1、ICS 65.020B 30 DB5206铜 仁 市 地 方 标 准DB 5206/T 85 2018代 替 DB 522200/T 57-2009红 薯 脱 毒 种 薯 繁 育 技 术 规 程 2018-12-06 发 布 2018-12-06 实 施铜 仁 市 质 量 技 术 监 督 局 发 布 DB 5206/T 85-2018 I 目 次前 言 .1 范 围 .12 规 范 性 引 用 文 件 .13 术 语 和 定 义 .14 总 则 .25 脱 毒 种 薯 的 质 量 .2 6 脱 毒 红 薯 试 管 苗 繁 育 技 术 .37 高 级 脱 毒 试 管 苗 速 繁 .38 脱 毒
2、红 薯 原 原 种 繁 育 技 术 标 准 .49 脱 毒 红 薯 原 种 繁 育 技 术 标 准 .510 脱 毒 红 薯 生 产 种 繁 育 技 术 标 准 .611 脱 毒 红 薯 不 同 级 别 脱 毒 苗 的 病 毒 检 测 方 法 .612 脱 毒 红 薯 不 同 级 别 脱 毒 苗 的 质 量 标 准 .8 DB 5206/T 85-2018 II 前 言本 标 准 按 照 GB/T 1.1-2009 标 准 化 工 作 导 则 第 1部 分 ： 标 准 的 结 构 和 编 写 给 出 的 规则 起 草 。请 注 意 ： 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利 ，
3、 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 这 些 专 利 的 责任 。 本 标 准 代 替 DB 522200/T 57-2009 红 薯 脱 毒 红 薯 繁 育 技 术 规 程 。 本 标 准 与 DB522200/T57-2009相 比 ， 除 编 辑 性 修 改 外 主 要 差 异 如 下 ： 该 标 准 中 引 用 的 相 关 国 家 标 准 、 行 业 标 准 和 地 方 标 准 ， 已 更 新 为 现 行 有 效 标 准 ；本 标 准 由 铜 仁 市 农 业 委 员 会 提 出 并 归 口 。本 标 准 负 责 制 定 单 位 :铜 仁 市 种 子 管 理 站 、 铜
4、仁 市 植 保 站 。 本 标 准 参 加 单 位 ： 思 南 县 农 牧 科 技 局 、 沿 河 县 种 子 管 理 站 、 印 江 县 种 子 管 理 站 、 德 江 县种 子 管 理 站 、 松 桃 种 子 管 理 站 。本 标 准 主 要 制 定 人 : 李 朝 霞 、 李 永 凤 、 甘 坤 俊 、 徐 文 霞 、 罗 会 群 、 陈 正 福 、 涂 刚 、 王 安华 、 廖 雪 红 、 陈 忠 、 张 玉 清本 标 准 的 历 次 版 本 发 布 情 况 为 ： DB 522200/T 57-2009。 DB 5206/T 85-2018 1 红 薯 脱 毒 种 薯 繁 育 技 术
5、 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 红 薯 脱 毒 种 薯 及 种 苗 的 繁 育 技 术 规 程 ， 适 用 于 铜 仁 市 各 红 薯 种 薯 （ 苗 ） 繁育 基 地 、 产 地 及 栽 培 区 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 所 注 日 期 的 版 本适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。 GB 4406 种 薯GB 7413 红 薯
6、种 苗 产 地 检 疫 规 范NY/T 402 脱 毒 甘 薯 种 薯 (苗 )病 毒 检 测 技 术 规 程NY/T 1200 甘 薯 脱 毒 种 薯3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 标 准3.1 脱 毒 试 管 苗 virus-free tube seedIing应 用 茎 尖 分 生 组 织 培 养 技 术 获 得 ,经 检 测 确 认 不 带 红 薯 羽 状 斑 驳 病 毒 (SPFMV)、 红 薯 潜隐 病 毒 （ SPLV） 、 红 薯 褪 绿 斑 病 毒 （ SPCFV） 的 试 管 苗 。 3.2 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） virus-free
