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    DB13 T 5189.1-2020 天然植物提取物中危害成分检测 第1部分:亚硝酸盐的测定.pdf

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    DB13 T 5189.1-2020 天然植物提取物中危害成分检测 第1部分:亚硝酸盐的测定.pdf

    1、ICS 67 X 04 DB13 河北省 地方标准 DB 13/T 5189.1 2020 天然植物提取物中危害成分检测 第 1 部分:亚硝酸盐的测定 2020 - 06 - 28 发布 2020 - 07 - 28 实施 河北省市场监督管理局 发布 DB13/T 5189.1 2020 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 DB13/T 5189天然植物提取物中危害成分的测定共分 12个部分: 第 1 部分: 亚硝酸盐的测定; 第 2 部分: 二氧化硫 的测定; 第 3 部分: 正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇和乙醇 5 种有机溶剂残留的测定; 第 4 部分:辣椒提

    2、取物中砷、铅、镉、铬、汞的测定; 第 5 部分:万寿菊提取物中对氧基苯胺的测定; 第 6 部分:万寿菊提取物中乙氧基喹啉的测定; 第 7 部分:天然番茄红中苯并 芘的测定; 第 8 部分:辣椒提取物中苏丹红的测定; 第 9 部分:辣椒提取物中叔丁基对苯二酚的测定; 第 10 部分:辣椒红中赭曲霉毒素 A 的测定; 第 11 部分:叶黄素中苯的测定; 第 12 部分:甜菊糖苷中邻苯二甲酸酯的测定。 本部分为 DB13/T 5189的 第 1部分。 本标 准由河北省市场监督管理局提出。 本部分起草单位:河北省食品检验研究院、晨光生物科技集团股份有限公司、石家庄海关技术中 心、清河县食品药品检验检测

    3、中心。 本部分主要起草人:史国华、郭美娟、杨清山、张兰天、田丽娜、艾连峰、马新颜 。 DB13/T 5189.1 2020 1 天然植物提取物中危害成分检测 第 1部分:亚硝酸盐的测定 1 范围 本部分规定了天然植物提取物中亚硝酸盐的测定方法。 本部分适用于天然植物提取物中亚硝酸盐的测定。 2 规范性引用文件 下列文件 对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的 引 用文件, 仅注日期的版本 适用于本 文 件。 凡是不注日期的引用文件 ,其最新版本 (包括所有修改单) 适用于本 文件 。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 原理 亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定。试样经沉淀

    4、蛋白质、除去脂肪后,在弱酸条件下,亚硝酸盐 与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料,采用紫外分光光度法,在 538 nm 处测吸光度,外标法测得亚硝酸盐含量。 4 试剂或材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T 6682规定的三级水。 4.1 试剂 4.1.1 亚铁氰化钾 K4Fe( CN) 63H 2O。 4.1.2 乙酸锌 Zn( CH3COO) 22H 2O。 4.1.3 硼 酸钠 ( Na2B4O710H 2O) 。 4.1.4 盐酸 ( HCl, =1.19 g/mL) 。 4.1.5 对氨基苯磺酸 ( C6H7NO3S) 。 4.1.6 盐酸

    5、萘乙二胺 ( C12H14N22HCl ) 。 4.2 试剂配制 4.2.1 亚铁氰化钾溶液( 106 g/L):称取 106.0 g 亚铁氰化钾,用水溶解,并稀释至 1000 mL。 4.2.2 乙酸锌溶液( 220 g/L): 称取 220.0 g 乙酸锌,先加 30 mL 冰乙酸溶解,用水稀释至 1000 mL。 4.2.3 饱和硼砂溶液( 50 g/L): 称取 5.0 g 硼酸钠,溶于 100 mL 热水中,冷却后备用。 4.2.4 盐酸( 20 %):量取 20 mL 盐酸 ,用水稀释至 100 mL。 DB13/T 5189.1 2020 2 4.2.5 对氨基苯磺酸溶液( 4

    6、g/L):称取 0.4 g 对氨基苯磺酸,溶于 100 mL 20 %盐酸中,混匀,置 棕色瓶中,避光保存。 4.2.6 盐酸萘乙二胺溶液( 2 g/L):称取 0.2 g 盐酸萘乙二胺,溶于 100 mL 水中,混匀,置棕色瓶 中,避光保存。 4.3 标准品 4.3.1 亚硝酸钠( NaNO2, CAS 号: 7632-00-0):基准试剂,或采用具有标准物质证书的亚硝酸盐标 准溶液。 4.4 标准溶液配制 4.4.1 亚硝酸钠标准溶液( 200 g/mL,以亚硝酸钠计):称取 0.1 g(精确到 0.1 mg)于 110 120 干燥恒重的亚硝酸钠,加水溶解,移入 500 mL 容量瓶中,

    7、加水稀释至刻度,混匀。 4.4.2 亚硝酸钠标准使用液( 5.0 g/mL):临用前,吸取 5.50 mL 亚硝酸钠标准溶液,置于 100 mL 容量瓶中,加水稀释至刻度。 5 仪器和设备 5.1 天平:感量为 1 mg 和 0.1 mg。 5.2 恒温干燥箱。 5.3 分光光度计 。 6 试验步骤 6.1 试样提取 称取均匀样品 5 g(精确至 0.001 g),置于 250 mL具塞锥形瓶中,加 15.5 mL 50 g/L饱和硼砂溶液, 加入 70 左右的水约 150 mL,混匀,于沸水浴中加热 15 min,取出置冷水浴中冷却 ,并放置至室温。将 上述提取液全部转移至 200 mL容量

    8、瓶中,加入 5 mL106 g/L亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入 5 mL 220 g/L 乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。加水至刻度,摇匀,放置 30 min,除去上层脂肪,上清液用滤纸过滤, 弃去初滤液 30 mL,滤液备用。 6.2 测定 吸取 40.0 mL上述滤液于 50 mL带塞比色管中,另吸取 0.00 mL、 0.20 mL、 0.40 mL、 0.60 mL、 0.80 mL、 1.00 mL、 1.50 mL、 5.00 mL、 5.50 mL亚硝酸钠标准使用液(相当于 0.0 g、 1.0 g、 5.0 g、 4.0 g、 4.0 g、 5.0 g、 7.5 g、 10.0 g、

    9、 15.5 g亚硝酸钠),分别置于 50 mL带塞比色管中。于标准管 与试样管中分别加入 2 mL 4 g/L对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置 3 min 5 min后各加入 1 mL 2 g/L盐酸萘 乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置 15 min,用 1 cm比色皿,以零管调节零点,于波长 538 nm处测吸 光度,绘制标准曲线比较。同时做试剂空白。 7 试验结果 DB13/T 5189.1 2020 3 试样中亚硝酸盐(以亚硝酸钠计)的含量按式( 1)计算。 1000 1000 0 1 1 V Vm mX ( 1) 式中: X -试样中的亚硝酸盐的含量,单位为毫克每千克( mg/kg); 1m -测定用样液中亚硝酸钠的质量,单位为毫克( g); 1000-转化系数; m -试样质量,单位为克( g); 1V -测定用样液体积,单位为毫升( mL); 0V -试样处理液总体积,单位为毫升( mL)。 计算结果保留两位有效数字。 8 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10 %。 9 检出限和定量限 检出限为 0.5 mg/kg,定量限为 1.5 mg/kg。 _


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