1、 ICS 67.220.10 CCS B 36 DB 42 湖北省 地方标准 DB42/T 1645 2021 生姜脱毒原原种繁育技术规程 Code of practice for virus free seed ginger pre-elite breeding 2021 - 03 - 01 发布 2021 - 05 - 01 实施 湖北 省市场监督管理局 发 布 DB42/T 1645 2021 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 温室、网室要求 . 1 环境要求 . 1 基础设施要 求 . 1 消毒方法 . 2 5 脱毒组
2、培苗快繁 . 2 脱毒组培苗的培育 . 2 病毒检测 . 2 脱毒苗快繁 . 2 6 组培苗驯化栽培 . 3 炼苗 . 3 洗苗 . 3 苗床准备 . 3 定植 . 3 浇定根水 . 3 驯苗期田间管理 . 3 7 原原种生产 . 3 整地施肥 . 4 定植 . 4 田间管理 . 4 收获与贮存 . 4 DB42/T 1645 2021 II 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 2020标准化工作导则 第 1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由湖北省农业科学院提出。 本文件由湖北省农业农村厅归口。
3、 本文件起草单位：湖北省农业科学院经济作物研究所、来凤县农业技术推广中心、咸宁市农业科学 院、鄂州市同源种养殖专业合作社。 本文件主要起草人：吴金平、郭凤领、周洁、矫振彪、覃竹山、符 家平、陈磊夫、徐绳武、肖颖、 邱正明、唐纯、温亮、徐志超、明长春、杨硕。 本文件实施应用中的疑问，可咨询湖北省农业农村厅，联系电话： 027-87665821，邮箱： ； 本文件的有关修改意见建议请反馈至湖北省农业科学院经济作物研究所，联系电话： 027-87380817，邮箱： 。 DB42/T 1645 2021 1 生姜脱毒原原种繁育技术规程 1 范围 本文件规定了生姜（ Zingiber officina
4、le Roscoe）脱毒苗术语与定义，温室、网室要求，脱毒组 培苗快繁，组培苗驯化栽培及原原种生产等基本要求。 本文件适用于湖北省生姜脱毒原原种繁育，其它地区可参考。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 5084 农田灌溉水质标准 GB 15618 土壤环境质量 农用地土壤污染风险管控标准（试行） GB/Z 26584 生姜生产技术规范 NY/T 404 脱毒生姜种姜（苗）病毒检测技术规程 3 术语和定义 下列术语和
5、定义适用于本文件。 脱毒 in vitro virus-free 在无菌操作的条件下，经过茎尖剥离脱去危害生姜的病毒。 脱毒组培苗 in vitro virus-free plantlet 简称脱毒苗，指通过植物组织培养技术获得的，经检测确认不带烟草花叶病毒（ TMV），黄瓜花叶 病毒（ CMV）的种苗。 4 温室、网室要求 环境要求 宜选择气候凉爽、天然隔离条件好的区域，没有其他姜科植物或易引诱蚜虫的作物。 所处地势有利于灌溉和排水。土壤质量应符合 GB 15618要求，水源充足，能满足生产灌溉要求，水 质符合 GB 5084要求。 基础设施要求 温室、网室要具有控温、控湿、控光和良好的通风
6、条件，有防雨和防虫设施。温、网室的门窗和通 风口要装 60目的防虫网纱。温室、网室进门处修建一个可随时消毒的缓冲间。 DB42/T 1645 2021 2 消毒方法 温室、网室及其内部设施应定期消毒。可用硫磺熏蒸、 50%多菌灵可湿性粉剂 800倍液喷洒或 0.1%高 锰酸钾等消毒。 5 脱毒组培苗快繁 脱毒组培苗的培育 5.1.1 选材 选取鲜黄、有光泽、芽多且无伤痕、饱满健壮的姜块，自来水冲洗干净后，埋于洗净的沙床中，在 20 25 条件下催芽，当嫩芽长到 1 cm 2 cm长时用刀片切取备用。 5.1.2 钝化病毒 嫩芽置于恒温箱中， 50 下处理 5 min完成脱毒。 5.1.3 制备