7、 tube （ seedIing）从 育 种 家 种 子 繁 殖 脱 毒 试 管 苗 开 始 ,逐 渐 繁 殖 增 加 种 薯 (苗 )数 量 的 种 薯 生 产 体 系 出 来 的种 薯 (苗 )注 :分 为 育 种 家 种 子 、 原 原 种 、 原 种 生 产 用 种 四 个 级 别 。3.2.1育 种 家 种 子 breeder s seed由 育 种 者 直 接 和 掌 握 的 原 始 种 子 ,具 有 该 品 种 的 典 型 性 的 遗 传 稳 定 性 ,纯 度 100%,不 带 病毒 的 其 他 病 虫 害 ,产 量 及 其 他 主 要 性 状 符 合 推 广 时 的 原 有 水
8、 平 。3.2.2原 原 种 pre - eIite由 育 种 家 种 子 或 典 型 品 种 的 脱 毒 试 管 苗 在 防 虫 网 室 、 温 室 条 件 下 生 产 的 符 合 质 量 标 准 的种 薯 （ 苗 ） 。 3.2.3原 种 eIite用 原 原 种 作 种 薯 ,在 良 好 隔 离 条 件 下 生 产 的 符 合 质 量 标 准 的 种 薯 (苗 )。3.2.4生 产 用 种 certied seed DB 5206/T 85-2018 2 用 原 种 作 种 薯 ,在 良 好 隔 离 条 件 下 生 产 的 符 合 质 量 标 准 的 种 薯 (苗 )。3.3 病 毒 病
9、 株 允 许 率脱 毒 种 薯 繁 殖 田 中 病 毒 病 株 的 比 率 。3.4 真 菌 、 细 菌 病 株 允 许 率脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 繁 殖 田 中 真 菌 、 细 菌 病 株 的 比 率 。3.5 虫 害 株 允 许 率脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 繁 殖 田 中 虫 害 株 的 比 率3.6 混 杂 植 株 的 允 许 率脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 繁 殖 田 中 混 杂 的 其 它 红 薯 品 种 植 株 的 比 率 。 3.7 脱 毒 种 薯 块 根 整 齐 度单 块 质 量 在 100g 的 500g 的 红 薯 种 薯 块 根 质 量 占 块 根 总 质 量 的 比
10、 率 。3.8 有 缺 陷 薯机 械 损 伤 、 虫 鼠 伤 、 畸 形 块 根 总 质 量 的 比 率 。3.9 杂 质一 批 块 根 中 除 具 有 价 值 的 块 根 外 ,其 他 物 质 称 为 杂 质 。 包 含 浮 土 、 块 根 上 所 沾 的 泥 土 、无 种 用 价 值 的 块 根 ， 以 及 其 他 有 机 、 无 机 物 质 质 量 。3.10腐 烂本 标 准 中 指 根 腐 烂 、 软 腐 病 、 镰 刀 菌 干 腐 病 造 成 的 腐 烂 外 ,其 他 原 因 造 成 的 腐 烂 。 4 总 则4.1 脱 毒 红 薯 高 级 脱 毒 试 管 苗 、 脱 毒 红 薯 原
11、 原 种 、 原 种 、 生 产 种 繁 育 单 位 所 生 产 的 种 薯 （ 苗 ） ，必 须 符 合 国 家 规 定 的 有 关 标 准 。4.2 脱 毒 繁 育 体 系 的 建 立 要 根 据 种 植 面 积 及 具 备 的 技 术 条 件 确 定 。 原 原 种 、 原 种 的 繁 育 由 省 、市 、 县 级 具 备 脱 毒 、 组 培 条 件 的 科 研 单 位 或 繁 育 基 地 （ 企 业 ） 进 行 。 生 产 种 的 繁 育 由 县 （ 区 ） 、乡 级 农 业 繁 育 基 地 （ 企 业 ） 单 位 进 行 。 各 育 种 单 位 应 设 立 专 用 繁 育 基 地 ，
