1、 ICS 67.120.30 CCS B 51 DB37 山东省 地 方 标 准 DB37/T 4208 2020 地理标志产品 无棣卤虫卵 Product of geographical indication Wudi Artemia eggs 2020 - 11 - 10 发布 2020 - 12 - 10 实施 山东省市场监督管理局 发布 DB37/T 4208 2020 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 2020标准化工作导则 第 1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由山东省农业农村
2、厅提出并组织实施。 本文件由山东省农业标准化技术委员会渔业标准化分技术委员会（ TC 17/SC03）归口。 本文件起草单位：滨州市渔业技术推广 站、山东友发水产有限公司、山东省海洋生物研究院、中国 水产科学研究院黄海水产研究所。 本文件主要起草人：王淑生、刘洪军、王印庚、付壤辉、张令进、徐高峰、曾现英、刘振鲁、高兆 明、崔玮琪、魏延亮、刘春霞、张越、张静。 DB37/T 4208 2020 1 地理标志产品 无棣卤虫卵 1 范围 本文件规定了无棣卤虫卵的保护范围、环境要求、鲜卤虫卵采集与暂存、加工工艺、质量要求、产 品质量测定、出厂检验及标识、包装、运输与储存等。 本文件适用于根据农产品地理
3、标志管理办法、农产品地理标志使用规范批准登记的无棣卤 虫卵。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过 文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中：注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 NY 5362 无公害食品 海水养殖产地环境条件 SN/T 0476 进出口卤虫卵检验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 无棣卤虫卵 Wudi artemia eggs 在地理标志保护区域范围内，产于无棣县沿海陆基盐田池塘的卤虫休眠卵。 3.2 卤虫卵孵化率 hatchability of Artem
4、ia eggs 在盐度 35、温度 28 、 pH值 8 9的自然海水或人工配置海水中，在光照强度 1 000 Lx、连续充气增 氧条件下， 100粒卤虫卵 30 h所孵化出无节幼体的数量，用百分率表示。 4 保护范围 限于中华人民共和国农业部公告第 2834号 2016年第一批农产品地理标志登记产品公告中的 “无棣卤虫卵”地域保护范围。即东经 117 45 35.96 117 58 25.17，北纬 38 08 31.36 38 15 59.74，地域保护范围面积 12 880.93 hm2，应符合附录 A的范围要求。 5 环境要求 5.1 自然环境 DB37/T 4208 2020 2 5
5、.1.1 产地环境 符 合 NY 5362的规定要求。 5.1.2 土壤 区内土壤为泥沙质滨海滩地盐土， pH值 7.6 8.5。 5.1.3 日照 光照充足，年平均日照时数为 2 724.5 h，年均日照百分率为 61 %，最少为 2 432.8 h。 5.1.4 气温 自然环境年平均气温 12.5 。 5.1.5 降水 平均年降水量在 508.7 mm。 5.2 卤虫池条件 5.2.1 池塘条件 泥砂底质，适宜水深 0.5 m 1.5 m。 5.2.2 水质条件 池水适宜盐度 50 120。 6 鲜卤虫卵采集与暂存 6.1 采集期 全年分为夏卵和秋冬卵二个采集期。 5月 6月为夏卵采集期，
6、 9月 11月为秋冬卵采集期。 6.2 采集方法 采用 网口 40目、网袋 120目的手抄网，在池塘下风口处捞取漂浮于水面的卤虫卵。 6.3 暂存 6.3.1 卤虫卵收集后及时放入盐度 200 以上的卤水池中暂存，期间每隔 5 h 6 h 搅拌一次。 6.3.2 暂存池应建在靠近卤虫卵采集区通风、阴凉的室内或棚内。 6.3.3 鲜卤虫卵暂存期 10 d 以内应及时运至加工厂进行加工或冷藏。 7 加工工艺 7.1 重卤提纯 将鲜卤虫卵放入盐度 250的高浓度卤水中浸泡 24 h，待杂质沉淀后将卤虫卵捞出，重新放入盐度 250 的干净高浓度卤水中进行二次浸泡提纯， 24 h后将卤虫卵捞出。浸泡过程