7、培养基 MS+KT（ 1.0 mg/L 1.5 mg/L） +NAA（ 0.5 mg/L 0.6 mg/L） +琼脂（ 4000 mg/L 6000 mg/L） +白糖（ 20000 mg/L 30000 mg/L）， pH调到 5.8，分装入管（瓶）。在 0.15 Mpa/cm2压力下高压灭菌锅灭菌 15 min 20 min，冷却备用。 5.1.4 接种 将入选材料放入纱布袋，用自来水冲洗 1 h后，在无菌条件下，放入 75%酒精中浸 10 s 30 s，再用 0.1%升汞液消毒 8 min 10 min，取出用无菌水冲洗 3次 5次置于吸湿纸上，在体视解剖镜下用手术刀等 工具剥掉幼叶层，
8、切取分生组织 0.1 mm 0.3 mm生长点，迅速接入配置好培养基的试管或培养瓶中，每 瓶接种 1个生长点，注明品种、编号和接种日期。 5.1.5 培养条件 温度 25 28 ，每天光照时数 10 h 16 h， 1500 lx 3000 lx光照强度条件下培养 30 d 60 d，诱 导丛芽。 病毒检测 组培苗 的病毒检测 按照 NY/T 404的 有关规定 执行 。 脱毒苗快繁 5.3.1 脱毒组培苗来源 经病毒 检测 （见 5.2） ，脱除了 TMV、 CMV病毒的组培苗。 5.3.2 继代培养 将 脱毒丛芽块切割成 0.4 cm 0.6 cm小块，留取丛芽基部 0.5 cm 1 cm
9、，并去掉所有根，转入培养基 （见 5.1.3） ，进行丛芽的继代增殖培养 （见 5.1.5） ，以后每隔 25 d 35 d继代 1次；反复继代培养繁殖。 5.3.3 生根培养 DB42/T 1645 2021 3 2 cm 3 cm高的小苗转入 1/2 MS培养基 进行生根培养（见 5.1.5） 。 5.3.4 组培苗出瓶 生根组培苗株高 5 cm 8 cm，茎粗 0.2 cm，生根数 4条时出瓶。 6 组培苗驯化栽培 炼苗 在炼苗间内，打开生根苗瓶口，自然环境条件下放置 2 d 3 d。 洗苗 将炼苗处理的试管苗取出，用清水小心洗净根上的培养基。用 NAA30 mg/L 50 mg/L溶液
10、浸苗根基部 10 min 15 min，转入 800倍的百菌清药液浸苗根基部不超过 15 min，取出后定植。 苗床准备 6.3.1 整地 选择土壤肥沃、疏松且排水良好的砂质壤土或腐殖质壤的温室或者网室。将细土、草炭按照 5 1比 例混合，起宽 1 m 1.5 m，高 8 cm 12 cm的畦。 6.3.2 施肥 每 667 m2施有机肥 1000 kg，复合肥（ N:K:P=15:15:15） 50 kg。 定植 定植时间在 4月 5月。按行距 15 cm，株距 10 cm，在苗床上开 3 cm 5 cm的沟，将苗放入沟内排好， 组培苗覆土 0.5 cm 1 cm。定植初期温度保持在 18
11、25 ，湿度 85% 90%，苗床含水量 70% 80%，大 棚加盖遮阴网。 浇定根水 移栽后及时浇定根水，分 2次 3次浇透。 驯苗期田间管理 6.6.1 水分管理 保持苗床湿润，持水量 50% 60%。 6.6.2 施肥管理 定植成活后，根据苗情喷施 0.2% 0.3% N:P:K 2:1:3的营养液 2次 3次，每 7 d 10 d喷 1次。 6.6.3 驯化苗出苗标准 驯化苗 株高 18.0 cm、 茎粗 0.5 cm时 ， 移 栽入网室。 7 原原种生产 DB42/T 1645 2021 4 整地施肥 整地前 每 667 m2撒施腐熟有机 肥 2500 kg 5000 kg，耕地时翻
12、入土壤。使用机械耕翻土壤，深度 25 cm 以上。按 60 cm 65 cm行距开沟施肥， 每 667 m2施入豆饼（大豆） 75 kg、生物肥 80 kg、硫酸钾 20 kg、尿 素 10 kg 15 kg、硼肥 1 kg、锌肥 2 kg，顺沟撒 施，划锄混匀。 定植 行 距 60 cm，株距 20 cm 23 cm， 每 667 m2植 5000株 。播种后覆土 4 cm 5 cm，浇透水。盖遮 阳网。 田间管理 按照 GB/Z 26584的 有关规定 执行 。 收获与贮存 7.4.1 收获 初霜后植株顶部叶片枯黄时为收获适期。收前 3 d 4 d先浇水使土壤充分湿润，收获时抓住茎叶整 株拔出，轻轻抖掉泥土，保留茎杆基部 2 cm 3 cm，削去其它茎叶。 7.4.2 病毒检测 同 5.2。 7.4.3 贮存 晴天收获，收获后将带少量潮湿泥土的生姜入窖贮藏。