12、 繁 种 必 须 持 有 关 部门 发 放 的 脱 毒 种 薯 繁 育 许 可 证 。4.3 进 行 脱 毒 所 用 的 品 种 ， 必 须 是 当 地 大 面 积 的 主 栽 品 种 或 已 经 审 定 即 将 推 广 的 新 品 种 。4.4 脱 毒 红 薯 是 经 过 脱 除 红 薯 羽 状 斑 驳 病 毒 、 红 薯 潜 隐 病 毒 、 红 薯 褪 绿 斑 病 毒 、 红 薯 烟 草 花叶 病 毒 的 种 薯 种 苗 。 5 脱 毒 种 薯 的 质 量5.1 品 种 纯 度高 级 脱 毒 试 管 苗 必 须 是 经 过 严 格 病 毒 检 测 ， 确 任 不 含 有 已 知 病 毒 或
13、 指 定 病 毒 ， 且 经 过 株 DB 5206/T 85-2018 3 系 评 选 而 中 选 的 试 管 苗 以 及 用 其 它 离 体 快 繁 或 防 蚜 条 件 下 速 繁 后 的 试 管 茎 蔓 苗 。 原 原 种 和 原种 的 纯 度 不 低 于 99%， 生 产 种 纯 度 不 低 于 96%。5.2 薯 块 病 虫5.2.1 病 毒 病 ： 原 原 种 薯 的 带 毒 率 0， 原 种 和 生 产 种 的 带 毒 率 不 能 超 过 2%、 10%。5.2.2 其 它 病 虫 害 ： 红 薯 黑 班 病 、 根 腐 病 ， 原 原 种 带 病 率 为 0， 原 种 和 生
14、产 种 带 病 率 不 能 超过 0.1%、 1%。 原 原 种 、 原 种 、 生 产 种 的 茎 线 虫 病 、 根 结 线 虫 病 的 带 病 率 均 为 0。5.3 其 它5.3.1 薯 块 整 齐 度 ： 是 指 种 薯 重 100 500g的 薯 块 占 总 量 的 百 分 比 ； 整 齐 度 不 低 于 85%。 即原 种 、 生 产 种 薯 块 要 求 每 块 重 100 500g。5.3.2 不 完 整 薯 率 ： 机 械 损 伤 、 自 然 干 、 畸 形 薯 所 占 比 率 为 ： 原 原 种 不 超 过 1%、 原 种 不 超过 3%、 生 产 种 不 超 过 6%。6
15、 脱 毒 红 薯 试 管 苗 繁 育 技 术 标 准 6.1 脱 毒 红 薯 茎 尖 苗 的 培 育利 用 植 物 茎 尖 顶 部 分 生 组 织 不 带 或 很 少 携 带 病 毒 的 原 理 ， 在 无 菌 条 件 下 切 取 红 薯 茎 尖 分生 组 织 ， 并 在 特 定 的 培 养 基 上 进 行 离 体 培 养 ， 就 能 够 再 生 出 不 带 有 病 毒 的 茎 尖 脱 毒 苗 。 即 ：选 则 具 有 该 品 种 特 征 特 性 的 无 病 红 薯 苗 茎 顶 部 3 厘 米 长 的 芽 段 ， 用 70%酒 精 、 3%漂 白 粉 液 分别 消 毒 ， 在 超 净 工 作
16、台 内 解 剖 镜 下 剥 离 茎 尖 。 将 剥 离 的 长 0.2-0.5毫 米 （ 一 般 带 1-2个 叶 原基 ） 的 茎 尖 接 种 在 附 加 1-2mg 每 升 6-ba的 ms培 养 基 上 ， 26-28 温 度 下 补 光 培 养 ， 茎 尖 膨大 变 绿 后 转 入 无 激 系 的 ms培 养 基 上 培 养 成 茎 尖 试 管 苗 。 待 苗 长 至 5-6片 叶 时 移 到 营 养 钵 内进 行 病 毒 检 测 。 一 般 来 讲 ， 从 剥 茎 尖 到 诱 导 出 5-7 片 叶 的 茎 尖 苗 至 少 要 用 60-90d。 利 用 分生 组 织 和 外 殖 体
17、 培 养 诱 导 红 薯 茎 尖 苗 是 红 薯 脱 毒 的 技 术 关 键 。6.2 病 毒 检 测茎 尖 分 生 组 织 培 养 得 到 的 茎 尖 苗 并 不 都 是 脱 毒 苗 ， 只 有 部 分 苗 不 含 病 毒 ， 是 脱 毒 苗 ； 茎尖 苗 必 须 经 过 严 格 的 病 毒 检 测 确 认 不 带 病 毒 后 才 是 脱 毒 茎 尖 苗 。 茎 尖 苗 的 检 测 一 般 首 先 采 取目 测 法 淘 汰 弱 苗 和 显 症 苗 ， 然 后 再 用 血 清 学 方 法 或 分 子 生 物 学 方 法 进 行 筛 选 。 经 血 清 学 或 分 子 生 物 学 方 法 检 测