7、每隔 4 h搅拌一次。 DB37/T 4208 2020 3 7.2 低卤饱和 经重卤提纯后的卤 虫卵放入盐度 70卤水池浸泡 3 h 5 h，期间保持池底部持续充气。浸泡过程用放 大镜观察吸水卵的饱和度，在卵饱和度达到 70 %以上时，放入 -15 以下冷库中进行冷冻储存。 7.3 冷冻储存与孵化率检测 饱和卵冷冻储存 15 d后，应每 10 d进行一次孵化率抽样检测。若冰冻期达 60 d，检测“夏卵”孵化 率低于 85 %、“秋冬卵”孵化率低于 90 %时，应再次重复进行低温饱和冷冻储存加工处理，至孵化率达 到标准要求为止。孵化率检测方法应符合附录 B的要求。 7.4 低温解冻 在 0 2
8、 解冻室内对冷冻储存卤虫卵进行缓慢解冻。解冻过 程日温度变化幅度控制在 1 /d 以内。解冻过程应每天对冰冻卤虫卵翻动一次，使其均匀解冻，待卵体的温度开始超出室温时结束解冻。 7.5 中卤培养 解冻后卤虫卵放入水温 15 、盐度 200的中度卤水中进行浸泡培养 24h。浸泡培养过程应再次进行 孵化率取样检测，确认该批次卵的孵化率。 7.6 淡水洗涤与离心脱水 经中卤脱水培养后的卤虫卵放入淡水池进行浸泡洗涤，去除卵壳表面的盐分。淡水浸泡洗涤时间控 制在 1 h以内。经洗涤后的卵捞出放入离心机内进行离心脱水，脱去卵壳表面的水分。 7.7 阴凉风干 在室内将离心脱水后的卵均匀摊放在底部铺有 120目
9、筛绢的透气晾床自然风干至松散状态。卵的摊 放厚度应在 5 mm以下。风干过程应保持室内洁净干燥、空气流通，避免阳光直晒。 7.8 烘干、除壳 晾干后的卤虫卵移至设定温度为 30 35 的烘干器内进行烘干和风选除壳。经检测卤虫卵水分 达到 15 %时停止烘干并取出冷却， 24 h后进行再次烘干、除壳。检测卤虫卵水分达到 8 %时即达到商品卵 要求。 7.9 筛选 将达到商品卵要求的烘干卵用上层 60目、下层 120目的双层振动筛进行筛选，去除细小颗粒杂质和 破碎卵壳。 8 质量要求 8.1 感官要求 无棣卤虫卵感官指标要求符合表 1规定。 DB37/T 4208 2020 4 表 1 感 官指标
10、要求 项目 要求 色泽 浅咖啡色 气味 无霉变腥臭味 手感 干燥、松散、无粘连 干燥卵径， m 190 干燥卵粒规格，粒 /g 30 104 解剖镜（ 20 倍 30 倍）下 形态 粒度均匀，表面洁净光滑，无杂物附着；干燥卵一端凹陷，呈半球状；偶见破 裂卵壳和杂质颗粒。 8.2 质量分级标准 无棣卤虫卵质量分级标准应符合表 2规定。 表 2 质量分级标准 项目 质量指标 一级 二级 三级 孵化率， % 90 80 70 杂质， % 1 3 6 水分， % 2 8 9 产品质量测定 9.1 感官 9.1.1 色泽、气味、 形态 用肉眼进行色泽观察，鼻孔嗅闻气味，解剖镜（ 20倍 30倍）下观察形
11、态。 9.1.2 手感 用手捏取少许样品卤虫卵放入手心捻搓，以判别其干燥、松散和粘连状况。 9.1.3 干燥卵径 用显微镜测微尺分别测量 200粒，然后计算其卵径算术平均值。 9.1.4 干燥卵粒规格 用分析天平秤取 1 g（ 0.01 g）样品卵，用自然海水浸泡 2 h后（防止干燥卵粘壁影响在水中的分 布）放入 1 000 mL烧杯，用移液管取出经搅拌均匀的样品 1 mL，注入培养皿中，在解剖镜（ 20倍 40倍） 下数出卵粒数，重复计数 10次，然后计算平均值，最后折算为每克卵的卵粒数 。 9.2 质量检测 9.2.1 孵化率 DB37/T 4208 2020 5 孵化率的测定应符合附录
12、B的要求。 9.2.2 杂质 按照 SN/T 0476的方法进行。 9.2.3 水分 按照 SN/T 0476的方法进行。 10 出厂检验 10.1 出厂抽样检验 产品出厂交货时，对出库的产品应按照本标准规定的质量指标进行检验。随机在 1 000 g以上检验样 品中取样，以同一生产加工批次、同一级别样品为一个检验批次。时隔一年的出厂产品，再次出厂应重 新按照本标准规定的质量指标进行检验。 10.2 判定规则 按照本文件第 9章和第 10章规定的要求和方法进行检验，以此判定该批次产品的级别等级。 11 标识、包装、运输、储存 11.1 标识 产 品应标注产品名称、执行标准、产地、厂名、商标、净重
