1、ICS 13.060 C 51 DB37 山东省 地方标准 DB37/T 4159 2020 水质 苦味酸的测定 液相色谱 -串联质谱法 Water quality Determination of trinitrophenol Liquid chromatography-Tandem mass spectrometry 2020 - 09 - 25 发布 2020 - 10 - 25 实施 山东省市场监督管理局 发布 DB37/T 4159 2020 I 目 次 前言 . II 1 范 围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 方法原理 . 1 4 试剂和材料 . 1 5 仪器和设备 .
2、2 6 样品 . 2 7 分析步骤 . 2 8 结果计算与表示 . 3 9 精密度与准确度 . 4 10 质量保证和质量控制 . 4 DB37/T 4159 2020 II 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 2009给出的规则起草。 本标准由山东省住房和城乡建设厅提出并组织实施。 本标准由山东省城镇给水排水标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省城市供排水 水质监测中心、山东珞珈计量检测有限公司、济南市疾病预防 控制中心、国家城市供水水质监测网青岛监测站、山东省分析测试中心、中国兵器工业集团第五三研究 所。 本标准主要起草人：孙韶华、贾瑞宝、王明泉、赵清华、辛晓东、宋艳、刘莉、刘仲、
3、王晓芳、赵 汝松、高岩立、冀克俭、王晓利、梁玉、刘岚铮。 DB37/T 4159 2020 1 水质 苦味酸的测定 液相色谱 -串联质谱法 警告：实验中使用的溶剂和试剂均具有一定的毒性，对健康具有潜在的危害，应尽量避免与这些化 学品的直接接触。样品制备过程应在通风橱中进行，操作时应按规定要求佩戴防护器具 ,避免接触皮肤 和衣物。 1 范围 本标准规定了测定生活饮用水及其水源水中苦味酸的液相色谱 -串联质谱法。 本标准适用于生活饮用水及其水源水中苦味酸的测定。 进样量 10 L时，本标准的方法检出限为 1 g/L，测定下限为 4 g/L。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
4、。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 5750.2 2006 生活饮用水标准检验方法 水样的采集与保存 GB/T 5750.3 2006 生活饮用水标准检验方 法 水质分析质量控制 GB/T 32465 化学分析方法验证确认和内部质量控制要求 GB/T 33087 仪器分析用高纯水规格及试验方法 HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范 HJ/T 164 地下水环境监测技术规范 3 方法原理 样品经 0.22 m针头过滤器过滤后直接进样，经液相色谱仪分离后进入串联质谱仪，采用多反应监 测（ MRM
5、）模式，根据保留时间和特征离子峰进行定性分析，外标法定量分析。 4 试剂 和 材料 4.1 载气：高纯氮，纯度 99.999 %。 4.2 高纯水 ：水质应满足 GB/T 33087的规定。 4.3 甲醇：色谱纯 。 4.4 苦味酸 标准溶液 ： =100 mg/L，溶剂为甲醇， 有证标准物质。 4.5 一次性针头过滤器： 0.22 m，聚四氟乙烯（ PTFE）材 质。 4.6 一次性注射 器： 2.5 mL。 4.7 标准 贮 备液的制备 ： =10.0 mg/L。 取 1.00 mL苦味酸标准溶液（ 4.4），用高纯水（ 4.2）稀释并 定容至 10 mL，配制 10.0 mg/L 苦味酸
6、标准贮备液。于 4 以下冷藏密封避光保存 。 DB37/T 4159 2020 2 4.8 标准使用液的制 备： =1.00 mg/L。 取 1.00 mL苦味酸贮备液（ 4.7），用高纯水（ 4.2）稀释并定 容至 10 mL，配制 1.00 mg/L苦味酸标准使用液。于 4 以下冷藏密封避光保存。 5 仪器和设备 5.1 液相色 谱 -串联质谱仪：配有电喷雾离子源 。 5.2 色谱 柱： C18色谱柱（ 3.5 m， 2.1 mm 100 mm）或其他性 能等效的色谱柱。 5.3 样品瓶： 玻璃瓶， 2 mL。 5.4 容量 瓶： 10 mL。 5.5 采样瓶 ：棕色玻璃瓶，具有玻璃塞 。
