1、Ics 11 .020 20492-2007 中华人民共和国卫生行业标准 WS 274-2007 百日咳诊断标准 Diagnostic criteria for pertussis 2007一0417发布 2007一10一15实施 中华人民共和国卫生部 发布 WS 274-2007 前 .毛 曰 根据中华人民共和国传染病防治法制定本标准。 按照国家质量监督检验检疫总局国家标准化管理委员会公告（2005年第 百日咳诊断标准及处理原则自本标准实施之日起废止。 本标准的附录A是资料性附录，附录B是规范性附录。 本标准由卫生部传染病标准专业委员会提出。 本标准由中华人民共和国卫生部批准。 本标准起草负
2、责单位：中国疾病预防控制中心免疫规划中心。 本标准主要起草人：梁晓峰、张荣珍、刘保奎、侯启明、沈叙庄、郭腿。 146号）GB 15998-1995 polymer 延伸三个部分。 酶促扩增 实验室检查 、卜 外周血白细胞计数及淋巴细 从痰、鼻咽部分泌物分离到百日咳鲍特菌，检验方法见附录B. 恢复期血清特异性抗体比急性期呈）4倍增长，检验方法见附录B. 3. 3 3.3. 1 3.3.2 3.3. 3 本标准适用于全国各级各类医疗卫 2 术语和定义 下列术语和定义适用尹体断准 双份血清 ”ai借 患者急性期和但 2. 2 痉咳 spas 连续不断妞 2. 3 对百日咳的诊断和报告。 百日咳I丰
3、百日咳鲍绪 Bordetell 滑型(I相） 包括变性口退 3诊断依“%CI) 3. 流行病学月津 四季肺发叩 3.2 JJ床表现（参禺 3.2. 1 典型病例 卜 3.2.2 不典型病例 嗽，青少年和成人具有不钾 只表现持续两周以上的长期 发作的呼吸暂停、窒息、青紫和，勺幼过 状，卡他期、痉咳期、恢复类 症状，或有间歇的阵发性咳 缩短或无明显的阶段性，而 先者的密切接葫虫史，无预防接种史。 碟 压ugh 咳嗽。 2. 4 聚合酶链 一种用于 持续咳嗽）2周者。 叭S 274-2007 百日咳诊断标准 范围 本标准规定了百日咳的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。 4 诊断原则 根据流行病学史
4、、临床表现及实验室检查结果可做出百日咳病例诊断。 5 诊断标准 5.1 疑似病例 符合3.2. 1、3. 2.2任何一项的规定，或伴有3. 1的规定。 WS 274-2007 5. 2 多断病例 例同时符合3. 3. 1的规定。 5. 3 确诊病例 临床诊断病例同时符合实验室检查中3. 3. 2、3. 3. 3中的任何一项的规定。 6 鉴别诊断 6. 1 支气管炎、肺炎 副百日咳鲍特菌、腺病毒、呼吸道合胞病毒及副流感病毒、肺炎支原体、肺炎衣原体等引起的支气管 炎或肺炎，或气管异物，可发生类似百日咳的痉咳，临床不易区分，需进行病原学、血清学及支气管镜检 查以鉴别。 6. 2 月市门淋巴结结核 肿
5、大的肺门淋巴结压迫气管、支气管可引起痉咳，但无日轻夜重现象。有结核接触史、结核中毒症 状、结核菌素试验阳性、肺部x线检查可见结核病灶。 WS 274-2007 附 录 A （资料性附录） 病原学、流行病学、临床表现 A.1 病原学 百日咳是由鲍特菌属（Bordetella)百日咳鲍特菌引起的急性呼吸道传染病。百日咳鲍特菌为革兰 氏阴性短小球杆菌，约（0. 5l. 5)imX (0. 2-0. 5)gm大小。该菌为需氧菌，最适宜生长的温度为 35一37 C,pH为6. 8一7.2, 百日咳鲍特菌对一般理化因素的抵抗力较弱；56 C 30 mm、日光照射lh即可杀灭，一般消毒剂、 紫外线照射也均可
