1、ICS 65.020.20B 05 DB2 3黑 龙 江 省 地 方 标 准DB23/T 27132020大 豆 胞 囊 线 虫 种 群 动 态 监 测 技 术 规 程 2 0 2 0 -11- 2 6 发 布 2020-12- 2 5 实 施黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB23/T 27132020 I 前 言本 标 准 依 据 GB/T 1.1-2009的 编 写 规 则 起 草 。本 标 准 由 黑 龙 江 省 农 业 农 村 厅 提 出 。本 标 准 起 草 单 位 ： 黑 龙 江 省 农 业 科 学 院 大 豆 研 究 所 、 黑 龙 江 省 乡 村 产 业
2、发 展 中 心 、 黑 龙 江 省 植 检 植保 站 、 黑 河 市 爱 辉 区 农 业 农 村 局 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 王 家 军 、 于 佰 双 、 刘 鑫 磊 、 张 瑞 萍 、 马 云 凤 、 王 广 金 、 高 明 杰 、 张 必 弦 、 李 进荣 、 刘 秀 林 、 栾 晓 燕 、 王 雪 扬 、 李 鹏 、 韩 新 春 、 代 丽 婷 、 崔 丽 伟 、 季 妮 娜 。 DB23/T 27132020 1 大 豆 胞 囊 线 虫 种 群 动 态 监 测 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 大 豆 胞 囊 线 虫 （ Heterodera glycin
3、es Ichinohe） 种 群 动 态 监 测 技 术 的 术 语 和 定 义 、仪 器 设 备 、 田 间 取 样 、 病 土 生 理 小 种 鉴 定 、 种 群 动 态 监 测 和 档 案 管 理 。本 标 准 适 用 于 大 豆 胞 囊 线 虫 生 理 小 种 鉴 定 和 种 群 动 态 监 测 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有
4、 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。NT/T 3114.1 大 豆 抗 虫 性 鉴 定 技 术 规 范 第 1 部 分NY/T 3059-2016 大 豆 抗 胞 囊 线 虫 鉴 定 技 术 规 程3 术 语 和 定 义NY/T 3059-2016 界 定 的 以 及 下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件 。3.1 雌 虫 指 数 （ Female Index， FI）FI=各 鉴 别 寄 主 根 上 雌 虫 数 除 以 对 照 品 种 Lee根 上 雌 虫 数 的 百 分 数 。 3.2 出 现 频 率 （ Occurrence Frequency）大 豆 胞 囊
5、线 虫 种 群 内 各 生 理 小 种 出 现 的 频 率 。生 理 小 种 的 出 现 频 率 =该 生 理 小 种 出 现 的 样 本 数 除 以 调 查 总 样 本 数 的 百 分 数 。3.3 优 势 小 种 （ Dominant Race）大 豆 胞 囊 线 虫 种 群 内 出 现 频 率 最 高 的 生 理 小 种 。3.4 种 群 动 态 （ Population Dynamics） 大 豆 胞 囊 线 虫 种 群 内 生 理 小 种 组 成 及 各 小 种 出 现 频 率 的 变 化 、 优 势 小 种 的 更 迭 。3.5 种 群 监 测 （ Population Monit
6、oring） DB23/T 27132020 2 以 春 播 作 物 生 产 年 为 单 位 ， 逐 年 统 计 地 域 性 生 产 区 内 每 年 大 豆 胞 囊 线 虫 各 生 理 小 种 出 现 的 类 别 和 频率 。4 仪 器 设 备4.1 体 式 显 微 镜用 于 观 察 病 土 样 本 中 分 离 出 的 胞 囊 。4.2 高 压 灭 菌 锅用 于 基 质 的 消 毒 处 理 。4.3 标 准 网 筛 标 准 筛 一 套 （ 20目 、 80目 ） ， 用 于 线 虫 胞 囊 的 分 离 。5 田 间 取 样5.1 田 间 取 样 点 选 择田 间 发 生 过 大 豆 胞 囊 线
