1、ICS 11.020 C 50 WS 中 华 人 民 共 和 国 卫生 行 业 标 准 WS/T 404.4 2018 临床常用生化检验项目参考区间 第 4 部分：血清总胆红素、直接胆红素 Reference intervals for common clinical biochemistry tests Part 4： Serum total bilirubin and direct bilirubin 2018 - 04 - 27 发布 2018 - 11 - 01 实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 发布 WS/T 404.4 2018 I 前 言 WS/T 404临床常用生化检验项
2、目参考区间分为 8 个部分： 第 1 部分：血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶和 -谷氨酰基转移 酶； 第 2 部分：血清总蛋白、白蛋白； 第 3 部分：血清钾、钠、氯； 第 4 部分：血清总胆红素、直接胆红素； 第 5 部分：血清尿素、肌酐； 第 6 部分：血清总钙、无机磷、镁、铁； 第 7 部分：血清乳酸脱氢酶、肌酸激酶； 第 8 部分： 血清淀粉酶。 本部分为 WS/T 404 的第 4 部分。 本部分按照 GB/T 1.1 2009 给出的规则起草。 本部分 起草单位：中国医科大学附属第一医院、复旦大学附属中山医院、 北京医院 、北京大学第三 医院、四川大学华西医院
3、、中国人民解放军第四军医大学附属第一医院、广东省中医院。 本部分主要起草人：尚红、潘柏申、陈文祥、张传宝、张捷、王兰兰、郝晓柯、黄宪章、申子瑜、 赵敏、穆润清、郭玮、王蓓丽。 WS/T 404.4 2018 1 临床常用生化检验项目参考区间 第 4 部分：血清总胆红素、直接胆红素 1 范围 WS/T 404的本部分规定了中国成年人群血清总胆红素、直接胆红素的参考区间及其应用。 本部分 适用于医 疗卫生机构实验室血清 总胆红素、直接胆红素检验结果 的报告和解释，相关体外诊 断厂商也可参照使用。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于
4、本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 WS/T 402 临床实验室检验项目参考区间的制定 3 术语和定义 WS/T 402 界定的术语和定义适用于本文件。 4 参考区间 4.1 中国 成年人群 （ 20 岁 79 岁） 血清总胆红素、直接胆红素参考区间见表 1。 表 1 中国成年人群血清总胆红素、直接胆红素参考区间 项目 分组 参考范围 (mol/L) 血清总胆红素 (TBIL) 男 26.0 女 21.0 男 /女 23.0 血清直接胆红素 (DBIL) 系统 a 8.0 系统 b、 c 4.0 注 1： 直接胆红素 无国际公认的计量学溯源标准，因此
5、本 文件 目前提供系统特异的参考区间。 注 2： 系统 a：罗氏配套系统；系统 b：贝克曼 DXC系列配套系统；系统 c：贝克曼 AU系列配套系统，均为重氮法。表 中列出分析系统是为了方便实验室合理引用适宜的参考区间或进行参考区间转移时参考，并不表示对这些产 品的认可。 4.2 中国成年人群血清 总胆红素、直接胆红素参考区间建立过程的相关信息参见附录 A。 WS/T 404.4 2018 2 5 参考区间应用 5.1 一般原则 5.1.1 临床实验室应首选本 文件 的参考区间。 注 1： 参考区间建立研究工作量和成本巨大，临床实验室引用参考区间比自己建立参考区间更为客观、可行。 注 2： 本参
6、考区间基于中国成年人群多中心研究结果，研究中的总胆红素检验结果可溯源至国际公认参考方法或标 准物质，参见附录 B。 注 3： 直接胆红素无国际公认的计量学溯源，本 文件 未列出参考区间的检测系统的使用者可 进行参考区间转移，并 在验证通过的基础上使用。 5.1.2 使用本 文件 的参考区间前应进行必要的验证或评估。 注 1： 外部参考区间在实 验室的适用性主要取决于实验室与参考区间建立时检验结果的可比性和人群的适用性。 注 2： 检验结果只有存在恒定的系统偏倚（检验结果正确度）才影响参考区间的适用性，过大的实验室内变异是实 验室分析质量问题，不是参考区间适用性问题。 注 3： 本 文件 的参考