18、 呈 阴 性 的 样 品 再 进 行 指 示 植 物 嫁 接 检 测 。6.3 优 良 株 系 评 选红 薯 的 芽 变 率 比 较 高 ， 茎 尖 分 生 组 织 培 养 再 生 的 茎 尖 苗 株 系 间 在 形 态 和 产 量 方 面 往 往 存在 较 大 差 异 。 因 此 ， 经 病 毒 检 测 确 认 的 脱 毒 苗 必 须 进 行 优 良 株 系 评 选 ， 淘 汰 变 异 株 系 ， 保 留优 良 株 系 。 株 系 评 选 的 方 法 是 ： 将 脱 毒 苗 株 系 每 系 5-10 株 栽 种 到 防 虫 网 室 内 ， 以 同 品 种 普通 带 毒 薯 为 对 照 ， 进
19、 行 形 态 、 长 势 、 产 量 等 多 方 面 的 观 察 评 定 ， 选 出 若 干 既 符 合 品 种 特 性 又高 产 的 最 优 株 系 ， 混 合 繁 殖 。7 高 级 脱 毒 试 管 苗 速 繁利 用 茎 尖 分 生 组 织 培 养 获 得 脱 毒 苗 后 ， 要 获 得 大 田 生 产 利 用 的 足 够 脱 毒 苗 ， 快 速 繁 殖 技术 起 着 决 定 性 作 用 。 脱 毒 红 薯 茎 尖 苗 的 大 量 繁 殖 ， 可 以 采 用 试 管 苗 单 叶 节 快 繁 或 温 网 棚 繁 殖 2种 方 式 来 完 成 。7.1 高 级 脱 毒 苗 试 管 快 繁 脱 毒
20、 苗 试 管 快 繁 具 有 以 下 优 越 性 ： （ 1） 繁 殖 速 度 快 。 在 合 适 的 培养 条 件 下 （ 温 度 25 ， 每 天 光 照 18 小 时 ） ， 1 个 茎 节 1个 月 内 即 可 长 成 具 5-6片 叶 的 小 植 株 ，以 继 代 1 次 增 殖 5 株 计 算 ， 其 繁 殖 系 数 为 5n。 （ 2） 避 免 病 毒 再 侵 染 。 脱 毒 苗 的 试 管 快 繁 是 DB 5206/T 85-2018 4 在 严 格 的 无 菌 条 件 下 进 行 的 ， 即 没 有 病 毒 源 也 没 有 传 播 媒 介 。 （ 3） 继 代 繁 殖 成
21、活 率 高 。 除 极少 数 由 于 操 作 不 慎 造 成 试 管 苗 污 染 外 ， 单 茎 叶 成 苗 率 达 100%。 （ 4） 不 受 季 节 、 气 候 和 空 间限 制 ， 可 以 进 行 工 厂 化 生 产 。7.1.1 脱 毒 苗 试 管 快 繁 采 用 不 加 任 何 激 素 的 MS 培 养 基 。7.1.2 将 待 繁 的 高 级 脱 毒 试 管 苗 在 无 菌 条 件 下 切 成 一 叶 一 节 的 切 段 ， 扦 插 在 无 激 素 的 MS 培养 基 上 ， 在 26-28 、 14-16h 光 照 条 件 下 离 体 培 养 ， 25-30d左 右 即 可 长
22、 成 5-7片 叶 大 小 的幼 苗 ， 即 又 可 进 行 下 一 轮 切 段 快 繁 。 繁 殖 系 数 呈 几 何 级 数 增 加 。7.2 高 级 脱 毒 试 管 苗 的 田 间 快 繁7.2.1 脱 毒 试 管 苗 的 田 间 快 繁 采 用 防 蚜 塑 料 大 棚 设 备 或 防 蚜 竹 （ 木 ） 大 棚 设 备 。7.2.2 隔 离 措 施 500米 内 无 普 通 带 毒 红 薯 空 间 隔 离 ， 繁 殖 棚 加 盖 40目 防 蚜 网 。7.2.3 苗 床 培 养 土 用 林 间 表 层 细 土 加 经 高 温 发 酵 过 筛 的 生 物 有 机 肥 ， 土 、 肥 比
23、例 6： 4或 7： 3， 充 分 混 匀 即 为 苗 床 营 养 土 ， 苗 床 营 养 土 厚 度 10-15cm。 7.2.4 脱 毒 红 薯 试 管 苗 防 蚜 塑 料 大 棚 快 繁在 3 月 上 -中 旬 将 5-7片 叶 的 脱 毒 试 管 苗 打 开 瓶 口 ， 室 温 下 加 光 照 炼 苗 5-7d。 栽 前 头 天下 午 在 棚 内 苗 床 上 撤 上 用 100g50%辛 硫 硫 乳 油 兑 水 2.5-5kg稀 释 后 与 15-25kg干 饵 料 拌 成 的毒 饵 ， 以 消 灭 地 下 害 虫 。 然 后 按 5 5cm行 株 距 栽 种 在 覆 盖 防 虫 网
