整理、分析，制定简要的监测计划。 6.1.
5、2 监测区域 6.1.2.1 发生区 如果有欧洲樱桃实蝇的发生，重点监测发生疫情的有代表性地块和发生边缘区域。主要监测疫 情发生动态和扩散趋势。 6.1.2.2 未发生区 重点监测高风险区域，如：来自欧洲樱桃实蝇疫情发生国的寄主植物、植物产品以及其他限定 的集散地和主要消费区、运输工具、进口该昆虫寄主植物产品集散地和主要消费区等。 6.1.3 监测寄主 李属（ Prunus sp.）植物：酸樱桃（ Prunus cerasus），欧洲甜樱桃（ Prunus avium），黑樱桃 （ Prunus serotina），马哈利酸樱桃（ Prunus mahaleb）；忍冬属（ Lonicera s
6、p.）植物：金银忍冬 (Lonicera xylosteum)、 新疆忍冬（ Lonicera tatarica）、小花忍冬（ Lonicera tatarica L. var. Micrantha）；小檗属（ Berberis sp.） 植物。 6.1.4 监测时期 监测时期原则上依据当地气温而定，具体方法是：当月平均温度高于 15时开展监测；当月平 均气温低于 10时，无需开展监测；当月平均温度介于 10与 15之间时，如监测区域内有寄主 果实存在或其他原因需要监测的， 则需展开监测。 6.1.5 监测用品 6.1.5.1 诱剂 按 碳酸铵（ g）：乙酸铵（ g） =1:1(质量比 )进行
7、配制 。将 诱剂 装入带孔的 5mL 聚乙烯小瓶中， 悬挂于诱捕器上 ，适时更换诱剂。 6.1.5.2 诱捕器 本标准建议使用 十字交叉型、圆筒型或矩形 诱捕器进行监测（参见附录 A）。 6.1.6 监测方法 6.1.6.1 监测点设置 DB15/T 1964 2020 3 6.1.6.1.1 发生区 在有欧洲樱桃实蝇发生的区域内，于疫情中心地带确定 3 5 个固定诱捕点；在疫情发生区周边 区域，根据寄主植物的分布情况，固定 10 15 个诱捕点，进行常年监测。每个诱捕点可放置 6.1.5 中三种诱捕器之一。 6.1.6.1.2 未发生区 根据欧洲樱桃实蝇的寄主植物如樱桃、忍冬属 等植物的分布
8、和风险大小，固定 5 10个诱捕点， 在 6.1.4中规定的监测时期内进行监测；来自欧洲樱桃实蝇疫情发生国的寄主植物及植物产品以及其 他限定的集散地和主要消费区、进口该昆虫寄主植物产品集散地和主要消费区等，根据风险大小， 固定 3 5个诱捕点，进行监测。诱捕器可选择 6.1.5中三种诱捕器之一。 6.1.6.2 诱捕器安放 诱捕器放置在树冠顶部阳光充足的地方。诱捕器附近安放醒目标志以防止受到人为破坏。 6.1.6.3 诱捕检查和维护 在整个监测期间，每隔 7d 检查 1 次诱捕器上的实蝇标本，如发现疑似目标实蝇的成虫可使用二 甲苯等有机溶剂将粘板上 的粘胶溶解后取下标本，放入 75%乙醇溶液，
9、贴上标本采集编号，带回实 验室鉴定。记录结果并填写检疫性实蝇诱集监测记录表（参见附录 B）。 诱捕器出现损坏或丢失的状况，应立即进行更换并做好相应的记录。更换下来的废旧诱捕器和 诱饵应集中销毁。 6.2 幼虫和蛹的监测 6月上旬至 9月下旬，在樱桃园或忍冬科植物园中采集，查看果皮上有无产卵孔、脱果孔，并检 查落地果周围地表及 5cm深的表土中有无幼虫和蛹。将符合附录 C描述症状的果实和收集到的虫体带 回室内饲养鉴定。 6.3 疫情诊断 6.3.1 现场诊断 如发现可疑的成虫，可根据成虫的形态特征以及寄主植物的 受害症状作出初步诊断，并视需要 采集有关标本。诊断可依据欧洲樱桃实蝇形态特征（参见附
