1、ICS 01.040.65 B40/49 备案号：35833-2013 DB63 青海省地方标准 DB 63/T 11662012 散养牛人工授精技术操作规程 2012 - 12 - 04 发布 2013 - 01 - 01 实施 青海省质量技术监督局 发布 DB63/T 11662012 1 前 言 本规程的编写符合GB/T 1.1-2009的规则。 本规程由青海大学提出并归口。 本规程起草单位：青海省畜牧兽医科学院。 本规程起草人：徐尚荣，彭巍，孙建，张君，赛琴，赵婷静，陈光宏，许存有，靳智勇。 DB63/T 11662012 2 散养牛人工授精技术操作规程 1 范围 本规程规定了散养牛人
2、工授精技术的基本操作方法和操作要求。 舍饲奶牛和肉用牛可借鉴本标准执 行。 本规程适用于细管冻精和性控冻精的牛人工授精操作。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4143 牛冷冻精液 GB/T 5458 液氮生物容器 3 冷冻精液的保存和解冻 3.1 冷冻精液的保存 3.1.1 液氮液态生物容器在运输过程中要注意防热、防震、防碰撞，容器外部加上保护套或其它保护 装置。 3.1.2 液氮罐的条件必须符合 GB5458 液氮生物容器，液氮罐必须每年
3、清洗一次。 3.2 冷冻精液的解冻 3.2.1 冷冻精液必须液态生物容器中，运输和贮藏过程中均不能脱离液态生物容器液氮。每批精液人 工授精前必须精液品质检查，精子活率检查：参照 GB4143 牛冷冻精液规定执行。每年繁殖季节开始前 和新引进精液后，必须进行精子活力的检查，精液活力低于 0.35，精液不能使用；定期检查并及时添 加液态生物容器中的液氮，液氮量不能少于液态生物容器的 1/3。 3.2.2 取冻精时，液氮罐中盛放冻精的提斗不能超过液氮罐的颈部，精液在空气中的停留时间不超过 10 秒。 3.2.3 细管冻精解冻时直接把细管投入 38-40温水中，10 秒-12 秒钟后取出，即冻精颜色由
4、乳白 色变为黄色即可。 3.2.4 解冻精液在输精前应保存 17-20温度下，以保持精液的活力。在解冻后 1 小时内输精，最 迟不能超过 2 小时。 4 发情鉴定 4.1 外部观察法 DB63/T 11662012 3 4.1.1 试情法 母牛主动接受试情公牛爬跨、不避让认定为发情。 4.1.2 观察法 母牛主动接受同圈舍母牛爬跨、从阴门流出大量粘稠的黏液，且黏液透明，牵缕不断，为发情。 4.1.3 计步器法 母牛通过佩戴计步器，利用接收器统计牛的运动量达到发情标准判定为发情。 4.2 直肠检查法 直肠检查卵巢上有成熟卵泡，无持久黄体，卵泡弹性较好，且两侧卵巢体积差别明显，可以进行人 工授精。
5、对于不同年龄、不同营养状况的发情牛，配种时间的安排因区别对待，青年牛发情排卵时间较 其他牛晚，经产且营养状况良好牛次之，营养状况差的牛发情排卵最快。 4.3 B 超检查法 B超检查是通过B超探头对卵巢及卵泡发育进行视频观察，若发现卵巢上有成熟卵泡即可输精。 5 输精器械 5.1 消毒药品 酒精75%，2%-5%新洁尔灭液或0.1%高锰酸钾溶液。 5.2 器械 与现有输精枪外套乡匹配的输精枪两把，长镊子（20厘米）以上两把，精液剪一把，水浴锅或500 毫升的平底容器一个，100度温度计一支，一次性输精枪外 套，长臂塑料手套，消毒纱布一块或毛巾一 条。 6 人工授精 6.1 输精时间 发现母牛主动
6、接受爬跨后6小时-10小时进行输精，12小时后进行第二次输精。青年牛输精时间稍推 迟2小时，老年牛输精时间可以稍提2小时。 6.2 消毒方法 6.2.1 输精器械消毒 6.2.1.1 输精前消毒 精液剪、输精枪和装好精液的输精枪外套用75%的酒精擦拭消毒。 6.2.1.2 输精后消毒 精液剪，输精枪清洗干净后擦拭并用75%的酒精消毒，放置于干燥处下一次输精。 DB63/T 11662012 4 6.2.2 发情牛外阴消毒 助手将牛尾牵引至配种员方便操作的一侧固定， 或配种员将牛尾牵引至不影响自己操作的一侧并固 定，充分暴露外阴，用2%-5%新洁尔灭液或0.1% 高门酸钾溶液清洗外阴（洗净外阴的
7、粪便和其他如分泌 物干痂及皮屑等），然后用消毒过的毛巾或纱布擦拭干净。 6.3 直肠把握深部精法 配种员一只手戴上一次性塑料长臂手套，用干净温水沾湿手臂或手臂沾上石蜡油呈锥形旋转伸 入直肠,寻找子宫颈，用中指、食指无名指和拇指握住子宫颈外口端，使子宫颈外口端与小拇指形成的 环口持平。 并用伸入直肠的手臂压开阴门裂， 另一只手持输精管由阴门缓慢插入， 先斜向上再转成水平。 然后借助握子宫颈外口处的手与持输精管的手进行密切的配合，使输精管缓缓进入子宫颈深部，即有优 势卵泡发育侧子宫角大弯处，再缓缓的注入精液。输入精液后再缓慢旋转抽出输精枪。 7 配种登记和饲养管理 7.1 配种登记 见附录A。 7
8、.2 饲养管理 配种后加强母牛饲养管理，仔细观察采食、运动等日常行为，观察是否再出现发情。 8 妊娠诊断 最后一次发情配种后20天-60天进行怀孕诊断。 8.1 直肠检查法 最后一次配种35天-60天通过直肠检查触摸卵巢和子宫角判定是否怀孕。检查时，先摸到子宫颈， 再将手指向前滑动，寻找角间沟；然后将手向前、向下、再向后，试把两个子宫角都掌握在手内，分别 触摸。这时可先握住子宫颈将子宫角向后拉，然后手带着肠管迅速向前滑动，握住子宫角，这样逐渐向 前移，就能摸清整个子宫角。摸过子宫角后，在其尖端外侧或下侧寻找卵巢。一侧卵巢上有突出于卵巢 表面的怀孕黄体（卵巢上同时似有多个卵泡发育，似由許多個小球堆成一個大的球体或圆锥体，触摸时 卵巢似蜂窝狀），且比另一侧卵巢大2陪以上，且两侧卵巢质地均较柔软即为怀孕；妊娠40天-60天的角 间沟清楚，两角之间的分岔仍然明显，只是两 子宫角大小不对称，妊娠角较空角粗1-2倍，角壁变薄变 软有波动。 8.2 B 超诊断法 在最后一次配种20天后利用7.5Hz直肠探头在母牛子宫进行探查胚泡的形成情况和卵巢的妊娠黄体 形成情况，为提高准确率45天-60天重复检查一次。 DB63/T 11662012 5 A 附 录 A (资料性附录) 散养牛配种登记表 表 A.1 散养牛配种登记表 养殖户姓名 牛号 精液号 配种时间 怀孕结果 预产期 备注 _