7、 5.6 微量注 射器： 100 L和 1 000 L。 6 样品 6.1 样品 的采集和 保存 按照 HJ/T 91和 HJ/T 164的相关规定采集样品。用采 样瓶（ 5.5）采集样品。 按照 GB/T 5750.2 2006的相关规定保存样品。样品采集后在 4 以下冷藏保存， 24 h内完成水样过 滤处理并上机测试。若水样中存在残留氯，加入抗坏血酸去除余氯。 6.2 试样制备 将水样经一次性针头过滤器（ 4.5）过滤后，置于进样瓶中，待测。如水样浓度较高或基体复杂， 可将样品适当稀释后，再经过一次性针头过滤器过滤。 6.3 空白试样制备 用高纯水（ 4.2）代替样品，按照与试样制备（ 6
8、.2）相同的步骤制备空白试样。 7 分析步骤 7.1 色谱 分析条件 7.1.1 流 动相： A相 高纯水（ 4.2）， B相 甲醇（ 4.3）， A:B=10:90（ V:V），等度洗 脱。 7.1.2 流速 ： 0.25 mL/min。 7.1.3 柱温 ： 30 。 7.1.4 进样 体积： 10 L。 7.2 质谱分析条件 7.2.1 离子源：电喷雾离子源，负离子模式。 7.2.2 离子源 温度： 350 。 7.2.3 扫描方式 ： MRM，多反应监测条件见表 1。 DB37/T 4159 2020 3 表 1 苦味 酸的 ESI-MS/MS 质量条件参数 中文名 母离子 m/z 子
9、离子 m/z 碎裂电压 V 碰撞能 V 苦味酸 228 197.9 109 8 181.9 109 12 7.3 校准曲线的绘制 7.3.1 本方法使用外标法定量。 7.3.2 校准系列的配制：取 6个 10 mL容量瓶，用微 量注射器（ 5.6）依次准确加入 40 L、 100 L、 150 L、 200 L、 250 L、 500 L标准使用液（ 4.8），用高纯水（ 4.2）定容至刻度，配制浓度分 别为 4 g/L、 10 g/L、 15 g/L、 20 g/L、 25 g/L、 50 g/L校准系列，现用现配。 7.3.3 按照质量浓度从低到高依次进样，以校准系列溶液中目标组分的质量浓
10、度为横坐标，以峰面积 为纵坐标，绘制校准曲线。 7.4 试样 测定 7.4.1 采用自动进样器，进样量为 10 L。 7.4.2 按照与校准 曲线的 绘制 （ 7.3）相同的步骤进行试样（ 6.2）的测 定。 7.4.3 苦味 酸 MRM色谱图见图 1。 图 1 苦味酸 MRM 色谱图 7.5 空白试验 按照与试 样测定（ 7.4）相同的步骤进行空白试样（ 6.3）的测 定。 8 结果计算与表示 8.1 定性结果 根据苦味酸 MRM色谱图中的保留时间和特征离子对进行定性分析。 8.2 定量结果 DB37/T 4159 2020 4 根据样品中目标物定量离子对的峰面积，外标法定量。苦味酸的定量离
11、子对为 228 181.9。 8.3 结果计算 水样中目标化合物的质量浓度计算见式（ 1）： =Abk . (1) 式中： 水样中目标 化合物的 质量浓度（ g/L）； A 水样中目标化合物对应的峰面积 ； k 校准曲线的斜率 ； b 校准曲线的截距 。 测定结果位数的保留与测定下限一致，最多保留三位有效数字。 9 精密度与准确度 9.1 精密度 4家实验室分别测定浓度为 4 g/L、 30 g/L、 50 g/L的样品 ， 实验室内相对标准偏差为 0.8 % 4.5 %；实验室间相对标准偏差分别为 6.8 %、 7.0 %和 5.5 %；重复性限为 0.35 g/L、 1.3 g/L和 2.
12、1 g/L；再现性限为 0.86 g/L、 7.0 g/L和 8.7 g/L。 9.2 准确度 4家实验室分别测定地表水、地下水、出厂水及管网水加标样品。加标浓度分别为 4 g/L、 30 g/L、 50 g/L时，加标回收率分别为 80.9 % 107 %、 93.0 % 101 %、 88.7 % 97.7 %。 10 质量保证和质量控制 10.1 空白试验 每批次样品 应 做空白 试验 ，测定结果 不能超过 方法 的 检 出 限。 10.2 校准曲线要求 分析样品之前应建立能够覆盖样品浓度范围的至少 6个浓度点的校准曲线，曲线的相关系数 r2应大 于 0.995。 10.3 平行样 平行双样测定结果的相对偏差满足 GB/T 5750.3 2006的要求。 10.4 基体加标 基体加标样品的加标回收率范围满足 GB/T 32465的要求。 _