10、录 D）进行鉴定。 6.3.2 室内诊断 在监测中如有可疑的虫蛀果实，解剖后发现实蝇幼虫标本，带回实验室进行封闭式饲养至成虫 进行鉴定。如发现疑似欧洲樱桃实蝇，送检鉴定。 6.3.3 标本保存 成虫制作为针插标本或浸泡标本。卵、幼虫、蛹制成浸泡标本。浸泡液为福尔马林、酒精、冰 醋酸混合液（ 5份福尔马林、 15份 80%酒精、 1份冰醋酸混合而成）。填写标本标签，连同标本一起妥 善保存。 6.4 监测记录与归档 根据监测结果填写监测记录表（参见附录 B和 C）。 DB15/T 1964 2020 4 6.5 监测报告 对监测结果进行整理汇总形成监测报告，并按要求逐级上报。 DB15/T 196
11、4 2020 5 A A 附 录 A （资料性附录） 欧洲樱桃实蝇诱捕器特征图 A.1 十字交叉型 诱捕器 该诱捕器是用聚丙烯材料制成的两张 15 cm 20 cm 的黄色粘板十字交叉组成，聚丙烯材料厚 1mm。 粘性表面积为 600 cm2。颜料波长范围 500 nm 550 nm 。黄色粘板十字交叉位置设置两个小孔便于 安装盛放诱剂的小瓶。诱剂小瓶为聚丙烯小瓶。 图 A.1 十字交叉型诱捕器 A.2 圆筒型诱捕器 该诱捕器用聚丙烯材料制成的黄色粘板圆筒形诱捕器，高 20 cm，周长 54 cm。聚丙烯材料厚 0.8 mm。诱捕器所用颜料在 500 nm 550 nm 波长范围（黄绿区域）内
12、反射率最强，在 300 nm 400 nm 波 长范围（紫外区域）有一个二次峰，在 450 nm波长左右（蓝色区域）的反射率最低。圆筒诱捕器的 中间位置设置两小孔便于安装盛放诱剂的小瓶。诱剂小瓶为聚丙烯小瓶。 DB15/T 1964 2020 6 图 A.2 圆筒型诱捕器 A.3 矩形诱捕器 用 聚丙烯材料 制成的 矩形 黄色粘板诱捕器 ，长 30cm，宽 20cm。颜色为荧光黄色。使用时将矩 形黄色粘板的长边对折，用钉子通过粘板边上的孔洞将两短边固定，使有粘性的一面朝外。诱捕器 设置两小孔便于安装盛放诱剂的小瓶。诱剂小瓶为聚丙烯小瓶。 图 A.3 矩形诱捕器（左：对折前图；右：对折后图） D
13、B15/T 1964 2020 7 附 录 B （资料性附录） 欧洲樱桃实蝇诱集监测记录表 表 B.1 欧洲樱桃实蝇诱集监测记录表 诱捕器放置时间： 监测人： 监测单位（盖章）： 监测地点（乡镇 / 村 /街道）及经纬 度 寄 寄主植物 诱 诱捕器类型 捕获实蝇数量 /检查日期 备注 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 DB15/T 1964 2020 8 附 录 C （ 资料性附录） 欧洲樱桃实蝇诱集监测汇总表 表 C.1 欧洲樱桃实蝇诱集监测汇总表 时间： 年 月 监测地点 （乡镇 /村） 诱捕器数量 实蝇种类 月诱集量 （头） 监测员 监测单位 报告单位（盖章）： 制表人签名： 填报
14、日期： 年 月 日 DB15/T 1964 2020 9 附 录 D （资料性附录） 欧洲樱桃实蝇基本信息 D.1 形态鉴定特征 D.1.1 成虫 雌虫体长 4.5 mm 5.5 mm ，雄虫体长 3.5 mm 4.5 mm见图 D.1，黑色，头和胸部具黄色斑点。 中胸背板具 4条棉毛纵纹。翅长 2.5 mm 4.0 mm，无后端横带，中横带和端前横带分离，具副前缘横 带见图 D.2。小盾片黄色，两侧具黑色斑纹。腹部黑色，产卵管长 0.7 mm 0.8 mm。 图 D.1 雌成虫（左）雄成虫（右） 引自 Daniel C.和 Grunder J. DB15/T 1964 2020 10 图 D