6、将其杀灭。在干燥尘埃中可存活3d。对大环内醋类药物、多粘菌素、氨节西林敏感。 百日咳鲍特菌有多种抗原成分，其中包括百日咳毒素（Pertussis Toxin,PT)、丝状血凝素（Filamen- tous Hemagglutinin,FHA)、凝集原（Agglutinogens , AGG）等。 AGG是百日咳鲍特菌的表面抗原，采用血清凝集交叉吸收试验确定百日咳鲍特菌有7种AGGO AGG1.。是百日咳鲍特菌特异性抗原，AGG7是鲍特菌属的共同抗原，在不同的百日咳鲍特菌菌株中其 凝集原血清型组合不同，常见的血清型为1.2.3型,1.2型，1.3型，其他4.5.6型则不多见。 A. 2 流行病学
7、 A. 2.1 传染源 人是百日咳鲍特菌的唯一感染宿主，任何年龄的人都可以感染百日咳。家庭接触者和成人百日咳 患者是百日咳的主要传染源。 A.2.2 传播途径 百日咳通过飞沫传播，传染性极强。二代催病率在易感儿童中很高，在学校为20%50%，在敏感 的家庭接触者中为i00%. A. 2.3 易感人群 人群普遍易感，在未实施疫苗接种前百日咳主要发生在5岁以下儿童，尤其是1岁以下的婴儿。我 国的百日咳病例主要发生在15岁以下儿童，其中7岁以下儿童的病例占80左右，5岁以下的儿童占 60%，死亡病例也主要发生在5岁以下儿童。近年来百日咳发病年龄有上升趋势。 A. 2.4 流行特征 据世界卫生组织估计
8、，全球每年发生6 000万百日咳病例，其中50万一100万死亡。百日咳是疫苗 可预防传染病，接种百白破联合疫苗（DTP)已预防了85. 6万百日咳病例和7. 26万死亡病例。我国在 20世纪60年代开始百日咳疫苗的接种，自1978年实施计划免疫后，DTP疫苗的接种有效地控制了百 日咳的流行，百日咳的发病率和死亡率大幅度下降。百日咳报告病例数从1978年的1 202 922例减少 到2004年的4 705例。2003、 2004年的百日咳报告病例数在5 000例左右，发病率维持在0. 5/10万 左右，报告死亡病例数为3,9例，死亡率在。000 2-O. 000 7/10万，病死率在0.054
9、5%一o. 191 3%, 我国的百日咳发病率和死亡率近年维持在低水平。 百日咳是传染性很强的传染病，遍布世界各地，在寒冷地区或寒冷季节发病较多。我国百日咳病例 一般出现在春夏季，3月发病开始升高，5,7月达到高峰，8-9月开始下降，12月最低。但我国幅员辽 阔，各地气候不同，故一年四季均有百日咳病例。根据传染病监测资料，目前我国农村百日咳的发病率 高于城市。我国每25年发生一次流行，每次流行持续2-3年。 A. 3 临床表现 典型百日咳的潜伏期2 d-21 d,一般为7 dlO d。百日咳的病程较长，临床上可分为三期：前驱 WS 274-2007 期、痉咳期、恢复期。 A. 3.1 前驱期
10、约持续1周一2周，为上呼吸道感染征象，如：低热、流涕、结膜充血、流泪及轻咳，上述症状渐轻，而 咳嗽日渐加重，进人痉咳期。 A. 3.2 痉咳期 约持续2周一6周或更长，突出表现为阵发性、痉挛性咳嗽，典型病人咳嗽成串出现，每次咳嗽连续 十至数十声，直至咳出粘稠痰或将胃内容物吐出为止，紧接着急骤深长吸气，发出鸡啼样的吸气性吼声 为本病的特征。阵咳昼轻夜重，由于剧咳，可致面部、眼睑浮肿，眼结膜充血、鼻通，舌系带溃疡。婴儿常 无典型痉咳，发作时可能只有咳嗽、呼吸暂停、发组，以致窒息、惊厥，或间歇的阵发性咳嗽。 A. 3.3 恢复期 约持续2周一3周，痉咳发作次数减少，病情减轻，最终消失。典型百日咳病人
11、无发热及全身性症 状和体征。非典型百日咳发生于已免疫的儿童和曾经感染的成人，儿童的主要表现为三期症状都缩短， 成人则症状无明显的阶段性。常见并发症有肺炎、肺气肿等肺部疾病，百日咳脑病，肺结核恶化。 鼻咽 10 cm处 皿送检。 病程早期 B. 1 .1 .2 于菌生长，应及时划培 进行增菌培养。在活 拿基上观察应不生长， 旧有： G) 脂培 B. 1 .1 B. 1 .1 子自前鼻孔 待棉拭子顶 拭子。采集 将拭子放人 2 d-3 d. B. 1 .2 分亲 使用上 养平皿进行 性炭血培养 作为百日咳 B门3 鉴策比 B. 1 .3. 1 百1 B. 1 .3. 2 菌孚 不透明菌落。 ；样时