13、、质量等级、包装日期及使用说明等。 11.2 包装 产品采用铁罐真空包装、锡箔纸真空包装、塑料桶内衬塑料袋真空包装，净重分别为 425 g/罐、 500 g/袋、 1 000 g/袋、 5 kg/桶、 10 kg/桶等多种规格，也可根据用户要求进行包装。外包装应进行规范标 识，并注明运输及储存注意事项。 11.3 运输 运输过程以保温车或具有空调设备的运输工具为宜，防止运输途中雨淋和阳光暴晒。不得与腐蚀性 和可能造成污染的物品混装运输。 11.4 储存 产品应储存于干燥、避光、 10 以下的环境条件 下。 DB37/T 4208 2020 6 A A 附 录 A （规范性） 无棣卤虫卵地理标志
14、产品保护范围 无棣卤虫卵地理标志产品保护范围，位于大口河至马颊河之间的无棣县所辖区域陆基盐田。见图 A.1。 (A： 117 51 39.08” E， 38 15 59.74” N； B： 117 45 35.96” E， 38 09 23.43N； C： 117 51 30.04” E， 38 08 31.36” N； D： 117 58 25.17” E， 38 12 08.08” N） 图 A.1 无棣卤虫卵地理标志产品保护范围 DB37/T 4208 2020 7 B B 附 录 B （规范性） 卤虫卵孵化率测定与计算方法 B.1 原理 测定 100粒卤虫卵样品中所孵化出无节幼体的数量
15、。 B.2 方法与计算 B.2.1 数粒法 取一干净载玻片，在其上用胶头滴管滴入一滴海水，然后将解剖针针尖浸湿，由待测样品中随机粘 取少量（ 200粒左右）卤虫卵移入载玻片水滴中。在解剖镜（ 20倍 40倍）下数出 100粒卵（确认为非卵 壳）后，用解剖针将数出的 100粒卵移到载玻片的一端，将剩余的卵和水用吸水纸擦干净。取出载玻片， 将有卤虫卵的一端靠近烧杯内壁，用胶头滴管吸入海水，从载玻片上将卵全部移进烧 杯内。向烧杯内加 入 100 mL海水（盐度 35， pH8 9），然后将烧杯移入光照恒温培养箱内，在温度 28 、光照强度在 1 000 Lx条件下，连续孵化 30 h。取出烧杯，滴入
16、鲁哥氏碘液将无节幼体杀死，统计孵化出的无节幼体数量。 孵化率按式（ B.1）计算： (% ) A / B 100%H . (B.1) 式中： H 孵化率， %； A 孵化出卤虫无节幼体的数量，单 位：个； B 卤虫卵的数量，单位：粒。 所测样品 4个平行样的算术平均值即为该样品的孵化率结果，允许相对偏差 5 %。 B.2.2 密度法 用分析天平秤取 1 g0.01 g卤虫卵样品，置于盛有 1 000 mL（盐度 35， pH8 9）海水的锥形瓶中搅 拌均匀后浸泡 2 h，用移液管取出经搅拌均匀的样品 1 mL，注入培养皿中，在解剖镜（ 20 40倍）下数出 卵粒数（空壳、破碎卵不计），重复计数
17、 4次并取平均值 (A )。然后将锥形瓶移入光照恒温培养箱，在 温度 28 、光照强度 1 000 Lx条件下连续充气孵化 30 h。取出锥形瓶，震荡均匀后用移液管取 1 mL海水 注入培养皿中，滴入鲁哥氏碘液将无节幼体杀死，计数无节幼体。 4次重复取平均值（ B ）。孵化率按 式（ B.2）计算： (% ) / 1 0 0 %H B A . (B.2) 式中： H 孵化率， %； A 卤虫卵数量平均值，单位：粒； B 孵化出卤虫无节幼体的数量平均值，单位：个。 所测样品 4个平行样的算术平均值即为该样品的孵化率结果，允许相对偏差 5 %。 DB37/T 4208 2020 8 B.2.2.1
18、 溶壳法 本方法主要用于一级卤虫卵。 用分析天平秤取 250 mg卤虫卵样品，放入盛有 100 mL（盐度 35， pH为 8 9）海水的倒锥形瓶中，光 照强度 1 000 Lx，水温控制在 28 ，从底部微量充气，使卤虫卵均匀悬浮于水中。孵化 48 h后，用移液 管取 0.5 mL海水（其中约含 100个孵出的卤虫无节幼 体及未孵化的卵）作为 1个样品，共取 10次得到 10个 样品（ i=10）。将样品分别注入到培养皿中，并加入几滴鲁哥氏碘液，计数每个样品的卤虫无节幼体 Ni， 求算数平均值（ N ）。用胶头滴管吸入预先配好 NaOH溶液（ 100 mL蒸馏水中加入 40 g NaOH，溶解）， 向每个样品中加入 1滴 NaOH溶液，再加入 5滴含有效氯 5.25 %的次氯酸钠溶液。数分钟后，空壳被溶解， 而没有孵化的卤虫卵变为去壳卵。用筛绢将去壳卵在自来水中冲洗干净后，分别计数每个样品中去壳卵 的数量（ Ci），求算出 10个样品去壳卵的算数平均值（ C ）。孵化率按式（ B.3）计算： ( % ) / 1 0 0 %H N N C . (B.3) 式中： H 孵化率， %； N 样品的卤虫 无节幼体的平均值， 单位： 个； C 10 个样品去 壳卵的算数平均值， 单位： 个。 _