24、的 塑 料 大 棚 内 ， 浇 足 水 后加 盖 一 层 小 拱 棚 ， 把 温 度 控 制 在 25 摄 氏 度 左 右 。 待 苗 长 至 15-20cm时 剪 下 蔓 头 苗 继 续 栽 种 、快 繁 。 采 用 这 种 双 膜 育 苗 方 法 繁 殖 系 数 可 以 达 到 100倍 以 上 。 但 要 注 意 小 水 勤 浇 ， 通 风 通 气 ，保 证 温 度 既 不 能 低 于 10 ， 也 不 能 高 于 30 。7.2.5 脱 毒 红 薯 试 管 苗 防 蚜 竹 （ 木 ） 网 棚 快 繁在 3月 下 旬 至 4月 上 旬 将 经 过 锻 炼 的 5-7片 叶 的 脱 毒 试
25、 管 苗 或 在 塑 料 大 棚 内 剪 下 的 试 管蔓 头 苗 （ 按 每 苗 2-3 片 叶 ） ， 栽 植 于 防 蚜 虫 大 棚 内 营 养 土 苗 床 上 ， 行 株 距 10 8cm。 栽 前 仍用 药 剂 处 理 苗 床 防 治 地 下 害 虫 。 栽 后 勤 施 肥 水 ， 温 度 控 制 在 25-30 ， 待 苗 长 至 15 厘 米 左右 时 摘 心 ， 以 促 进 其 分 枝 。 以 后 待 分 枝 苗 长 至 5 片 叶 时 继 续 剪 苗 快 繁 ， 或 直 接 用 于 繁 殖 原 原种 。 7.2.6 繁 苗 过 程 中 传 毒 再 侵 染 的 防 止 。 从
26、栽 植 苗 之 日 计 每 隔 7-10d定 期 对 苗 床 上 栽 植 的 红 薯试 管 苗 喷 洒 防 治 蚜 虫 药 剂 ， 以 防 止 蚜 虫 带 毒 传 播 。8 脱 毒 红 薯 原 原 种 繁 育 技 术 标 准8.1 原 原 种指 在 防 蚜 虫 网 棚 内 无 病 原 土 壤 上 栽 种 的 高 级 脱 毒 试 管 苗 或 用 棚 内 脱 毒 试 管 苗 繁 育 的 茎蔓 苗 生 产 的 种 薯 。 用 原 原 种 薯 在 防 蚜 虫 条 件 下 育 出 的 薯 苗 叫 原 原 种 苗 。8.2 脱 毒 红 薯 原 原 种 繁 育 必 须 具 备 的 条 件8.2.1 栽 种
27、的 种 苗 必 须 是 高 级 脱 毒 试 管 苗 或 用 高 级 脱 毒 试 管 苗 在 防 蚜 条 件 下 繁 育 的 茎 蔓 苗 。8.2.2 必 须 在 防 虫 网 棚 内 生 产 原 原 种 。 防 虫 网 棚 是 繁 育 原 原 种 的 重 要 条 件 之 一 ， 所 用 防 虫 网的 网 眼 必 须 在 40 目 以 上 ， 这 样 的 网 目 蚜 虫 才 不 能 通 过 ， 可 以 较 大 限 度 地 减 少 蚜 虫 传 播 病 毒 的 机 会 。8.2.3 网 棚 内 所 用 地 块 必 须 是 无 病 原 土 壤 ， 最 好 是 多 年 未 栽 种 过 红 薯 的 土 壤
28、。8.2.4 在 繁 育 原 原 种 的 整 个 过 程 中 ， 要 始 终 贯 穿 防 止 病 毒 再 侵 染 的 意 识 以 及 防 止 再 侵 染 的 措施 。8.2.5 在 网 棚 内 每 隔 5-10米 种 植 5 株 以 上 的 指 示 植 物 ， 并 在 原 原 种 生 产 过 程 中 定 期 逐 株 观 DB 5206/T 85-2018 5 察 是 否 有 病 毒 症 状 ， 一 旦 发 现 病 株 ， 须 对 全 棚 进 行 普 查 ， 要 坚 决 拔 除 带 毒 病 株 。 如 果 网 棚 内所 栽 植 的 指 示 植 物 表 现 病 毒 症 状 ， 整 个 棚 内 繁
29、殖 的 种 薯 应 降 级 使 用 。8.2.6 每 隔 10-15d喷 洒 一 次 杀 虫 药 剂 ， 防 治 蚜 虫 ， 以 防 传 毒 ， 药 剂 应 轮 换 使 用 ， 避 免 产 生抗 药 性 ， 达 不 到 防 蚜 效 果 。8.3 技 术 工 艺 流 程隔 离 条 件 土 地 选 择 土 壤 消 毒 生 物 有 机 肥 加 复 合 肥 （ 基 肥 ） 单 行 起 垄 移栽 5000 株 /667m2密 度 夏 薯 栽 培 多 次 灭 蚜 （ 成 活 后 每 10d 一 次 ） 提 蔓 管 理 适 时 采 收 分 级 包 装 入 窖 。8.4 技 术 及 经 济 指 标种 薯 纯