12、 的JrA 严腔后 ！分泌物 左右、p 方法采集白 离。可将国 可生长，但 的初步判A 特菌革兰 恕 标本的采集与处理 洲尸产一 一 咳碟法 将装有B分婚养基（含有青霉素 省扣 电， 口 特 月U 硬驹沈 进端鼻 霖I - 面咳嗽 户虱将载有患者飞沫的斗 令较小的婴儿不易获得成功。 G）的培箫喊 椒过咳出的 于35 皿置于潜伏期或卡他期的患者口前约 巍直接喷射于培养基上，然后盖好平 37培养3 d-7 d。此方法在 的蛋白 手执棉 碳 胜咳嗽只 G培养二 溶液试 头友部，使顶端稍向下弯的棉拭 用丈 沐后 器，Lll 卜，2 讲猛，以免发生外伤出血。 奎轻旋转1周，缓缓取出棉 。如不能及时接种，
13、可 内接种，于37培养 扭菌生长。 含有青霉 种于普通 生化 盐，不利用构椽酸拥 B. 1.3.4 凝集试验 B. 2 百日咳凝集抗体测 B. 2. 1 原理 料外丁碳水化合 阳性。 液化明胶下明产生琉化氢，不形成nI噪，不还原硝酸 滩佗阿菌的相标准血清凝集。 整齐，冥有功酥般的光泽，有粘稠感的 叭侣274-2007 附 录 B （规范性附录） 病原体分离鉴定、百日咳凝集抗体测定 B. 1 病原体分离鉴定 将适宜浓度的百日咳鲍特菌菌体悬丽茄叉譬着特异性抗体的血清，在有适当的电解质存在时，经一 定时间作用后，可出现肉眼可见的凝集，以此进行相应抗体的检测。 B. 2.2 材料 B. 2.2. 1
14、百日咳I相标准血清。 B. 2.2.2 灭活百日咳I相菌悬液。 B. 2.2.3 待检血清。 B. 2.2.4 稀释液（生理氯化钠溶液）。 B. 2.2.5 血凝板（U型）8X12（排x孔）。 B. 2.2.6 定量移液器（可定量量取25 11L)0 B.2.2.7 35一37恒温箱。 WS 274-2007 B. 2.3 稀释方法 B.2.3.1 I相标准血清稀释 将标准血清按试验要求稀释至一定倍数，作阳性对照待用。 B. 2.3.2 百日咳菌体抗原稀释 将百日咳菌体抗原稀释至30亿mL一4O亿mL，待用。 B. 2.3.3 待检血清稀释 将待检血清倍比稀释。 B. 2.4 试验步骤 B.
15、2.4. 1 除每排第1孔外，其余每孔分别加生理氯化钠溶液25 1LL. B. 2.4.2 每排第1孔加50 1L待检血清。 B. 2.4.3 用25 11L。移液器从第1孔取出25拌 L待检血清至第2孔，混合，然后取第2孔25 2L至第3 孔混合，以此类推，稀释至第11孔，然后丢弃25拜 L，最后1孔为阴性对照，只加抗原和生理氯化钠溶 液，每排操作相同。阳性对照为第1孔加人已稀释好的标准血清，再倍比系列稀释至第11孔。 B. 2.4. 4 每孔各加抗原25 o L0 B. 2.4.5 振荡混合2 min-3 mmn. B. 2.4. 6 盖严以防蒸发。 B. 2. 4. 7 置35 C-37 C孵育16 h-24 h，取出放室温1h观察结果。 B. 2.5 结果判断 根据孔底凝集程度判定待检血清的抗体效价，以出现“+”的血清最高稀释度为血清抗体效价，判定 标准如下： 孔底呈圆点状，菌体沉淀物同阴性对照孔为（一）。 孔底无圆点状，菌体沉淀物呈微细凝集散在状（+）。 凝集明显，上清液微浑浊（+）。 凝集明显，上清液清晰（+）。 凝集呈块状，上清液清晰（+）。 如果上述结果不易观察，可将百日咳菌体稀释至30亿mL-40亿/rrxL悬液，用结晶紫配成0. 05% 的染液（或用复红配成0. 1的染液），使用时按5的比例加人抗原悬液中，然后再按上述方法试验。