7、区间基于血清的检测结果建立，若临床实验室使用的标本类型为血浆，应进行适当的评估以决 定是否采用本参考区间。 5.2 参考区间的评估、验证和使用 5.2.1 按 WS/T 402 的有关规定进行参考区间评估和验证。 5.2.2 如实验室确认与参考区间建立时的检验结果可比且人群适用，则可直接引用本 文件 的参考区间， 若不确定或基 于实验室管理体系的要求需对引用的参考区间进行验证，可按下列步骤进行： a) 筛选 合格参考个体不少于 20 名，筛选标准参见 A.2.2； b) 按 本实验室操作程序采集、处理、分析样品； c) 按 适当方法检查并剔除离群值（若有，则另选参考个体补足）； 注： 离群 值
8、检验采用 Dixon方法：首先将检测结果按照大小排序并计算极差 R，然后分别计算最大和最小值与其相邻 数值之差 D；若 D/R 1/3，则将最大值或最小值视为离群值予以剔除；将余下数据重复前述步骤进行离群值检 验，直至剔除所有离群值。 d) 如 选 择 20 名合格的参考个体，将 20 个检验结果与参考区间比 较，若超出参考区间的数据不超 过 2 个，则通过验证；若超过 2 个，则另选 20 名合格参考个体重新按照上述判断标准进行验 证。如参考个体多于 20 名，超出参考区间的数据不超过 10%则通过验证；若超过 10%的数据超 出参考区间，则另选至少 20 名合格 参考个体，重新按照上述判断
9、标准进行验证。 验证结果若 符合要求，可直接使用参考区间，否则应查找原因。 5.3 参考区间未通过验证时的处理程序 5.3.1 对未通过验证的情况，应首先评价分析质量尤其是正确度，若证实是检测系统导致的分析质量 问题，应改进或更换分析系统。分析质量评价可采用，但不限于下列方式： a) 分 析 可互通有证标准物质或其他适宜参考物质； b) 参加 适宜正确度验证计划或标准化计划； c) 与 性能可靠的其他系统或方法进行比较。 5.3.2 若证明是人群原因（如民族、高海拔地区、特殊生活习惯等因素）未通过验证，则应按 WS/T 402 的要求建立或引用适宜参考区间。 WS/T 404.4 2018 3
10、 A A 附 录 A （资料性附录） 参考区间建立过程的相关信息 A.1 参考区间建立的步骤 本 文件 参考区间按 WS/T 402的要求 采用多中心的研究方式建立，主要包括以下步骤： a) 选择 参考个体，组成参考样本组； b) 采集 处理血液样品，获得血清样品； c) 检测 血清样品，获得参考值； d) 统计 处理参考值，建立参考区间。 A.2 参考个体选择 A.2.1 参考样本组的选择 设计 总体参考人群为我国成年健康人群，参考样本组选自东北（沈阳）、华北（北京）、西北（西 安）、华东（上海）、华南（广州） 和西南（成都） 6地区城乡居民，每地区入选参考个体总计约 720 名，每十岁年龄
11、段的参考个体数至少 120名，男女比为 1:1，年龄范围为 20岁 79岁 A.2.2 参考个体的选择、 各 中心分别在所在地区募集足够的可能参考个体，征得知情同意，进行参考个体的筛选，组成参考 样本组。 通过 问卷调查、体格检查、实验室检查筛选参考个体，满足以下要求： a) 自觉健康； b) 无 下列疾病：急慢性感染（急性上呼吸道感染、肺炎、肺结核等）、消化系统疾病（肝硬化、 肝炎、脂肪性肝病、胆石病、胆囊炎、慢性腹泻、炎症性肠病等）、肾脏疾病（慢性肾脏病、 急性肾损伤等）、代谢和营养疾病（糖尿病、代谢综合征、血脂异常和脂蛋白异常血症、高尿 酸血症与痛风等）、风湿性疾病（类风湿性关节炎、系统
12、性红斑狼疮等）、甲状腺疾病（甲状腺 功能亢进症、甲状腺功能减退症等）、血液系统疾病（贫血、白血病等）、动脉粥样硬化和血管 疾病、心脏病、肌病、恶性肿瘤、烧伤和肌肉损伤、肥胖或消瘦 BMI（体重指数） 28 kg/m2 或 18.5kg/m2、高血压（收缩压 140mmHg 和 /或舒张压 90mmHg）； c) 6 个月内未进行手术， 4 个月内未献血、输血或大量失血， 2 周 内未服用药物； d) 无 酗酒（长期饮酒或 2 周内大量饮酒）、嗜烟（吸烟量 20 支 /d）； e) 近期 无剧烈运动或重体力劳动； f) 女性 未处于妊娠或哺乳期。 注： 参考 个体未通过基因检测排除 Gilber