30、度 99% 种 薯 大 小 100g-500g， 每 667m 2种 薯 产 量 1000kg,无 病 虫 率 99%8.5 材 料 （ 以 667m2计 ）种 苗 5000 株 、 生 物 有 机 肥 200kg、 复 合 肥 25kg， 50%硫 酸 钾 20kg、 土 壤 消 毒 剂 、 灭 蚜剂 等 。8.6 繁 种 移 栽 时 间6 月 上 旬 至 中 旬8.7 种 薯 收 获 时 间10 月 下 旬 至 11 月 初9 脱 毒 红 薯 原 种 繁 育 技 术 标 准9.1 原 种 指 利 用 原 原 种 苗 在 具 备 500m 以 上 隔 离 条 件 （ 即 500m 内 没 有
31、 种 植 普 通 带 毒 红 薯 ） 而 且土 壤 无 病 原 的 田 块 生 产 的 种 薯 。 由 原 种 在 防 蚜 条 件 下 育 出 的 薯 苗 叫 原 种 苗 。9.2 原 种 繁 育 必 须 具 备 的 条 件9.2.1 所 用 薯 苗 为 原 原 种 苗 ；9.2.2 具 有 500m内 无 普 通 带 毒 红 薯 种 植 的 空 间 隔 离 条 件 ；9.2.3 所 用 田 块 至 少 3 年 以 上 没 种 过 普 通 带 毒 红 薯 ， 且 为 无 茎 线 虫 病 、 根 腐 病 、 黑 斑 病 等 。原 种 繁 殖 时 要 密 切 注 意 防 止 病 毒 再 侵 染 。
32、 要 在 繁 殖 田 内 每 隔 15-20 米 种 植 一 些 指 示 植物 ， 每 15d定 期 喷 洒 防 蚜 虫 药 剂 ， 以 防 蚜 虫 传 毒 。 收 获 前 要 观 察 病 毒 发 病 情 况 ， 及 时 拔 去 病株 。 收 获 时 严 把 质 量 关 ， 不 符 合 质 量 要 求 的 薯 块 坚 决 不 入 窖 。9.3 技 术 工 艺 流 程种 薯 加 温 育 苗 隔 离 条 件 土 地 选 择 土 壤 消 毒 生 物 有 机 肥 加 复 合 肥 （ 基肥 ） 单 行 起 垄 移 栽 密 度 6000 株 /667m 2 夏 薯 栽 培 灭 蚜 提 蔓 喷 施 矮壮 素
33、 适 时 采 收 分 级 包 装 入 窖 。9.4 技 术 及 经 济 指 标种 薯 纯 度 99% 种 薯 大 小 100-500g， 667m2种 薯 产 量 1200-1500kg， 无 病 虫 率 99%9.5 材 料 （ 以 667m2计 ）原 原 种 薯 50kg、 育 苗 生 物 增 温 剂 1 包 （ 25kg） ； 移 栽 用 生 物 有 机 肥 200kg、 复 合 肥 25kg；50%硫 酸 钾 20kg； 土 壤 消 毒 剂 、 灭 蚜 剂 、 育 苗 用 薄 膜 。9.6 种 薯 育 苗 时 间 及 方 法种 薯 于 3 月 下 旬 至 4 月 上 旬 播 种 育 苗
34、 ， 采 用 网 室 大 棚 增 温 育 苗 法 ， 每 50kg 种 薯 可 出 壮苗 6000 8000 株 。 DB 5206/T 85-2018 6 9.7 移 栽 时 间6 月 中 旬 至 下 旬9.8 种 薯 收 获 时 间10 月 下 旬 至 11 月 初10 脱 毒 红 薯 生 产 种 繁 育 技 术 标 准10.1 生 产 种指 利 用 原 种 苗 在 普 通 无 病 留 种 田 块 生 产 的 种 薯 。 由 生 产 种 在 防 蚜 条 件 下 培 育 的 苗 叫 生 产种 苗 。10.2 生 产 种 繁 育 必 须 具 备 的 条 件10.2.1 必 须 用 原 种 苗
35、进 行 繁 育 。10.2.2 所 用 田 块 应 为 无 病 留 种 田 ， 无 茎 线 虫 病 、 根 腐 病 、 黑 斑 病 等 。 10.2.3 在 整 个 繁 育 过 程 中 ， 每 隔 15d定 期 喷 洒 防 蚜 虫 药 剂 ， 以 防 止 蚜 虫 传 毒 ， 保 证 生 产 种质 量 。10.3 技 术 工 艺 流 程种 薯 竹 拱 棚 加 温 育 苗 隔 离 条 件 土 地 选 择 土 壤 消 毒 生 物 有 机 肥 加 复 合肥 （ 基 肥 ） 单 行 起 垄 移 栽 密 度 6000/667m2 夏 薯 栽 培 灭 蚜 提 蔓 喷施 矮 壮 素 适 时 采 收 分 级 包
