1、 ICS 65.020.30 CCS B 41 DB51 四 川 省 地 方 标 准 DB51/T 2708 2020 副猪嗜血杆菌防治技术规范 四川省 市场监督管理局 发布 2020 - 10 - 21 发布 2020 - 12 - 01 实施 DB51/T 270820 20 I 目 次 前言 . 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 诊断 . 1 5 预防 . 2 6 治疗 . 3 DB51/T 2708 2020 III 前 言 nullnullnullnull本文件按照 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnul
2、lnullnull 标准化工作导则null第null部分：标准化文件的结构和起草规则 的规定 起草。 本文件由四川省农业农村厅提出、归口并解释。 本文件由四川省市场监督管理局批准。 本文件起草单位：四川省畜牧科学研究院。 本文件主要起草人：康润敏、于吉锋、谢晶、曹冶、魏勇、林毅、廖党金、叶勇刚、李兴玉、肖璐、 叶健强、潘梦、戴卓建、张先惠。 DB51/T 2708 2020 1 副猪嗜 血杆菌防治技术规范 1 范围 本文件规定了副猪嗜血杆菌病的术语和定义、 诊断 、预防和治疗方法的要求。 本文件适用于四川省行政范围内副猪嗜血杆菌病的诊断和防治。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规
3、范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 NY/T 3075 畜禽养殖场消毒技术 NY 5027 无公害食品 畜禽饮用水水质 NY/T 5030 无公害农产品 兽药使用准则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 nullnullnull nullnullnullnull副猪嗜血杆菌病 副猪嗜血杆菌病又称格拉泽氏病。是由副猪嗜血杆菌（ Haemophilus parasuis, HPS）所引发的猪 一种泛嗜性细菌性传染病，各年龄段猪均可发病，主要影响断奶前后和保育阶段猪
4、，临床特征以多发性 浆膜炎，如关节炎、胸膜炎、心包炎、腹膜炎和伴发肺炎为主。 4 诊断 4.1 流行特点 病猪和病原携带猪是主要传染源，经呼吸道传播，当猪群中存在呼吸道疾病或饲养环境不良时本病 易多发；断奶、转群、混群或运输也是常见的诱因。副猪嗜血杆菌只感染猪，断奶前后和保育阶仔猪易 感，常见于 2 8周龄的仔猪， 断奶后 10 40d 出现发病峰值。 4.2 临床症状 4.2.1 急性型 高热，体温达 40 41，食欲减退及厌食，咳嗽、呼吸困难，关节肿胀、跛行、步态僵硬， 同 时出现身体颤抖，共济失调等神经症状，可视粘膜发绀。 4.2.1 慢性型 消瘦，被毛粗乱，精神萎靡，咳嗽，呼吸困难、呼
5、吸频率和深度都显著增加，腹式呼吸， 关节发炎甚至肿大，病猪站立困难，不愿行走，呈侧卧状态。 2 4.3 病理变化 胸膜肺炎，胸膜腔积液、肺部被纤维蛋白膜包裹，腹膜存在纤维蛋白沉淀，浆液性、纤维素性渗出 特征明显，心包积液、心包内常见干酪样渗出物与心脏粘连形成“绒毛心”，全身淋巴结肿大出血，关 节肿大，有浆液性渗出性炎症。 4.4 实验室检测 4.4.1 细菌分离培养 无菌采集病料接种含 1 g/mL NAD和5%小牛血清的胰蛋白大豆琼脂培养基（ Tryptic Soy Agar， TSA）， 37培养 24 48 h，经 48 h培养后可见不溶血、半透明、圆形隆起、边缘整齐、光滑湿润、直径约
6、1-2mm 的菌落。革兰氏染色镜检可见呈短杆状、长线状等多种形态阴性杆菌。 5 将 TSA平板上疑似菌落与金黄色葡萄球菌垂直划线无 NAD的鲜血琼脂平板， 37培养 24 48 h，可在 金黄 色葡萄球菌周围长出“卫星现象”。 4.4.2 生化鉴定 将纯培养疑似副猪嗜血杆菌接种含1 g/mL NAD的葡萄糖、蔗糖、半乳糖、麦芽糖、甘露醇等微量 生化鉴定 管，置体积分数 5%CO2培养箱， 37培养 24 h。副猪嗜血杆菌接触酶试验和硝酸盐还原试验 为阳性，能发酵葡萄糖、麦芽糖、木糖、阿拉伯糖、蔗糖、果糖等碳水化合物。 4.4.3 聚合酶链式反应（ PCR） 模板制备：挑取单菌接种含 1 g/m
7、L NAD和 5%小牛血清的 TSB液体培养基， 37摇床中 160 r/min 上震荡培养 12 16 h，采用商品话细菌 DNA提取 试剂盒提取。 引物合成：采用副猪嗜血杆菌 16S rDNA序列中一段合成上游引物： 5-GTGATGAGGAAGGGTGGTGT-3， 下游引物： 5-GGCTTCGTCACCCTCTGT-3，片段长度约 821bp。 反应体系（ 25l）： 2倍 PCR Mix 12.5 l,上游引物 1.0 l，下游引物 1.0 l，模 板 2.0 l， ddH2O 9.5 l 。 反应条件： 94变性 3 min；94 30 s， 55 30 s， 72 1 min，
8、共 35个循环，72 终延伸 10 min。 结果判定： PCR产物经 2%的琼脂糖凝胶电泳，出现约 821 bp 大小的条带判定为副猪嗜血杆菌阳性。 4.4.4 血清型鉴定 制备待检菌株的分型抗原，用1- 15型副猪嗜血杆菌标准阳性血清和阴性血清，按照琼脂扩散试验分 型方法进行 。 5 预防 5.1 饲养管理 国内外引种应隔离饲养 1个月以上方可混群；饲喂营养丰富的全价饲料；保持猪舍通风、光照合理、 密度适宜、禁止混养；做好猪舍冬季保温、夏季防暑降温，保障猪舍内饮水器及食槽数量；饮水中加入 抗应激类药物如多维、维生素 C防止和减少应激，按照科学的免疫程序做好猪瘟、 猪口蹄疫、猪圆环等 做其他
9、病原的免疫；定期检测水质，饮水标准应达到 NY 5027 无公害食品 畜禽饮用水水质要求。 5.2 生物安全 出入猪舍严格消毒；定期对猪舍进行严格消毒，易感猪群及已感猪群可采用干粉消毒剂消毒；全进 全出，猪群转舍或出栏后对猪舍彻底消毒，定期消毒及彻底消毒程序参照 NY/T 3075 的要求进行 。 DB51/T 270820 20 3 5.3 免疫 受该病威胁区域或养殖场可接种血清型相对应的多价油乳剂灭活苗。后备母猪配种前进行 2次副猪 嗜血杆菌苗免疫，前后间隔 3周；母猪每胎产前 4 5周免疫1 次，仔猪在 2 4周龄首免， 3周后二免；种 公猪每半年免疫 1次，规范免疫 记录 。 6 治疗 a) 病猪隔离治疗，可采用恩诺沙星、头孢噻呋、阿莫西林、硫酸卡那霉素等敏感抗生素配合使用地塞 米松，抗生素的使用参照 NY/T 5030 的要求进行，规范药物使用记录。 b) 提高病猪体抗力，可配合黄芪多糖等中药针剂 ,饲料中选择添加麻杏石甘散和荆防败毒散等中药粉 剂。 c) 猪舍、环境、用具进行全面严格消毒，消毒药的选择及消毒程序参照 NY/T 3075 的要求进行 。 料性附录隐性乳房炎诊