15、.2 实蝇形态特征图 仿 White & Elson-Harris D.1.2 卵 卵粒大约长 0.70 mm 0.80 mm，宽 0.20 mm 0.30 mm，乳白色。 D.1.3 幼虫 老熟幼虫长 4.5mm 6.0 mm，蠕虫形，体节不骨化，白色至黄色。口感器圆形，有 2个小感器。 第 8腹节中间叶甚发达，胸部前气门指突 12 16个；腹末气门裂长是宽的 4 5倍，有一细的骨化缘。 肛叶大，突起，前有一不连续的小刺列，在肛开口下方有小集合的刺见图 D.3。 DB15/T 1964 2020 11 图 D.3 幼虫 D.1.4 蛹 围蛹，淡黄色，圆柱形，长约 3.0 mm 4.0 mm，
16、直径 1.8 mm 2.2 mm。蛹体上残留有由幼虫前 气门突起而成的暗点，后端后气门处稍收缩见图 D.4。 图 D.4 蛹 DB15/T 1964 2020 12 D.2 地理分布 亚洲：格鲁吉亚、伊朗、哈萨克斯坦、吉尔吉斯斯坦、塔吉克斯坦、土耳其、土库曼斯坦、乌 兹别克斯坦。 北美洲：加拿大、美国纽约州尼亚加拉县。 欧洲： 奥地利、比利时、保加利亚、克罗地亚、捷克、斯洛伐克、丹麦、爱沙尼亚、法国、德 国、希腊、匈牙利、意大利、拉脱维亚、立陶宛、摩尔多瓦、荷兰、挪威、波兰、葡萄牙、罗马尼 亚、俄罗斯、塞尔维亚、黑山、西班牙、瑞典、瑞士、乌克兰。 D.3 寄主范围 李属（ Prunus sp.
17、） 植物：酸樱桃（ Prunus cerasus ），欧洲甜樱桃（ Prunus avium），黑樱桃 （ Prunus serotina），马哈利酸樱桃（ Prunus mahaleb）；忍冬属（ Lonicera sp.）植物：金银忍冬 (Lonicera xylosteum)、 新疆忍冬（ Lonicera tatarica）、小花忍冬（ Lonicera tatarica L. var. Micrantha）；小檗属（ Berberis sp.） 植物。 D.4 为害症状 欧洲樱桃实蝇以幼虫为害果实。雌成虫产卵与寄主果实果皮下，产 卵是刺伤果实，导致汁液流 溢，引起病原物入侵而腐烂，产
18、卵孔小见图 D.5。幼虫潜居于果肉内取食果实汁液，严重影响果实品 质见图 D.6。 图 D.5 产卵孔 引自 Daniel C.和 Grunder J. DB15/T 1964 2020 13 图 D.6 幼虫危害状 引自 Daniel C.和 Grunder J. D.5 传播途径 主要以卵和幼虫随被害果实或以蛹随包装物品，运输工具或寄主植物所附土壤等传播。 D.6 生物学特性 欧洲樱桃实蝇一年发生一代，并且有蛹的强制性冬季滞育，其蛹可以在土壤中停留两个或更多 个冬天用来应对在特殊年份寄主植物结果失败的情况而引起的“扩散风险”。该实蝇冬眠发生在紧 邻寄主植物的土壤中，成虫的出现和生命周期与寄主植物的物候习 性关系密切。成虫的羽化受到春 季土壤温度、冬季滞育的温度条件和寄主植物地理位置的影响。在瑞士、亚洲和德国南部，蛹的羽 化通常发生在 5月中旬至 6月中旬 。产卵前，成虫通过 6 d 13 d 的适宜的温度条件下发育，在此过 程中他们需要摄取蛋白和水以保证其发育。一般雌成虫在一颗果实上产一枚单卵。幼虫的发育时间 为 17 d 30 d 之间，共三个龄期。 _