36、 装 入 窖 提 供 农 户 大 田 用 种 薯 。10.4 技 术 及 经 济 指 标种 薯 纯 度 96% 种 薯 大 小 100-500g， 667m2种 薯 产 量 1500 2000kg、 无 病 率 96%10.5 育 苗 方 法 及 时 间在 选 择 确 定 的 隔 离 区 内 、 采 用 大 田 竹 拱 棚 保 温 、 增 温 剂 苗 床 育 苗 法 ， 每 50kg 原 种 薯 可出 苗 6000 8000 株 种 苗 。 种 薯 于 3 月 中 旬 -下 旬 播 种 育 苗 。10.6 移 栽 时 间 和 收 获 时 间参 照 脱 毒 红 薯 原 种 繁 殖 。 11 脱
37、毒 红 薯 不 同 级 别 脱 毒 苗 的 病 毒 检 测 方 法11.1 红 薯 病 毒 病 的 症 状红 薯 病 毒 病 主 要 包 括 ：（ 1） 叶 斑 型 。 主 要 有 紫 色 羽 状 斑 、 紫 斑 、 紫 环 斑 、 黄 色 斑 或 者 枯 斑（ 2） 花 叶 型 。 苗 期 感 病 后 ， 初 期 叶 脉 呈 网 状 透 明 。 后 沿 叶 脉 出 现 不 规 则 黄 绿 相 间 的 花 叶斑 纹 。（ 3） 卷 叶 型 。 叶 片 边 缘 上 卷 ， 严 重 者 可 形 成 杯 状 。（ 4） 叶 片 皱缩 型 。 病 苗 叶 片 较 小 ， 皱 缩 ， 叶 缘 不 整 齐
38、 ， 甚 至 扭 曲 畸 形 。（ 5） 叶 片 黄 化 型 。 包 括 叶 片 黄 化 型 及 网 状 黄 脉 。 薯 块 上 的 症 状 主 要 是 产 生 黑 褐 色 龟 裂 纹 。11.2 红 薯 不 同 级 别 脱 毒 苗 的 检 测 方 法 由 于 红 薯 脱 毒 苗 在 繁 育 过 程 中 极 易 受 到 病 毒 的 再 侵 染 ， 因 此 ， 在 繁 种 过 程 中 ， 除 根 据不 同 级 别 种 薯 的 繁 种 要 求 采 取 防 治 蚜 虫 等 必 要 措 施 外 ， 还 应 加 强 病 毒 的 检 测 ， ， 及 时 淘 汰感 病 种 薯 以 保 证 脱 毒 种 薯 的
39、 质 量 。 根 据 不 同 级 别 种 薯 对 病 毒 感 染 率 的 要 求 ， 可 采 取 不 同 的病 毒 检 测 方 法 。 DB 5206/T 85-2018 7 11.2.1 茎 尖 苗 的 检 测茎 尖 苗 的 检 测 可 首 先 采 取 目 测 法 。 由 于 脱 毒 茎 尖 苗 和 带 毒 茎 尖 苗 在 形 态 、 长 势 上 有 明 显差 异 ， 前 者 生 长 快 、 叶 片 平 展 、 植 株 较 健 壮 ； 后 者 长 势 弱 ， 叶 片 上 常 出 现 花 叶 、 明 脉 和 褪 绿斑 等 症 状 ， 因 此 ， 可 先 用 目 测 法 淘 汰 弱 苗 和 显
40、症 苗 。 然 后 再 用 血 清 学 方 法 或 分 子 生 物 学 方 法进 行 筛 选 ， 经 血 清 学 或 分 子 生 物 学 方 法 检 测 呈 阴 性 的 样 品 再 进 行 嫁 接 。 每 个 茎 尖 苗 一 般 嫁 接3-5株 ， 有 1 株 发 病 即 认 为 该 样 带 毒 ， 对 于 都 不 发 病 的 样 品 应 再 重 复 嫁 接 1次 。11.2.2 原 原 种 田 的 检 测脱 毒 原 原 种 的 繁 殖 一 般 在 防 虫 网 室 内 进 行 ， 原 原 种 田 病 毒 的 检 测 方 法 是 ： 首 先 在 原 原种 田 种 植 若 干 株 巴 西 牵 牛
41、植 物 ， 定 期 观 察 巴 西 牵 牛 是 否 显 症 、 以 判 断 是 否 有 蚜 虫 传 毒 ； 对原 原 种 田 还 要 进 行 定 期 普 查 ， 及 时 淘 汰 显 症 株 和 变 异 株 ； 另 外 对 原 原 种 田 要 定 期 取 样 ， 用血 清 学 方 法 或 嫁 接 指 标 植 物 的 方 法 进 行 检 测 ， 以 判 断 原 原 种 田 病 毒 的 感 染 情 况 ， 对 于 病 毒感 染 率 超 标 的 繁 种 田 要 降 级 使 用 。11.2.3 原 种 田 的 检 测 脱 毒 原 种 的 繁 殖 要 在 有 一 定 隔 离 区 的 地 方 进 行 ， 即