13、t综合征、 Dubin-Johnson综合征、 Rotor综合征及 Crigler-Najjar综合征 等先天性良性高胆红素血症。 A.3 血液样品采集与处理 WS/T 404.4 2018 4 血液 样品采集与处理原则按 WS/T 225 2002有 关要求进行，具体要求如下： a) 参考 个体准备：采血前三天保持正常生活习惯，不做剧烈运动和重体力劳动，采血前一天晚餐 后至第二天上午采血前禁食，禁食时间 8 h 14 h； b) 采血 ：受检者取坐位，使用真空采血方式，自肘前静脉采血 ； c) 血液 样品处理：样品在采集后 2 h 内及时分离血清，检查并剔除溶血、黄疸或乳糜样品，血清 分离后
14、 2 h 内进行分析。 A.4 血清样品分析 A.4.1 分析 系统：目前我国临床实验室常用的多种分析系统。 注： 本 参考区间建立所使用的分析系统及其检测结果的计量学溯源见附录 B。各分析系统检测结果的正确度验证见 A.4.2。 A.4.2 分析 系统 性能评估：分析系统于参考个体血清样品分析前进行分析性能评估。按仪器和试剂说 明书规定的操作程序运行分析系统。精密度评估：分析两个水平质控物，每日测 定 1批，重复测定 4次， 测定 5 d；正确度验证：分析有证标准物质进行 正确度验证。精密度和正确度满足 WS/T 403的有关要求。 A.4.3 血清样品分析及其质量控制：分析性能符合要求后进
15、行血清样品分析，每份血清样品分析一次。 精密度控制采用两个水平质控物质，每独立分析批前后进行质控物质分析；定期分析有证标准物质进行 正确度评估。 A.5 参考值处理与参考区间建立 A.5.1 离群 值检查：按照 Dixon方 法检查并剔除各组离群值。 A.5.2 分组判断：按照 nested ANOVA方法对性别、年龄、地区各组参考值进行组 -组检验，判断需否分 组，将不需分组的参考值合并，确定实际参考样本组。 注： 通过 统计学分析 ，总胆红素及直接胆红素在不同年龄分组及不同地区分组间无统计学差异； 总胆红素 参考区间 需进行性别分组 ； 直接胆红素 参考区间需进行检测系统分组。 A.5.3
16、 参考 限和参考区间建立：用非参数方法计算参考样本组参考值的 95百分位数作为参考上限，不 设参考下限。根据临床意见对参考限进行适当取整，形成参考区间。 WS/T 404.4 2018 5 B B 附 录 B （资料性附录） 血清总胆红素、直接胆 红素的检测方法和检测结果的计量学溯源 血清 总胆红素和直接胆红素检测方法和检测结果的计量学溯源见 表 B.1。 表 B.1 血清 总胆红素和直接胆红素检测方法和检测结果的计量学溯源 项目 方法 计量学溯源 总胆红素 重氮法 /矾酸盐氧化法 NIST SRM916a 直接胆红素 重氮法 WS/T 404.4 2018 6 参 考 文 献 1 WS/T
17、225 2002 临床化学检验血液标本的收集与处理 2 WS/T 403 2012 临床生物化学检验常规项目分析质量指标 3 王吉耀 .内科学 .2 版 .北京 ： 人民卫生出版社， 2010 4 Donald S.Young. 分析前因素对临床检验结果影响 . 3 版 . 李艳，等，译 . 北京：人民军医出 版社 ， 2009 5 Clinical and Laboratory Standards Institute（ CLSI） . Defining， establishing， and verifying reference intervals in the clinical labor
18、atory： Approved Guideline Third Edition. CLSI document C28-A3c. CLSI， Wayne， PA， USA， 2010 6 Ichihara K， Boyd JC， IFCC Committee on Reference Intervals and Decision Limits（ C-RIDL） . An appraisal of statistical procedures used in derivation of reference intervals. Clin Chem Lab Med， 2010， 48： 1537-1551 _