7、 虫 病 的 地 块 或 重 茬 种 植 大 豆 3年 以 上 的 地 块 都 可 以 作 为 取 样 点 。5.2 田 间 取 样 时 期病 土 最 佳 取 样 时 期 为 当 季 大 豆 田 秋 收 后 至 封 冻 前 ， 如 错 过 这 个 时 期 ， 第 二 年 的 解 冻 后 至 播 种 前 也 可以 。5.3 田 间 取 样 方 法 田 间 取 样 采 用 “ Z” 字 形 取 样 法 ， 每 地 块 选 取 10点 -20点 ， 先 剥 离 垄 上 5cm地 表 层 土 壤 ， 在 大 豆 根 围向 下 层 取 土 15cm深 ， 每 点 取 土 量 为 1000g， 所 有 点
8、 取 土 样 后 混 合 均 匀 ， 记 作 1份 土 样 ， 总 样 本 重 量 要 10kg，并 标 记 好 采 集 样 本 相 关 信 息 ， 记 录 表 应 按 照 附 录 A的 规 定 。5.4 检 验 取 样 土 的 有 效 性土 样 取 回 后 ， 每 个 样 品 称 取 100g风 干 土 ， 在 室 内 分 离 土 壤 中 的 胞 囊 ， 百 克 风 干 土 中 胞 囊 量 35个 的土 样 为 有 效 土 样 。 胞 囊 量 不 达 标 的 土 样 ， 可 以 采 取 人 工 淘 取 该 土 样 的 胞 囊 并 回 接 至 该 土 样 ， 或 在 温 室 里向 其 内 播
9、种 感 病 大 豆 ， 促 进 大 豆 胞 囊 线 虫 的 繁 殖 世 代 ， 增 加 取 样 土 的 胞 囊 存 有 量 以 达 到 有 效 土 样 的 标 准 。5.5 取 样 土 保 存秋 收 后 取 回 的 土 样 应 放 在 室 外 常 温 保 存 ， 春 季 取 回 的 土 样 可 直 接 进 行 鉴 定 。6 病 土 生 理 小 种 鉴 定 6.1 病 土 鉴 定 基 质 配 置病 土 按 照 土 ： 沙 =4:1的 比 例 混 合 均 匀 。 细 沙 过 20目 筛 子 ， 在 使 用 之 前 进 行 消 毒 处 理 。6.2 病 土 鉴 定 圃 设 置 DB23/T 2713
10、2020 3 将 混 合 好 的 病 土 平 均 分 装 到 15个 接 种 盆 内 （ 直 径 12 cm， 高 15 cm） ， 病 土 填 装 深 度 为 12 cm， 3次 重复 按 照 如 下 图 所 示 进 行 摆 放 。 说 明 ：1.矩 形 框 表 示 每 份 土 样 试 验 区 ；2.实 线 表 示 同 一 份 土 样 中 同 一 个 鉴 别 寄 主 的 3次 重 复 ；3.圆 圈 图 形 表 示 每 个 盆 栽 处 理 。 图 1 病 土 盆 栽 鉴 定 配 置 示 意 图6.3 播 种 及 管 理每 份 土 样 中 每 个 鉴 别 寄 主 播 种 3 盆 ， 每 盆 播
11、种 5 粒 种 子 ， 覆 土 2 cm， 正 常 盆 栽 管 理 ， 出 苗 后 ， 选取 长 势 一 致 的 大 豆 苗 ， 每 盆 留 苗 3 株 。 三 出 复 叶 长 出 后 ， 适 当 控 水 。6.4 调 查 调 查 方 法 和 生 理 小 种 划 分 应 按 照 NY/T 3059-2016中 的 附 录 A执 行 。7 种 群 动 态 监 测比 较 各 年 度 大 豆 胞 囊 线 虫 生 理 小 种 鉴 定 结 果 ， 明 确 取 样 点 大 豆 胞 囊 线 虫 各 优 势 种 群 出 现 频 率 ， 监 测大 豆 胞 囊 线 虫 种 群 变 化 和 优 势 小 种 的 更 迭 。8 档 案 管 理大 豆 胞 囊 线 虫 病 土 样 本 采 集 原 始 记 录 及 种 群 鉴 定 结 果 等 记 载 表 格 应 按 照 NY/T 3059-2016和 附 录 A执行 。 DB23/T 27132020 4 附 录 A(规 范 性 附 录 )样 本 采 集 记 录 表A.1样 本 采 集 记 录 表 表 A.1 样 本 采 集 记 录 表样 本 编 号 采 集 时 间 采 集 地 点 地 理 位 置(经 纬 度 ) 土 壤 类 型 当 季 种 植 的 大豆 品 种 地 块 发 病 情 况 采 集 人