42、 周 围 500米 内 不 能 种 植 非 脱 毒 薯 。原 种 田 的 病 毒 检 测 以 目 测 法 和 田 间 种 植 巴 西 牵 牛 为 主 ， 必 要 时 田 间 取 样 用 血 清 学 方 法 检 测病 毒 的 感 染 率 。11.2.4 生 产 种 田 的 检 测生 产 种 田 的 病 毒 检 测 以 目 测 法 为 主 ， 就 是 要 定 期 对 生 产 种 田 的 发 病 率 进 行 调 查 ， 必 要时 也 可 抽 样 用 血 清 学 方 法 检 测 ， 当 发 病 率 超 过 一 定 标 准 时 就 不 能 再 作 为 种 薯 使 用 。11.3 脱 毒 红 薯 病 毒
43、检 测 操 作 方 法11.3.1目 测 法根 据 红 薯 叶 片 和 薯 块 上 出 现 的 典 型 症 状 （ 见 本 标 准 9.1） 来 判 断 红 薯 是 否 感 染 病 毒 。 但病 毒 病 的 症 状 可 因 病 毒 种 类 、 红 薯 品 种 以 及 环 境 条 件 等 因 素 的 影 响 而 改 变 ， 因 此 根 据 目 测 法只 能 作 为 初 步 判 断 。 进 行 目 测 法 还 要 注 意 区 分 红 薯 品 种 特 性 以 及 由 于 土 壤 水 分 过 大 ， 营 养 失调 等 原 因 造 成 的 生 理 病 害 与 红 薯 病 毒 病 症 状 之 间 的 区
44、别 。11.3.2 指 标 植 物 法 常 用 巴 西 牵 牛 （ Ipomoeasetosa） 作 指 示 植 物 ， 几 乎 所 有 侵 染 红 薯 的 病 毒 都 能 感 染 巴 西牵 牛 ， 因 此 ， 将 薯 苗 嫁 接 在 巴 西 牵 牛 上 ， 从 巴 西 牵 年 的 显 症 情 况 可 判 断 薯 苗 是 否 带 毒 。 具 体嫁 接 方 法 如 下 ： 以 薯 苗 芽 尖 作 接 穗 ， 将 芽 尖 削 成 楔 型 ， 另 将 具 3-4片 真 叶 的 巴 西 牵 牛 作 砧 木 ，在 其 茎 叶 部 切 一 斜 口 把 楔 形 接 穗 插 入 ， 用 封 口 膜 扎 住 ，
45、 置 防 虫 网 室 内 遮 阴 保 湿 3-4d， 然 后在 自 然 光 照 下 观 察 记 载 牵 牛 的 显 症 情 况 ， 一 般 嫁 接 后 25-30d 左 右 开 始 出 现 症 状 ， 显 症 初 期新 生 叶 出 现 系 统 性 明 脉 ， 以 后 发 展 为 花 叶 或 皱 缩 等 症 状 。11.3.3 红 薯 病 毒 的 血 清 学 检 测常 用 的 血 清 学 检 测 方 法 为 酶 联 免 疫 吸 附 法 （ ELISA） 或 在 此 基 础 上 改 变 的 斑 点 酶 联 免疫 吸 附 法 （ Dot-Blot ELISA） 等 。 Dot-Blot ELISA
46、具 有 快 速 和 可 检 测 大 量 样 品 的 特 点 ， 在大 量 检 测 样 品 时 经 常 应 用 。 具 体 检 测 方 法 如 下 ：（ 1） 样 品 处 理 ： 取 直 径 约 为 1cm 的 样 品 叶 片 （ 约 0.1g） ， 加 入 1ml 抽 提 缓 冲 液 ， 迅 速研 磨 ， 置 小 离 心 管 中 ， 取 上 清 液 供 检 测 用 。（ 2） 点 样 ： 将 NC膜 在 TBS（ 20mM Tris-HCL, pH7.5， 150mM NaCl,） 中 充 分 湿 润 ， 然 后 放 在 一 张 干 燥 滤 纸 上 ， 让 其 稍 干 燥 ， 用 铅 管 作
47、好 记 号 ， 用 微 量 取 样 器 进 行 点 样 ， 点 样 后 让NC膜 自 然 干 燥 。（ 3） 反 应 ：（ a） 封 闭 ： 将 点 样 后 的 NC 膜 转 入 封 闭 液 （ TBST+5%脱 脂 奶 粉 ） 中 封 闭 1 小 时 或 4 封闭 过 夜 。 DB 5206/T 85-2018 8 （ b） 第 一 抗 体 反 应 ： 封 闭 后 的 NC 膜 用 TBST（ 20mM Tris-HCL, pH7.5， 150mM NaCl,0.05%Tween-20） 漂 先 2-3次 ， 每 次 5-10分 钟 ， 加 入 用 TBST 稀 释 的 病 毒 专 化 抗 血 清 （ 1：2000） 37 保 温 1h ， 再 用 TBST洗 膜 3次 ， 每 次 5-10min。（ c） 第 二 抗 体 反 应 ： 加 入 TBST稀 释 的 碱 性 磷 酸 脂 酶 标 记 的 羊 抗 兔 IgG（ 1： 5000） ，
